| 摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-32页 |
| 1.1 全球气候变暖 | 第14-18页 |
| 1.1.1 全球气候变化及环境效应 | 第14-16页 |
| 1.1.2 温室气体排放 | 第16-17页 |
| 1.1.3 化石燃料依赖 | 第17-18页 |
| 1.2 生物燃料合成 | 第18-25页 |
| 1.2.1 第一代生物燃料 | 第19页 |
| 1.2.2 新型生物燃料 | 第19-21页 |
| 1.2.3 木质纤维素的资源化 | 第21-23页 |
| 1.2.4 一碳化合物(C1)利用 | 第23-25页 |
| 1.3 代谢工程与合成生物学 | 第25-29页 |
| 1.3.1 基因工程菌的构建 | 第26-27页 |
| 1.3.2 基于CRISPR的基因编辑技术 | 第27-29页 |
| 1.4 本研究的意义、目的及内容 | 第29-32页 |
| 1.4.1 本研究的意义和目的 | 第29-30页 |
| 1.4.2 本研究的主要内容 | 第30-31页 |
| 1.4.3 本研究的主要创新点 | 第31-32页 |
| 第二章 酿酒酵母中原核基因表达体系的构建 | 第32-48页 |
| 2.1 引言 | 第32-34页 |
| 2.2 材料与方法 | 第34-39页 |
| 2.2.1 实验菌株与培养基 | 第34页 |
| 2.2.2 质粒构建 | 第34-36页 |
| 2.2.3 基于CRISPR/Cas的基因编辑技术 | 第36-37页 |
| 2.2.4 酶活性测定 | 第37-38页 |
| 2.2.5 生长情况及糖消耗测定 | 第38页 |
| 2.2.6 统计分析 | 第38-39页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第39-47页 |
| 2.3.1 木糖异构酶与阿拉伯糖异构酶在酿酒酵母中的表达 | 第39-40页 |
| 2.3.2 木糖异构酶活性的验证 | 第40-41页 |
| 2.3.3 阿拉伯糖异构酶活性的体内验证 | 第41-42页 |
| 2.3.4 阿洛酮糖-差向异构酶(DPE)的表达 | 第42-43页 |
| 2.3.5 GroE体系对功能基因表达的影响 | 第43-44页 |
| 2.3.6 GroE体系的作用机制 | 第44-47页 |
| 2.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 还原型戊糖代谢途径的构建 | 第48-66页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 材料与方法 | 第49-54页 |
| 3.2.1 实验菌株和培养基 | 第49-50页 |
| 3.2.2 质粒构建 | 第50-51页 |
| 3.2.3 基于CRISPR/Cas的基因编辑 | 第51-52页 |
| 3.2.4 RuBisCO活性测定 | 第52页 |
| 3.2.5 厌氧发酵实验 | 第52-53页 |
| 3.2.6 CO_2与乙醇比例分析 | 第53页 |
| 3.2.7 统计分析 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第54-65页 |
| 3.3.1 核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶在酵母工程菌中的表达 | 第54-56页 |
| 3.3.2 磷酸核酮糖激酶对木糖发酵的影响 | 第56-59页 |
| 3.3.3 还原型戊糖代谢途径的构建 | 第59-63页 |
| 3.3.4 循环利用发酵过程中CO_2的机制解析 | 第63-65页 |
| 3.4 本章小结 | 第65-66页 |
| 第四章 二氧化碳对生物乙醇发酵的促进效应 | 第66-82页 |
| 4.1 引言 | 第66-67页 |
| 4.2 材料与方法 | 第67-69页 |
| 4.2.1 实验菌株与培养基 | 第67页 |
| 4.2.2 基于CRISPR/Cas的启动子调控 | 第67-68页 |
| 4.2.3 质粒构建 | 第68-69页 |
| 4.2.4 发酵实验 | 第69页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第69-80页 |
| 4.3.1 初始CO_2浓度对还原型戊糖代谢通路的影响 | 第69-71页 |
| 4.3.2 CO_2及HCO_3~-酵母发酵促进作用的广适性 | 第71-74页 |
| 4.3.3 不同培养基条件下CO_2及HCO_3~-对酵母发酵的影响 | 第74-75页 |
| 4.3.4 丙酮酸盐羧化酶对木糖发酵的影响 | 第75-77页 |
| 4.3.5 碳酸酐酶对发酵的调控 | 第77-80页 |
| 4.4 本章小结 | 第80-82页 |
| 第五章 结论与展望 | 第82-84页 |
| 5.1 结论 | 第82-83页 |
| 5.2 展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 博士期间成果目录 | 第104-106页 |
| 附录一 英文缩写与中文名称对照表 | 第106-107页 |
| 附录二 分子生物学基本操作流程 | 第107-110页 |
| 附录三 已发表论文全文 | 第110-137页 |
| 附件 | 第137页 |
