| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-28页 |
| ·生物活性肽 | 第10-12页 |
| ·肽呈味作用的特点 | 第10-11页 |
| ·国内外肽的呈味功能研究概况 | 第11-12页 |
| ·牛肉风味强化肽 | 第12-14页 |
| ·牛肉风味肽的呈味特性 | 第12-13页 |
| ·牛肉风味肽的稳定性 | 第13页 |
| ·牛肉风味强化肽的研究进展 | 第13-14页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第14-17页 |
| ·毕赤酵母表达系统表达外源蛋白的一般步骤 | 第15-16页 |
| ·外源蛋白的表达方式 | 第16页 |
| ·外源蛋白的翻译后修饰加工 | 第16页 |
| ·外源蛋白的降解 | 第16-17页 |
| ·发酵罐中毕赤酵母表达条件的控制 | 第17-18页 |
| ·pH控制 | 第17页 |
| ·溶氧控制 | 第17-18页 |
| ·碳源流加方式控制 | 第18页 |
| ·蛋白质的分离纯化 | 第18-25页 |
| ·硫酸铵盐析法 | 第20-21页 |
| ·中空纤维超滤法 | 第21-23页 |
| ·离子交换法 | 第23-25页 |
| ·美拉德呈味反应 | 第25-27页 |
| ·美拉德呈味反应 | 第25页 |
| ·咸味香精 | 第25页 |
| ·肉类风味形成的前体物质 | 第25-27页 |
| ·本课题的研究意义和研究内容 | 第27-28页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第27页 |
| ·主要内容 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-41页 |
| ·实验材料 | 第28-31页 |
| ·主要实验试剂 | 第28-29页 |
| ·实验仪器 | 第29-30页 |
| ·菌种 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·培养方法 | 第31页 |
| ·工程菌活化 | 第31页 |
| ·摇床培养 | 第31页 |
| ·发酵罐培养 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-34页 |
| ·生物量的测定 | 第31-32页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第32页 |
| ·目标蛋白BMP含量的测定 | 第32页 |
| ·发酵液预处理 | 第32页 |
| ·发酵上清液中的蛋白提取方法 | 第32-33页 |
| ·SDS—PAGE蛋白电泳方法 | 第33-34页 |
| ·发酵罐控制 | 第34-36页 |
| ·发酵罐在线监测 | 第34-35页 |
| ·发酵罐pH值控制 | 第35页 |
| ·发酵罐溶氧控制 | 第35页 |
| ·发酵罐搅拌转速控制 | 第35-36页 |
| ·发酵罐消泡控制 | 第36页 |
| ·发酵罐补料控制 | 第36页 |
| ·发酵液的分离纯化 | 第36-39页 |
| ·硫酸铵分段盐析法 | 第36-37页 |
| ·发酵上清液的中空纤维柱超滤 | 第37-38页 |
| ·阴离子交换树脂分离 | 第38-39页 |
| ·Western-blotting分析 | 第39页 |
| ·美拉德呈味反应 | 第39-41页 |
| ·热反应牛肉香基的基本配方 | 第39-40页 |
| ·牛肉汤的制备 | 第40页 |
| ·美拉德反应 | 第40页 |
| ·感官评价实验 | 第40-41页 |
| 3 结果与讨论 | 第41-67页 |
| ·P.pastoris GS115摇床水平中表达条件优化 | 第41-43页 |
| ·种子生长曲线及种龄确定 | 第41页 |
| ·总蛋白标准曲线的测定 | 第41-42页 |
| ·基因拷贝数对毕赤酵母工程菌表达BMP的影响 | 第42-43页 |
| ·摇床水平上甲醇添加量的优化 | 第43页 |
| ·P.psatoris GS 115-16B2发酵罐中表达条件优化 | 第43-51页 |
| ·甘油分批培养阶段P.pastoris GS115-16B2菌体形态观察 | 第44-45页 |
| ·甘油补料周期对BMP表达的影响 | 第45-46页 |
| ·甲醇诱导流加策略对BMP表达的影响 | 第46-51页 |
| ·目标蛋白BMP的鉴定 | 第51-52页 |
| ·P.pistoris-GS115表达BMP的分离纯化 | 第52-62页 |
| ·硫酸铵盐析法 | 第52-54页 |
| ·中空纤维超滤法 | 第54-57页 |
| ·离子交换树脂分离法 | 第57-61页 |
| ·分离纯化小结 | 第61-62页 |
| ·美拉德呈味反应 | 第62-67页 |
| ·还原糖种类和肽添加量对产物风味的影响 | 第62-64页 |
| ·牛脂添加量对产物风味的影响 | 第64页 |
| ·木糖添加量对产物风味的影响 | 第64-65页 |
| ·美拉德呈味强化反应 | 第65-67页 |
| 4 结论 | 第67-69页 |
| 5 展望 | 第69-70页 |
| 6 参考文献 | 第70-77页 |
| 7 攻读硕士研究生学位期间发表论文情况 | 第77-78页 |
| 8 致谢 | 第78页 |
