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产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选鉴定、紫外诱变及发酵条件优化

摘要第3-4页
abstract第4-5页
1 引言第11-20页
    1.1 酸马奶的简介第11页
    1.2 乳酸菌的简介第11-13页
        1.2.1 乳酸菌的概述第11页
        1.2.2 乳酸菌的应用第11-13页
    1.3 γ-氨基丁酸的概述第13-16页
        1.3.1 γ-氨基丁酸的简介第13页
        1.3.2 γ-氨基丁酸的生理学功能第13-15页
        1.3.3 γ-氨基丁酸的合成方法第15-16页
    1.4 γ-氨基丁酸的检测方法第16-18页
        1.4.1 纸层析法第17页
        1.4.2 Berthelot比色法第17页
        1.4.3 高效液相色谱法第17-18页
    1.5 γ-氨基丁酸的研究进展第18页
    1.6 紫外诱变第18页
    1.7 紫外诱变应用第18-19页
    1.8 本研究的意义及内容第19页
    1.9 研究内容第19-20页
2 实验材料第20-22页
    2.1 供试菌株第20页
    2.2 培养基第20页
    2.3 主要试剂第20页
    2.4 主要溶液第20页
    2.5 主要仪器第20-22页
3 实验方法第22-30页
    3.1 产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选及鉴定第22-24页
        3.1.1 供试菌株发酵上清液的制备第22页
        3.1.2 供试菌株产γ-氨基丁酸能力的测定第22-23页
        3.1.3 产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选第23页
        3.1.4 供试菌株生理生化及分子生物学鉴定第23-24页
    3.2 产GABA菌株的紫外诱变及突变菌株的筛选第24-25页
        3.2.1 紫外诱变菌悬液的制备第24页
        3.2.2 最佳紫外诱变时间的选择第24页
        3.2.3 供试菌株的紫外诱变及突变菌株的筛选第24-25页
        3.2.4 突变菌株的遗传稳定性的研究第25页
        3.2.5 供试菌株诱变前后基因比对第25页
    3.3 突变菌株生长曲线的测定第25页
    3.4 响应面法优化突变菌株发酵培养基成分第25-27页
        3.4.1 发酵培养基成分单因素实验第25-26页
        3.4.2 发酵培养基优化实验第26-27页
        3.4.3 发酵培养基响应面模型验证实验第27页
    3.5 响应面法优化突变菌株发酵条件第27-30页
        3.5.1 发酵条件单因素实验第27-28页
        3.5.2 发酵条件响应面模型的建立及分析第28-29页
        3.5.3 发酵调价回归模型验证试验第29-30页
4 结果与分析第30-63页
    4.1 γ-氨基丁酸标准曲线的绘制第30页
    4.2 产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选第30-32页
        4.2.1 产γ-氨基丁酸乳酸菌初筛第30-32页
        4.2.2 产γ-氨基丁酸乳酸菌复筛第32页
    4.3 菌株43分子生物学鉴定第32-36页
        4.3.1 菌株43生理生化鉴定第32-34页
        4.3.2 菌株43的16SrDNA扩增第34-35页
        4.3.3 菌株43的序列比对及其系统发育树的绘制第35-36页
    4.4 紫外诱变筛选高产GABA突变菌株第36-40页
        4.4.1 最佳紫外诱变时间的确定第36页
        4.4.2 菌株43的紫外诱变及突变菌株的筛选第36-37页
        4.4.3 突变菌株的遗传稳定性研究第37-40页
    4.5 菌株UV43-7生长曲线的测定第40-42页
    4.6 发酵培养基成分单因素实验第42-46页
        4.6.1 不同碳源对γ-氨基丁酸产量的影响第42页
        4.6.2 不同氮源对γ-氨基丁酸产量的影响第42-43页
        4.6.3 葡萄糖浓度对γ-氨基丁酸合成量的影响第43-44页
        4.6.4 酵母粉浓度对γ-氨基丁酸合成量的影响第44-45页
        4.6.5 蛋白胨添加量对γ-氨基丁酸合成量的影响第45-46页
        4.6.6 L-MSG添加量对γ-氨基丁酸合成量的影响第46页
    4.7 响应面法优化发酵培养基成分实验结果第46-53页
        4.7.1 Plackett-Burman 设计筛选主要影响因素第46-48页
        4.7.2 发酵培养基响应面法优化实验结果第48-50页
        4.7.3 发酵培养基各因素间交互作用分析第50-52页
        4.7.4 发酵培养基优化回归模型验证试验第52-53页
    4.8 发酵条件单因素实验第53-55页
        4.8.1 初始pH值对γ-氨基丁酸合成量的影响第53页
        4.8.2 接种量对γ-氨基丁酸合成量的影响第53-54页
        4.8.3 发酵温度对γ-氨基丁酸合成量的影响第54-55页
        4.8.4 发酵时间对γ-氨基丁酸合成量的影响第55页
    4.9 响应面法优化发酵条件实验结果第55-63页
        4.9.1 发酵条件优化实验结果第55-57页
        4.9.2 回归模型中各项对γ-氨基丁酸产量影响分析第57-58页
        4.9.3 发酵条件各因素间交互作用分析第58-62页
        4.9.4 发酵条件响应面优化验证试验结果第62-63页
5 讨论第63-64页
6 结论第64-65页
致谢第65-66页
参考文献第66-72页
作者简介第72页

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