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猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略词一览表第8-11页
1 前言第11-23页
   ·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的概述第11-13页
     ·猪嵴病毒概述第11-12页
     ·猪星状病毒概述第12页
     ·猪环曲病毒概述第12-13页
   ·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的分子生物学特征第13-15页
     ·猪嵴病毒的分子生物学特征第13页
     ·猪星状病毒的分子生物学特征第13-14页
     ·猪环曲病毒的分子生物学特征第14-15页
   ·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的流行病学第15-17页
     ·猪嵴病毒的流行病学第15-16页
     ·猪星状病毒的流行病学第16页
     ·猪环曲病毒的流行病学第16-17页
   ·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的检测技术研究进展第17-21页
     ·猪嵴病毒的检测技术研究进展第17-18页
     ·猪星状病毒的检测技术研究进展第18-20页
     ·猪环曲病毒检测方法研究进展第20-21页
     ·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的多重RT-PCR检测技术研究概况第21页
   ·研究目的与意义第21-22页
   ·研究内容与技术路线第22-23页
     ·研究内容第22页
     ·技术路线第22-23页
2 材料与方法第23-30页
   ·实验材料第23-24页
     ·病毒、阳性病料、菌株、样品第23页
     ·主要试剂第23页
     ·主要仪器第23页
     ·引物设计和合成第23-24页
   ·实验方法第24-30页
     ·材料处理第24页
     ·病毒核酸的提取及反转录成cDNA第24-25页
     ·PKV、PAstV和PToV的单项RT-PCR检测方法的建立第25-26页
     ·PKV、PAsV和PToV的多重RT-PCR方法的建立第26-29页
     ·多重RT-PCR检测方法的初步应用第29-30页
     ·目的基因的鉴定第30页
3 结果与分析第30-44页
   ·单项RT-PCR检测方法的建立第30-36页
     ·单项RT-PCR体系初扩增第30页
     ·单项RT-PCR扩增产物的转化和序列测定第30-31页
     ·单项RT-PCR的退火温度的优化第31-32页
     ·单项RT-PCR的特异性第32-33页
     ·单项RT-PCR的敏感性第33-35页
     ·单项RT-PCR的重复性第35-36页
   ·PKV、PAstV和PToV的多重RT-PCR方法的建立第36-42页
     ·多重RT-PCR的缓冲液的优化第36页
     ·多重RT-PCR的dNTP的优化第36-37页
     ·多重RT-PCR的Mg~(2+)的优化第37-38页
     ·多重RT-PCR的Taq酶的优化第38页
     ·多重RT-PCR的引物浓度的优化第38-39页
     ·多重RT-PCR的退火温度的优化第39页
     ·多重RT-PCR的延伸时间的优化第39-40页
     ·多重RT-PCR的特异性试验第40页
     ·多重RT-PCR的敏感性试验第40-41页
     ·多重RT-PCR的重复性试验第41-42页
   ·多重RT-PCR检测方法的初步应用第42-44页
     ·多重RT-PCR对20份猪肉样品的检测应用第42页
     ·多重RT-PCR和单项RT-PCR分别对96份猪肠内容物样品的检测及结果比较第42-44页
   ·多重RT-PCR扩增片段的基因序列验证结果第44页
4 讨论第44-46页
5 结论与展望第46-48页
   ·结论第46-47页
   ·展望第47-48页
参考文献第48-54页
致谢第54-55页
攻读硕士期间发表的学术论文第55页

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