摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词一览表 | 第8-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的概述 | 第11-13页 |
·猪嵴病毒概述 | 第11-12页 |
·猪星状病毒概述 | 第12页 |
·猪环曲病毒概述 | 第12-13页 |
·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的分子生物学特征 | 第13-15页 |
·猪嵴病毒的分子生物学特征 | 第13页 |
·猪星状病毒的分子生物学特征 | 第13-14页 |
·猪环曲病毒的分子生物学特征 | 第14-15页 |
·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的流行病学 | 第15-17页 |
·猪嵴病毒的流行病学 | 第15-16页 |
·猪星状病毒的流行病学 | 第16页 |
·猪环曲病毒的流行病学 | 第16-17页 |
·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的检测技术研究进展 | 第17-21页 |
·猪嵴病毒的检测技术研究进展 | 第17-18页 |
·猪星状病毒的检测技术研究进展 | 第18-20页 |
·猪环曲病毒检测方法研究进展 | 第20-21页 |
·猪嵴病毒、猪星状病毒和猪环曲病毒的多重RT-PCR检测技术研究概况 | 第21页 |
·研究目的与意义 | 第21-22页 |
·研究内容与技术路线 | 第22-23页 |
·研究内容 | 第22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-30页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·病毒、阳性病料、菌株、样品 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23页 |
·主要仪器 | 第23页 |
·引物设计和合成 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-30页 |
·材料处理 | 第24页 |
·病毒核酸的提取及反转录成cDNA | 第24-25页 |
·PKV、PAstV和PToV的单项RT-PCR检测方法的建立 | 第25-26页 |
·PKV、PAsV和PToV的多重RT-PCR方法的建立 | 第26-29页 |
·多重RT-PCR检测方法的初步应用 | 第29-30页 |
·目的基因的鉴定 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-44页 |
·单项RT-PCR检测方法的建立 | 第30-36页 |
·单项RT-PCR体系初扩增 | 第30页 |
·单项RT-PCR扩增产物的转化和序列测定 | 第30-31页 |
·单项RT-PCR的退火温度的优化 | 第31-32页 |
·单项RT-PCR的特异性 | 第32-33页 |
·单项RT-PCR的敏感性 | 第33-35页 |
·单项RT-PCR的重复性 | 第35-36页 |
·PKV、PAstV和PToV的多重RT-PCR方法的建立 | 第36-42页 |
·多重RT-PCR的缓冲液的优化 | 第36页 |
·多重RT-PCR的dNTP的优化 | 第36-37页 |
·多重RT-PCR的Mg~(2+)的优化 | 第37-38页 |
·多重RT-PCR的Taq酶的优化 | 第38页 |
·多重RT-PCR的引物浓度的优化 | 第38-39页 |
·多重RT-PCR的退火温度的优化 | 第39页 |
·多重RT-PCR的延伸时间的优化 | 第39-40页 |
·多重RT-PCR的特异性试验 | 第40页 |
·多重RT-PCR的敏感性试验 | 第40-41页 |
·多重RT-PCR的重复性试验 | 第41-42页 |
·多重RT-PCR检测方法的初步应用 | 第42-44页 |
·多重RT-PCR对20份猪肉样品的检测应用 | 第42页 |
·多重RT-PCR和单项RT-PCR分别对96份猪肠内容物样品的检测及结果比较 | 第42-44页 |
·多重RT-PCR扩增片段的基因序列验证结果 | 第44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
5 结论与展望 | 第46-48页 |
·结论 | 第46-47页 |
·展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第55页 |