致谢 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略词表 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-31页 |
1.1 多糖的制备 | 第18-23页 |
1.1.1 多糖的提取 | 第18-20页 |
1.1.2 多糖的分离纯化 | 第20-23页 |
1.2 多糖的性质测定 | 第23-24页 |
1.2.1 多糖的一般性质测定 | 第23页 |
1.2.2 分子量测定 | 第23-24页 |
1.2.3 复合多糖-糖蛋白中糖肽键的鉴定 | 第24页 |
1.2.4 多糖的单糖组成分析 | 第24页 |
1.3 多糖的生物活性 | 第24-26页 |
1.3.1 抗氧化活性 | 第25页 |
1.3.2 抗肿瘤活性 | 第25页 |
1.3.3 增强免疫力 | 第25-26页 |
1.3.4 降血糖活性 | 第26页 |
1.3.5 降血脂活性 | 第26页 |
1.3.6 其他生物活性 | 第26页 |
1.4 硒多糖研究进展 | 第26-28页 |
1.4.1 硒的概况 | 第26-27页 |
1.4.2 食用菌硒多糖 | 第27-28页 |
1.5 秀珍菇多糖的研究概况 | 第28-29页 |
1.6 本课题的立题背景和意义 | 第29页 |
1.7 本课题的主要研究内容 | 第29-30页 |
1.8 本课题的研究技术路线 | 第30-31页 |
第二章 秀珍菇富硒发酵培养基优化 | 第31-44页 |
引言 | 第31页 |
2.1 材料、试剂和仪器 | 第31-32页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第31-32页 |
2.1.2 试验仪器 | 第32页 |
2.2 试验方法 | 第32-34页 |
2.2.1 秀珍菇菌种的活化及种子液的配制 | 第32页 |
2.2.2 秀珍菇硒耐受力试验 | 第32-33页 |
2.2.3 生物量的测定 | 第33页 |
2.2.4 单因素试验 | 第33页 |
2.2.5 响应面法优化 | 第33页 |
2.2.6 菌丝体硒含量的测定 | 第33-34页 |
2.2.7 数据处理与分析 | 第34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-42页 |
2.3.1 秀珍菇菌株硒耐受力 | 第34页 |
2.3.2 碳源种类 | 第34-35页 |
2.3.3 碳源浓度 | 第35页 |
2.3.4 氮源种类 | 第35-36页 |
2.3.5 氮源浓度 | 第36页 |
2.3.6 KH_2PO_4浓度 | 第36-37页 |
2.3.7 响应面试验设计 | 第37-42页 |
2.3.8 秀珍菇菌丝体硒含量测定结果 | 第42页 |
2.4 结论 | 第42-44页 |
第三章 秀珍菇多糖的提取 | 第44-53页 |
引言 | 第44页 |
3.1 材料、试剂和仪器 | 第44-45页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第44页 |
3.1.2 试验仪器 | 第44-45页 |
3.2 试验方法 | 第45-47页 |
3.2.1 秀珍菇硒菌丝体的制备 | 第45页 |
3.2.2 秀珍菇多糖的提取流程 | 第45页 |
3.2.3 多糖含量的测定 | 第45-46页 |
3.2.4 秀珍菇多糖提取的单因素试验 | 第46页 |
3.2.5 秀珍菇多糖提取的正交试验 | 第46-47页 |
3.2.6 秀珍菇多糖硒含量的测淀 | 第47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-51页 |
3.3.1 葡聚糖T_(10)标准曲线的绘制 | 第47页 |
3.3.2 单因素试验结果 | 第47-50页 |
3.3.3 秀珍菇多糖提取的正交试验结果 | 第50-51页 |
3.3.4 验证试验结果 | 第51页 |
3.3.5 秀珍菇多糖硒含量测定结果 | 第51页 |
3.4 结论 | 第51-53页 |
第四章 秀珍菇多糖SPMP-2a的分离纯化及其性质测定 | 第53-69页 |
引言 | 第53页 |
4.1 试剂和仪器 | 第53-54页 |
4.1.1 试剂 | 第53页 |
4.1.2 试验仪器 | 第53-54页 |
4.2 试验方法 | 第54-58页 |
4.2.1 秀珍菇多糖的提取 | 第54页 |
4.2.2 秀珍菇多糖的脱蛋白 | 第54页 |
4.2.3 秀珍菇多糖的脱色素 | 第54-56页 |
4.2.4 乙醇分级沉淀 | 第56页 |
4.2.5 SPMP-1、SPMP-2及SPMP-3总抗氧化能力测定 | 第56页 |
4.2.6 SPMP-2的HPLC检测 | 第56-57页 |
4.2.7 SPMP-2的超滤膜分离 | 第57页 |
4.2.8 SPMP-2a、SPMP-2b及SPMP-2c总抗氧化能力测定 | 第57页 |
4.2.9 SPMP-2a的纯度鉴定及其分子量的测定 | 第57页 |
4.2.10 SPMP-2a的一般理化性质测定 | 第57页 |
4.2.11 SPMP-2a相关含量的测定 | 第57-58页 |
4.2.12 SPMP-2a的光谱分析 | 第58页 |
4.2.13 SPMP-2a的单糖组成及氨基酸组成测定 | 第58页 |
4.2.14 SPMP-2a的糖肽键分析 | 第58页 |
4.2.15 SPMP-2a的刚果红实验 | 第58页 |
4.3 结果与分析 | 第58-68页 |
4.3.1 秀珍菇多糖活性炭脱色效果 | 第58-61页 |
4.3.2 秀珍菇多糖的乙醇分级及总抗氧化能力 | 第61页 |
4.3.3 SPMP-2的HPLC检测 | 第61-62页 |
4.3.4 SPMP-2的膜分离及其总抗氧化能力测定结果 | 第62页 |
4.3.5 SPMP-2a的纯度鉴定 | 第62-63页 |
4.3.6 SPMP-2a的一般理化性质 | 第63-64页 |
4.3.7 SPMP-2a的相关物质含量测定结果 | 第64页 |
4.3.8 SPMP-2a的紫外光谱分析 | 第64-65页 |
4.3.9 SPMP-2a的红外光谱分析 | 第65页 |
4.3.10 SPMP-2a的单糖组成分析 | 第65-66页 |
4.3.11 SPMP-2a的氨基酸组成分析 | 第66-67页 |
4.3.12 SPMP-2a的糖肽键分析 | 第67页 |
4.3.13 SPMP-2a的刚果红实验结果 | 第67-68页 |
4.4 结论 | 第68-69页 |
第五章 SPMP-2a体外抗氧化活性研究 | 第69-76页 |
引言 | 第69页 |
5.1 试剂与仪器 | 第69页 |
5.1.1 试验试剂 | 第69页 |
5.1.2 试验仪器 | 第69页 |
5.2 试验方法 | 第69-71页 |
5.2.1 SPMP-2a还原力的测定 | 第69-70页 |
5.2.2 SPMP-2a对金属离子(Fe~(2+))螫合能力的测定 | 第70页 |
5.2.3 SPMP-2a对DPPH自由基清除能力的测定 | 第70页 |
5.2.4 SPMP-2a对羟基自由基清除能力的测定 | 第70-71页 |
5.2.5 SPMP-2a对超氧阴离子自由基清除能力的测定 | 第71页 |
5.3 结果与分析 | 第71-75页 |
5.3.1 SPMP-2a的还原力 | 第71-72页 |
5.3.2 SPMP-2a对金属(Fe~(2+))的螯合能力 | 第72-73页 |
5.3.3 SPMP-2a清除DPPH自由基的能力 | 第73页 |
5.3.4 SPMP-2a清除羟基自由基的能力 | 第73-74页 |
5.3.5 SPMP-2a清除超氧阴离子自由基的能力 | 第74-75页 |
5.4 结论 | 第75-76页 |
第六章 SPMP-2a对H_2O_2诱导HaCaT细胞氧化损伤的保护作用 | 第76-85页 |
引言 | 第76页 |
6.1 试剂与仪器 | 第76-77页 |
6.1.1 试验试剂 | 第76页 |
6.1.2 试验仪器 | 第76-77页 |
6.2 试验方法 | 第77-79页 |
6.2.1 HaCaT细胞培养 | 第77页 |
6.2.2 SPMP-2a和H_2O_2分别对HaCaT细胞存活率的影响 | 第77页 |
6.2.3 SPMP-2a对H_2O_2诱导下HaCaT细胞存活率的影响 | 第77页 |
6.2.4 Hoechst 33342染色观察及Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测 | 第77-78页 |
6.2.5 超微结构观察 | 第78页 |
6.2.6 HaCaT细胞SOD、CAT活性及ROS含量的测定 | 第78页 |
6.2.7 Western blot检测 | 第78-79页 |
6.2.8 数据处理与分析 | 第79页 |
6.3 结果与分析 | 第79-83页 |
6.3.1 SPMP-2a和H_2O_2对HaCaT细胞增殖的影响 | 第79-80页 |
6.3.2 SPMP-2a对H_2O_2诱导细胞氧化损伤的保护作用 | 第80页 |
6.3.3 SPMP-2a对HaCaT细胞形态和凋亡的影响 | 第80-82页 |
6.3.4 SPMP-2a对H_2O_2诱导HaCaT细胞SOD、CAT活性及ROS含量的影响 | 第82-83页 |
6.3.5 SPMP-2a对H_2O_2诱导HaCaT细胞Bcl-2蛋白表达的影响 | 第83页 |
6.4 讨论 | 第83-84页 |
6.5 结论 | 第84-85页 |
第七章 SPMP-2a对D-半乳糖致衰老小鼠的保护作用 | 第85-93页 |
引言 | 第85页 |
7.1 材料与试剂 | 第85-86页 |
7.1.1 材料、实验动物与试剂 | 第85页 |
7.1.2 试验仪器 | 第85-86页 |
7.2 试验方法 | 第86-87页 |
7.2.1 小鼠分组及处理 | 第86页 |
7.2.2 血样采集与组织处理 | 第86页 |
7.2.3 生化指标测定 | 第86-87页 |
7.2.4 组织切片观察 | 第87页 |
7.2.5 数据处理 | 第87页 |
7.3 结果与分析 | 第87-90页 |
7.3.1 SPMP-2a对D-Gal致衰老小鼠肝脏CAT、SOD、GSH-Px活力和MDA含量的影响 | 第87页 |
7.3.2 SPMP-2a对D-Gal致衰老小鼠脑CAT、SOD、GSH-Px和MDA的影响 | 第87-88页 |
7.3.3 SPMP-2a对D-Gal致衰老小鼠胸腺指数、脾脏指数的影响 | 第88页 |
7.3.4 SPMP-2a对D-Gal致衰老小鼠血清AST、ALP、ALT活力的影响 | 第88-89页 |
7.3.5 SPMP-2a对D-Gal致衰老小鼠肝组织的影响 | 第89-90页 |
7.3.6 SPMP-2a对D-Gal致衰老小鼠脑组织的影响 | 第90页 |
7.4 讨论 | 第90-92页 |
7.5 结论 | 第92-93页 |
结论 | 第93-95页 |
参考文献 | 第95-109页 |
附录A 作者简介 | 第109-110页 |
附录B 博士学习期间发表的与学位论文相关的论文及申请的专利 | 第110页 |