| 摘要 | 第9-11页 |
| ABSTRACT | 第11-12页 |
| 缩略词 | 第14-16页 |
| 第一章 绪论 | 第16-26页 |
| 1 研究背景 | 第16-24页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第16-17页 |
| 1.2 影响果实色泽的内部因子 | 第17-21页 |
| 1.2.1 花色素苷与果实色泽 | 第17-19页 |
| 1.2.2 酚类物质代谢与果实色泽 | 第19-21页 |
| 1.3 影响果实色泽的外部因子 | 第21-22页 |
| 1.3.1 温度 | 第21页 |
| 1.3.2 光照 | 第21页 |
| 1.3.3 pH | 第21-22页 |
| 1.3.4 金属离子 | 第22页 |
| 1.4 UGTs | 第22-23页 |
| 1.4.1 UGTs简介 | 第22页 |
| 1.4.2 UGTs的生理功能 | 第22页 |
| 1.4.3 UGTs的催化特性 | 第22-23页 |
| 1.4.4 UF3GTs | 第23页 |
| 1.5 转录组测序技术 | 第23-24页 |
| 1.5.1 转录组测序技术简介 | 第23页 |
| 1.5.2 在植物中的应用研究 | 第23-24页 |
| 2 研究内容、目的及意义 | 第24-26页 |
| 2.1 内容 | 第24-25页 |
| 2.2 目的及意义 | 第25-26页 |
| 第二章 高温条件下采后草莓果实色泽相关差异基因分析 | 第26-45页 |
| 1 引言 | 第26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第26页 |
| 2.2 酶及生化试剂 | 第26-27页 |
| 2.3 主要仪器与设备 | 第27页 |
| 2.4 实验方法 | 第27-31页 |
| 2.4.1 转录组文库构建及测序 | 第27页 |
| 2.4.2 转录组信息分析 | 第27-28页 |
| 2.4.3 果实色泽劣变相关差异基因表达筛选 | 第28页 |
| 2.4.4 差异基因的qPCR验证 | 第28-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| 3.1 不同贮藏温度下草莓果实的基因表达概况 | 第31-32页 |
| 3.2 不同贮藏温度下草莓果实的基因差异表达分析 | 第32-35页 |
| 3.2.1 差异基因表达概况分析 | 第32-33页 |
| 3.2.2 差异基因的GO功能分类分析 | 第33页 |
| 3.2.3 差异基因的KEGG功能显著性富集分析 | 第33-35页 |
| 3.3 色泽相关基因的差异表达分析 | 第35-39页 |
| 3.3.1 花色素苷合成途径中的转录因子的差异表达分析 | 第35页 |
| 3.3.2 花色素苷合成途径中的结构基因的差异表达分析 | 第35-36页 |
| 3.3.3 花色素苷转运相关基因的差异表达分析 | 第36-37页 |
| 3.3.4 酚类物质代谢相关酶基因的差异表达分析 | 第37-39页 |
| 3.4 色泽劣变相关差异基因的qPCR验证 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-43页 |
| 4.1 花色素苷的生物合成 | 第40-41页 |
| 4.2 花色素苷的转运 | 第41-42页 |
| 4.3 酚类物质代谢相关酶 | 第42-43页 |
| 5 小结 | 第43-45页 |
| 第三章 UF3GT3的克隆及其生物信息学分析 | 第45-59页 |
| 1 引言 | 第45页 |
| 2 材料与方法 | 第45-51页 |
| 2.1 试验材料 | 第45页 |
| 2.2 菌种和质粒 | 第45-46页 |
| 2.3 酶及生化试剂 | 第46页 |
| 2.4 培养基及溶液配制 | 第46页 |
| 2.5 主要仪器与设备 | 第46-47页 |
| 2.6 实验方法 | 第47-51页 |
| 2.6.1 草莓果实基因组DNA的提取 | 第47页 |
| 2.6.2 总RNA的提取 | 第47页 |
| 2.6.3 cDNA的合成 | 第47页 |
| 2.6.4 UF3GT3基因cDNA全长、DNA全长的扩增 | 第47-48页 |
| 2.6.5 PCR扩增产物的纯化 | 第48-49页 |
| 2.6.6 回收产物连接pEASY-BluntSimpleCloningVector | 第49页 |
| 2.6.7 连接产物转化大肠杆菌 | 第49-50页 |
| 2.6.8 阳性菌落筛选及序列鉴定 | 第50页 |
| 2.6.9 UF3GT3基因的生物信息学分析 | 第50-51页 |
| 3 结果与分析 | 第51-56页 |
| 3.1 UF3GT3基因cDNA、DNA全长的克隆 | 第51-52页 |
| 3.2 UF3GT3基因及其启动子序列的生物信息学分析 | 第52-56页 |
| 3.2.1 UF3GT3基因序列与氨基酸序列的分析 | 第52页 |
| 3.2.2 UF3GT3系统进化树的建立 | 第52-53页 |
| 3.2.3 UF3GT3蛋白的理化性质分析 | 第53页 |
| 3.2.4 UF3GT3蛋白的分子结构分析 | 第53-54页 |
| 3.2.5 UF3GT3蛋白的亲疏水性分析 | 第54页 |
| 3.2.6 UF3GT3蛋白的保守结构域分析 | 第54-55页 |
| 3.2.7 UF3GT3基因启动子的顺式作用元件分析 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 4.1 UF3GT3的编码区全长 | 第56-57页 |
| 4.2 UF3GT3的基因同源性 | 第57页 |
| 4.3 UF3GT3的启动子功能预测 | 第57页 |
| 5 小结 | 第57-59页 |
| 第四章 UF3GT3基因的功能初探 | 第59-74页 |
| 1 引言 | 第59页 |
| 2 材料与方法 | 第59-65页 |
| 2.1 试验材料 | 第59页 |
| 2.2 菌种和质粒 | 第59-60页 |
| 2.3 酶及生化试剂 | 第60-61页 |
| 2.4 培养基及溶液配制 | 第61页 |
| 2.5 主要设备及仪器 | 第61-62页 |
| 2.6 实验方法 | 第62-65页 |
| 2.6.1 引物设计 | 第62页 |
| 2.6.2 目的片段克隆 | 第62页 |
| 2.6.3 过表达载体的构建 | 第62-63页 |
| 2.6.4 干扰载体的构建 | 第63页 |
| 2.6.5 农杆菌的转化及瞬时转染 | 第63-64页 |
| 2.6.6 EGFP的显微观察 | 第64页 |
| 2.6.7 qPCR鉴定瞬时转染草莓果实的基因表达变化 | 第64页 |
| 2.6.8 花色素苷、总黄酮、总酚含量的变化 | 第64-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-70页 |
| 3.1 UF3GT3植物表达载体的构建 | 第65-66页 |
| 3.2 UF3GT3植物干扰载体的构建 | 第66-67页 |
| 3.3 EGFP的显微鉴定 | 第67-68页 |
| 3.4 基因表达变化的qPCR鉴定 | 第68-69页 |
| 3.5 酚类物质含量变化鉴定 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 4.1 植物过表达载体与干扰载体探讨 | 第70-71页 |
| 4.1.1 表达载体 | 第70页 |
| 4.1.2 干涉载体 | 第70-71页 |
| 4.2 农杆菌介导草莓果实的瞬时转染探讨 | 第71-72页 |
| 4.2.1 瞬时转染的效果探讨 | 第71页 |
| 4.2.2 转染条件的探讨 | 第71-72页 |
| 4.3 UF3GTs对酚类物质代谢的影响 | 第72页 |
| 5 小结 | 第72-74页 |
| 第五章 结论与展望 | 第74-75页 |
| 1 结论 | 第74页 |
| 2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-86页 |
| 附录 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |
