| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第1章 绪论 | 第14-27页 |
| 1.1 丙烯酰胺及其毒性研究概述 | 第14-19页 |
| 1.1.1 食品中的丙烯酰胺 | 第14-15页 |
| 1.1.2 丙烯酰胺毒性研究现状 | 第15-19页 |
| 1.2 高通量测序技术研究进展、应用及前景 | 第19-22页 |
| 1.2.1 测序技术的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.2.2 Illumina/Solexa测序技术 | 第20-21页 |
| 1.2.3 高通量测序技术在转录组学中的应用 | 第21-22页 |
| 1.2.4 高通量测序技术的发展前景 | 第22页 |
| 1.3 Ras/MAPK信号转导通路的研究进展 | 第22-25页 |
| 1.3.1 Ras/MAPK信号转导通路概述 | 第22-23页 |
| 1.3.2 Ras/MAPK通路在肝脏氧化损伤及致癌机制中的作用 | 第23-24页 |
| 1.3.3 Ras/MAPK通路在丙烯酰胺毒性机制中起到的作用 | 第24-25页 |
| 1.4 研究意义及全文主要内容 | 第25-27页 |
| 1.4.1 研究意义 | 第25页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第25-26页 |
| 1.4.3 技术路线 | 第26-27页 |
| 第2章 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞活力影响及表型损伤指标影响 | 第27-42页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.3.1 BRL-3A细胞的培养 | 第28-29页 |
| 2.3.2 用CCK-8法测定丙烯酰胺对细胞活力的影响 | 第29页 |
| 2.3.3 酶联免疫法测定丙烯酰胺对BRL-3A细胞的氧化损伤因子GST、GSH-Px、SOD水平的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.4 酶联免疫法测定丙烯酰胺对 BRL-3A 细胞中 DNA 损伤因子 ROS、8-OHd G水平的影响 | 第30-31页 |
| 2.3.5 酶联免疫法测定丙烯酰胺对BRL-3A细胞中炎性细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α分泌的影响 | 第31-32页 |
| 2.4 结果与分析 | 第32-41页 |
| 2.4.1 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞活力的影响 | 第32-33页 |
| 2.4.2 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞的氧化损伤因子GST、GSH-Px、SOD活力的影响 | 第33-36页 |
| 2.4.3 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞中DNA损伤因子ROS、8-OHdG水平的影响 | 第36-38页 |
| 2.4.4 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞中炎性细胞因子IL-6、IL-10、TNF-α分泌的影响 | 第38-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞损伤的转录组学测序研究——mRNA测序法 | 第42-60页 |
| 3.1 材料 | 第42-43页 |
| 3.2 仪器与设备 | 第43-44页 |
| 3.3 实验方法 | 第44-46页 |
| 3.3.1 细胞处理与收集 | 第44页 |
| 3.3.2 RNA的抽提与纯化 | 第44-45页 |
| 3.3.3 cDNA文库的构建 | 第45页 |
| 3.3.4 上机测序 | 第45页 |
| 3.3.5 基因组比对(Mapping genome) | 第45页 |
| 3.3.6 基因水平表达定量 | 第45-46页 |
| 3.3.7 表达相关性分析 | 第46页 |
| 3.3.8 基因差异表达分析 | 第46页 |
| 3.3.9 差异表达基因的GO和KEGG富集分析 | 第46页 |
| 3.4 结果与分析 | 第46-59页 |
| 3.4.1 RNA检测 | 第46-48页 |
| 3.4.2 测序序列质量评估与初步比对结果 | 第48-50页 |
| 3.4.3 基因差异表达分析 | 第50-52页 |
| 3.4.4 表达差异基因的Gene Ontology(GO)富集分析 | 第52-55页 |
| 3.4.5 表达差异基因的KEGG pathway富集分析 | 第55-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 丙烯酰胺调控Ras/MAPK通路造成BRL-3A大鼠肝细胞损伤机制的初步研究 | 第60-73页 |
| 4.1 材料 | 第60页 |
| 4.2 仪器与设备 | 第60-61页 |
| 4.3 实验方法 | 第61-65页 |
| 4.3.1 细胞处理与收集 | 第61页 |
| 4.3.2 RNA提取与检测 | 第61-62页 |
| 4.3.3 RNA的逆转录 | 第62-63页 |
| 4.3.4 RT-PCR研究AA处理BRL-3A细胞中Ras/MAPK通路相关基因差异表达 | 第63-65页 |
| 4.4 结果与分析 | 第65-72页 |
| 4.4.1 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞Ras/MAPK通路中总体基因的调控 | 第65-67页 |
| 4.4.2 实时荧光PCR(RT-PCR)验证测序结果 | 第67页 |
| 4.4.3 丙烯酰胺对BRL-3A大鼠肝细胞Ras/MAPK信号通路的调控机制初探 | 第67-72页 |
| 4.5 本章小结 | 第72-73页 |
| 第5章 结论 | 第73-75页 |
| 5.1 结论 | 第73-74页 |
| 5.2 展望 | 第74页 |
| 5.3 创新点 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 导师简介 | 第86-87页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
