摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第14-29页 |
1.1 研究背景 | 第14页 |
1.2 产抑菌活性物质海洋放线菌的概述 | 第14-22页 |
1.2.1 海洋放线菌简介 | 第14-16页 |
1.2.2 海洋放线菌产生的生物活性物质 | 第16-22页 |
1.2.2.1 海洋链霉菌属 | 第16-18页 |
1.2.2.2 海洋小单孢菌属 | 第18-19页 |
1.2.2.3 盐孢菌属 | 第19-20页 |
1.2.2.4 其它海洋稀有放线菌属 | 第20-22页 |
1.3 海洋活性物质的分离提取 | 第22-24页 |
1.4 抗生素抑菌机理 | 第24-26页 |
1.4.1 抑制细菌细胞壁合成 | 第24页 |
1.4.2 破坏细菌细胞膜 | 第24-25页 |
1.4.3 影响蛋白质合成 | 第25页 |
1.4.4 影响核酸合成 | 第25-26页 |
1.4.5 抑制能量代谢系统 | 第26页 |
1.5 本文研究目的和意义 | 第26-29页 |
第二章 海洋抑菌放线菌的筛选与鉴定 | 第29-40页 |
2.1 前言 | 第29页 |
2.2 材料与设备 | 第29-31页 |
2.2.1 样品 | 第29页 |
2.2.2 培养基 | 第29-30页 |
2.2.3 主要试剂 | 第30页 |
2.2.4 主要仪器设备 | 第30-31页 |
2.3 实验方法 | 第31-33页 |
2.3.1 海洋抑菌放线菌筛选 | 第31-32页 |
2.3.1.1 海洋放线菌分离 | 第31页 |
2.3.1.2 海洋抑菌放线菌初筛 | 第31页 |
2.3.1.3 海洋抑菌放线菌的复筛 | 第31-32页 |
2.3.2 抑菌谱实验 | 第32页 |
2.3.3 菌种鉴定 | 第32-33页 |
2.3.3.1 菌落形态学观察 | 第32页 |
2.3.3.2 分子生物学鉴定 | 第32-33页 |
2.4 结果与分析 | 第33-38页 |
2.4.1 海洋抑菌放线菌的筛选 | 第33-35页 |
2.4.1.1 具抑菌作用海洋放线菌的初筛 | 第33-34页 |
2.4.1.2 具抑菌作用海洋放线菌的复筛 | 第34-35页 |
2.4.2 抑菌谱 | 第35-37页 |
2.4.3 菌种鉴定 | 第37-38页 |
2.4.3.1 菌落形态学观察 | 第37页 |
2.4.3.2 分子生物学鉴定 | 第37-38页 |
2.5 本章小结 | 第38-40页 |
第三章 Y15抑菌物质性质研究 | 第40-50页 |
3.1 前言 | 第40页 |
3.2 材料与设备 | 第40-41页 |
3.2.1 菌株 | 第40页 |
3.2.2 培养基 | 第40页 |
3.2.3 主要试剂 | 第40-41页 |
3.2.4 主要仪器设备 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-43页 |
3.3.1 Y15无细胞发酵液制备 | 第41页 |
3.3.2 Y15抑菌活性物质抑菌活性的测定 | 第41-42页 |
3.3.3 Y15抑菌活性物质产生、细胞干重和发酵液pH与时间关系 | 第42页 |
3.3.4 Y15传代稳定性试验 | 第42页 |
3.3.5 Y15抑菌物质温度稳定性试验 | 第42页 |
3.3.6 Y15抑菌物质pH稳定性试验 | 第42页 |
3.3.7 Y15抑菌物质紫外稳定性 | 第42页 |
3.3.8 Y15抑菌物质酶水解稳定性 | 第42-43页 |
3.3.9 Y15抑菌物质极性大小 | 第43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-48页 |
3.4.1 Y15抑菌活性物质产生、细胞干重和发酵液pH与时间关系 | 第43-44页 |
3.4.2 Y15传代稳定性 | 第44-45页 |
3.4.3 Y15抑菌物质温度稳定性 | 第45页 |
3.4.4 Y15抑菌物质pH稳定性 | 第45-46页 |
3.4.5 Y15抑菌物质紫外稳定性 | 第46页 |
3.4.6 Y15抑菌物质酶水解稳定性 | 第46-47页 |
3.4.7 Y15抑菌物质极性大 | 第47-48页 |
3.5 本章小结 | 第48-50页 |
第四章 响应面法优化Micromonospora Y15发酵培养基 | 第50-67页 |
4.0 前言 | 第50页 |
4.1 材料与设备 | 第50-51页 |
4.1.1 菌种 | 第50-51页 |
4.1.2 培养基 | 第51页 |
4.1.3 主要试剂 | 第51页 |
4.1.4 主要仪器设备 | 第51页 |
4.2 实验方法 | 第51-55页 |
4.2.1 培养方法 | 第51-52页 |
4.2.2 抑菌圈直径与抑菌活性关系确定 | 第52页 |
4.2.3 培养条件的优化 | 第52页 |
4.2.3.1 培养温度对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响 | 第52页 |
4.2.3.2 培养基pH对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响 | 第52页 |
4.2.3.3 初始接种量对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响 | 第52页 |
4.2.3.4 摇床转速对小单孢菌Y15产抑菌活性物质的影响 | 第52页 |
4.2.4 培养基成分优化 | 第52-55页 |
4.2.4.1 单因素实验设计 | 第53页 |
4.2.4.2 Plackett-Burman实验设计 | 第53-54页 |
4.2.4.3 最陡爬坡实验设计 | 第54页 |
4.2.4.4 中心组合实验(CCD)设计 | 第54-55页 |
4.2.4.5 模型验证 | 第55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-66页 |
4.3.1 抑菌活性与抑菌圈直径关系 | 第55页 |
4.3.2 培养条件的优化 | 第55-58页 |
4.3.2.1 培养温度对小单孢菌产抑菌活性物质的影响 | 第55-56页 |
4.3.2.2 培养基初始pH对小单孢菌产抑菌活性物质的影响 | 第56页 |
4.3.2.3 初始接种量对小单孢菌产抑菌活性物质的影响 | 第56-57页 |
4.3.2.4 摇床转速对小单孢菌产抑菌活性物质的影响 | 第57-58页 |
4.3.3 培养基成分优化 | 第58-66页 |
4.3.3.1 单因素实验 | 第58-61页 |
4.3.3.2 Plackett-Burman实验 | 第61-62页 |
4.3.3.3 最陡爬坡实验 | 第62-63页 |
4.3.3.4 中心组合实验 | 第63-66页 |
4.3.3.5 模型验证 | 第66页 |
4.4 本章小结 | 第66-67页 |
第五章 Y15抑菌活性物质抑菌机理初步研究 | 第67-78页 |
5.1 前言 | 第67页 |
5.2 材料与方法 | 第67-69页 |
5.2.1 菌种 | 第67页 |
5.2.2 培养基 | 第67-68页 |
5.2.3 主要试剂 | 第68页 |
5.2.4 主要仪器设备 | 第68-69页 |
5.3 实验方法 | 第69-70页 |
5.3.1 Y15抑菌物质对指示菌生长曲线影响 | 第69页 |
5.3.2 Y15抑菌物质对指示菌细胞壁影响 | 第69页 |
5.3.3 Y15抑菌物质对指示菌细胞膜的影响 | 第69-70页 |
5.3.3.1 Y15抑菌物质对指示菌细胞膜通透性影响 | 第69页 |
5.3.3.2 Y15抑菌物质对指示菌核酸类物质泄漏影响 | 第69-70页 |
5.3.4 扫描电镜观察Y15抑菌物质对指示菌壁膜影响 | 第70页 |
5.3.5 Y15抑菌物质对指示菌基因组DNA影响 | 第70页 |
5.3.6 Y15抑菌物质对指示菌可溶性蛋白质影响 | 第70页 |
5.4 结果与分析 | 第70-77页 |
5.4.1 Y15抑菌物质对指示菌生长曲线影响 | 第70-71页 |
5.4.2 Y15抑菌物质对指示菌细胞壁影响 | 第71-72页 |
5.4.3 Y15抑菌物质对指示菌细胞膜的影响 | 第72-74页 |
5.4.4 扫描电镜观察Y15抑菌物质对指示菌壁膜影响 | 第74-75页 |
5.4.5 Y15活性物质对指示菌基因组DNA合成影响 | 第75-76页 |
5.4.6 Y15抑菌物质对指示菌可溶性蛋白质影响 | 第76-77页 |
5.5 本章小结 | 第77-78页 |
全文总结 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-93页 |
附录Ⅰ 缩略语(中英文对照) | 第93-94页 |
附录Ⅱ 小单孢菌 Y15 基因序列(1439bp) | 第94-95页 |
在校期间发表的论文 | 第95-96页 |
致谢 | 第96页 |