摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第10-24页 |
1.1 课题背景 | 第10-11页 |
1.2 河豚毒素检测方法研究进展 | 第11-13页 |
1.2.1 生物检测法 | 第11页 |
1.2.2 免疫学检测法 | 第11-12页 |
1.2.3 理化检测法 | 第12-13页 |
1.3 核酸适体研究进展 | 第13-24页 |
1.3.1 核酸适体作用基础 | 第14页 |
1.3.2 核酸适体的筛选过程 | 第14-15页 |
1.3.3 核酸适体筛选技术—SELEX技术 | 第15-18页 |
1.3.4 核酸适体的应用 | 第18-24页 |
第二章 用SELEX法筛选河豚毒素适体 | 第24-38页 |
2.1 前言 | 第24页 |
2.2 材料与方法 | 第24-30页 |
2.2.1 材料 | 第24-26页 |
2.2.2 方法 | 第26-30页 |
2.3 结果与分析 | 第30-33页 |
2.3.1 PCR优化结果 | 第30-32页 |
2.3.2 ssDNA次级文库的获得 | 第32页 |
2.3.3 筛选ssDNA与河豚毒素结合率的测定结果与分析 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33-37页 |
2.4.1 随机文库的选择和引物设计 | 第33-34页 |
2.4.2 固相分离介质的选择 | 第34页 |
2.4.3 SELEX筛选结果的影响因素 | 第34-37页 |
2.5 小结 | 第37-38页 |
第三章 适体的鉴定与分析 | 第38-52页 |
3.1 前言 | 第38页 |
3.2 材料和方法 | 第38-43页 |
3.2.1 材料 | 第38-40页 |
3.2.2 方法 | 第40-43页 |
3.3 结果与分析 | 第43-49页 |
3.3.1 克隆菌的蓝白斑筛选结果 | 第43页 |
3.3.2 克隆子PCR扩增产物的电泳结果 | 第43-44页 |
3.3.3 筛选适体测序峰图 | 第44-46页 |
3.3.4 适体的一级结构分析 | 第46-47页 |
3.3.5 适体的二级结构分析 | 第47-49页 |
3.4 讨论 | 第49-51页 |
3.4.1 适体的克隆 | 第49-50页 |
3.4.2 克隆重组子的挑选与鉴定 | 第50页 |
3.4.3 适体的一级结构分析 | 第50页 |
3.4.4 适体的二级结构分析 | 第50-51页 |
3.5 小结 | 第51-52页 |
第四章 克隆适体与河豚毒素亲和力测定 | 第52-56页 |
4.1 前言 | 第52页 |
4.2 材料与方法 | 第52-53页 |
4.2.1 材料 | 第52页 |
4.2.2 方法 | 第52-53页 |
4.3 克隆适体与河豚毒素的亲和力的测定结果与分析 | 第53-54页 |
4.4 讨论 | 第54页 |
4.4.1 结合率测定的显色系统的选择 | 第54页 |
4.4.2 结合率测定的影响因素 | 第54页 |
4.5 小结 | 第54-56页 |
第五章 河豚毒素适体初步应用研究 | 第56-62页 |
5.1 前言 | 第56页 |
5.2 材料与方法 | 第56-58页 |
5.2.1 材料 | 第56-57页 |
5.2.2 试验方法 | 第57-58页 |
5.3 结果与分析 | 第58-61页 |
5.3.1 不同pH值对荧光强度的影响 | 第58-59页 |
5.3.2 不同染色时间对荧光强度的影响 | 第59-60页 |
5.3.3 不同浓度的TTX对荧光强度影响 | 第60-61页 |
5.4 讨论 | 第61-62页 |
第六章 结论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
致谢 | 第70页 |