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海洋抑菌放线菌的筛选、鉴定及其抑菌活性物质研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
第一章 引言第14-29页
    1.1 研究背景第14页
    1.2 产抑菌活性物质海洋放线菌的概述第14-22页
        1.2.1 海洋放线菌简介第14-16页
        1.2.2 海洋放线菌产生的生物活性物质第16-22页
            1.2.2.1 海洋链霉菌属第16-18页
            1.2.2.2 海洋小单孢菌属第18-19页
            1.2.2.3 盐孢菌属第19-20页
            1.2.2.4 其它海洋稀有放线菌属第20-22页
    1.3 海洋活性物质的分离提取第22-24页
    1.4 抗生素抑菌机理第24-26页
        1.4.1 抑制细菌细胞壁合成第24页
        1.4.2 破坏细菌细胞膜第24-25页
        1.4.3 影响蛋白质合成第25页
        1.4.4 影响核酸合成第25-26页
        1.4.5 抑制能量代谢系统第26页
    1.5 本文研究目的和意义第26-29页
第二章 海洋抑菌放线菌的筛选与鉴定第29-40页
    2.1 前言第29页
    2.2 材料与设备第29-31页
        2.2.1 样品第29页
        2.2.2 培养基第29-30页
        2.2.3 主要试剂第30页
        2.2.4 主要仪器设备第30-31页
    2.3 实验方法第31-33页
        2.3.1 海洋抑菌放线菌筛选第31-32页
            2.3.1.1 海洋放线菌分离第31页
            2.3.1.2 海洋抑菌放线菌初筛第31页
            2.3.1.3 海洋抑菌放线菌的复筛第31-32页
        2.3.2 抑菌谱实验第32页
        2.3.3 菌种鉴定第32-33页
            2.3.3.1 菌落形态学观察第32页
            2.3.3.2 分子生物学鉴定第32-33页
    2.4 结果与分析第33-38页
        2.4.1 海洋抑菌放线菌的筛选第33-35页
            2.4.1.1 具抑菌作用海洋放线菌的初筛第33-34页
            2.4.1.2 具抑菌作用海洋放线菌的复筛第34-35页
        2.4.2 抑菌谱第35-37页
        2.4.3 菌种鉴定第37-38页
            2.4.3.1 菌落形态学观察第37页
            2.4.3.2 分子生物学鉴定第37-38页
    2.5 本章小结第38-40页
第三章 Y15抑菌物质性质研究第40-50页
    3.1 前言第40页
    3.2 材料与设备第40-41页
        3.2.1 菌株第40页
        3.2.2 培养基第40页
        3.2.3 主要试剂第40-41页
        3.2.4 主要仪器设备第41页
    3.3 实验方法第41-43页
        3.3.1 Y15无细胞发酵液制备第41页
        3.3.2 Y15抑菌活性物质抑菌活性的测定第41-42页
        3.3.3 Y15抑菌活性物质产生、细胞干重和发酵液pH与时间关系第42页
        3.3.4 Y15传代稳定性试验第42页
        3.3.5 Y15抑菌物质温度稳定性试验第42页
        3.3.6 Y15抑菌物质pH稳定性试验第42页
        3.3.7 Y15抑菌物质紫外稳定性第42页
        3.3.8 Y15抑菌物质酶水解稳定性第42-43页
        3.3.9 Y15抑菌物质极性大小第43页
    3.4 结果与分析第43-48页
        3.4.1 Y15抑菌活性物质产生、细胞干重和发酵液pH与时间关系第43-44页
        3.4.2 Y15传代稳定性第44-45页
        3.4.3 Y15抑菌物质温度稳定性第45页
        3.4.4 Y15抑菌物质pH稳定性第45-46页
        3.4.5 Y15抑菌物质紫外稳定性第46页
        3.4.6 Y15抑菌物质酶水解稳定性第46-47页
        3.4.7 Y15抑菌物质极性大第47-48页
    3.5 本章小结第48-50页
第四章 响应面法优化Micromonospora Y15发酵培养基第50-67页
    4.0 前言第50页
    4.1 材料与设备第50-51页
        4.1.1 菌种第50-51页
        4.1.2 培养基第51页
        4.1.3 主要试剂第51页
        4.1.4 主要仪器设备第51页
    4.2 实验方法第51-55页
        4.2.1 培养方法第51-52页
        4.2.2 抑菌圈直径与抑菌活性关系确定第52页
        4.2.3 培养条件的优化第52页
            4.2.3.1 培养温度对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响第52页
            4.2.3.2 培养基pH对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响第52页
            4.2.3.3 初始接种量对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响第52页
            4.2.3.4 摇床转速对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响第52页
        4.2.4 培养基成分优化第52-55页
            4.2.4.1 单因素实验设计第53页
            4.2.4.2 Plackett-Burman实验设计第53-54页
            4.2.4.3 最陡爬坡实验设计第54页
            4.2.4.4 中心组合实验(CCD)设计第54-55页
            4.2.4.5 模型验证第55页
    4.3 结果与分析第55-66页
        4.3.1 抑菌活性与抑菌圈直径关系第55页
        4.3.2 培养条件的优化第55-58页
            4.3.2.1 培养温度对小单孢菌产抑菌活性物质的影响第55-56页
            4.3.2.2 培养基初始pH对小单孢菌产抑菌活性物质的影响第56页
            4.3.2.3 初始接种量对小单孢菌产抑菌活性物质的影响第56-57页
            4.3.2.4 摇床转速对小单孢菌产抑菌活性物质的影响第57-58页
        4.3.3 培养基成分优化第58-66页
            4.3.3.1 单因素实验第58-61页
            4.3.3.2 Plackett-Burman实验第61-62页
            4.3.3.3 最陡爬坡实验第62-63页
            4.3.3.4 中心组合实验第63-66页
            4.3.3.5 模型验证第66页
    4.4 本章小结第66-67页
第五章 Y15抑菌活性物质抑菌机理初步研究第67-78页
    5.1 前言第67页
    5.2 材料与方法第67-69页
        5.2.1 菌种第67页
        5.2.2 培养基第67-68页
        5.2.3 主要试剂第68页
        5.2.4 主要仪器设备第68-69页
    5.3 实验方法第69-70页
        5.3.1 Y15抑菌物质对指示菌生长曲线影响第69页
        5.3.2 Y15抑菌物质对指示菌细胞壁影响第69页
        5.3.3 Y15抑菌物质对指示菌细胞膜的影响第69-70页
            5.3.3.1 Y15抑菌物质对指示菌细胞膜通透性影响第69页
            5.3.3.2 Y15抑菌物质对指示菌核酸类物质泄漏影响第69-70页
        5.3.4 扫描电镜观察Y15抑菌物质对指示菌壁膜影响第70页
        5.3.5 Y15抑菌物质对指示菌基因组DNA影响第70页
        5.3.6 Y15抑菌物质对指示菌可溶性蛋白质影响第70页
    5.4 结果与分析第70-77页
        5.4.1 Y15抑菌物质对指示菌生长曲线影响第70-71页
        5.4.2 Y15抑菌物质对指示菌细胞壁影响第71-72页
        5.4.3 Y15抑菌物质对指示菌细胞膜的影响第72-74页
        5.4.4 扫描电镜观察Y15抑菌物质对指示菌壁膜影响第74-75页
        5.4.5 Y15活性物质对指示菌基因组DNA合成影响第75-76页
        5.4.6 Y15抑菌物质对指示菌可溶性蛋白质影响第76-77页
    5.5 本章小结第77-78页
全文总结第78-80页
参考文献第80-93页
附录Ⅰ 缩略语(中英文对照)第93-94页
附录Ⅱ 小单孢菌 Y15 基因序列(1439bp)第94-95页
在校期间发表的论文第95-96页
致谢第96页

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