| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| ·嗜冷菌的定义 | 第12页 |
| ·原料乳中的嗜冷菌 | 第12-14页 |
| ·原料乳中的嗜冷菌概述 | 第12-13页 |
| ·原料乳中的嗜冷菌危害 | 第13-14页 |
| ·乳中嗜冷菌的控制 | 第14页 |
| ·原料乳中嗜冷菌的计数方法 | 第14-16页 |
| ·国际标准计数方法 | 第14-15页 |
| ·快速计数方法 | 第15-16页 |
| ·PCR技术原理及应用 | 第16-17页 |
| ·PCR技术原理 | 第16页 |
| ·PCR反应体系及条件优化 | 第16-17页 |
| ·PCR技术在食品检测上的应用 | 第17页 |
| ·SYBR Green Ⅰ的荧光定量技术 | 第17-18页 |
| ·立题背景和意义 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-28页 |
| ·实验材料与仪器设备 | 第19-20页 |
| ·原料与药品 | 第19页 |
| ·仪器与设备 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·两种国际标准方法的相关性 | 第20-21页 |
| ·假单胞菌属标准菌株的分离、纯化和保藏 | 第21页 |
| ·DNA提取方法的选择 | 第21-23页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第23页 |
| ·原料乳中DNA提取的前处理方法 | 第23-24页 |
| ·假单胞菌属16S rRNA基因PCR方法建立 | 第24-26页 |
| ·嗜冷菌的碱性金属蛋白酶apr基因PCR方法的建立 | 第26-27页 |
| ·两种PCR方法的比较 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-43页 |
| ·两种国际标准方法的相关性研究 | 第28页 |
| ·DNA提取方法的选择 | 第28-31页 |
| ·沸水水浴法 | 第28-29页 |
| ·溶菌缓冲液法 | 第29-30页 |
| ·蛋白酶k法 | 第30页 |
| ·试剂盒法 | 第30-31页 |
| ·乳中基因组DNA提取的前处理 | 第31-33页 |
| ·氢氧化锆固定法 | 第31页 |
| ·柠檬酸钠和氢氧化钠法 | 第31-32页 |
| ·三氯乙酸处理法 | 第32-33页 |
| ·假单胞菌属16S rRNA基因PCR方法建立 | 第33-38页 |
| ·16S rRNA基因PCR条件的优化 | 第33-34页 |
| ·特异性研究 | 第34-35页 |
| ·假单胞菌属16S rRNA基因的测序鉴定 | 第35页 |
| ·灵敏度检测 | 第35-36页 |
| ·SYBR Green Ⅰ染料对PCR结果定量的研究 | 第36-37页 |
| ·培养液PCR反应标准曲线的建立 | 第37页 |
| ·原料乳PCR反应标准曲线的建立 | 第37-38页 |
| ·原料乳中嗜冷菌的碱性金属蛋白酶apr基因PCR方法的建立 | 第38-41页 |
| ·apr基因扩增条件的优化 | 第38-39页 |
| ·apr基因分析 | 第39-41页 |
| ·原料乳PCR反应标准曲线的建立 | 第41页 |
| ·PCR方法的比较与应用评价 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-49页 |
| ·两种国际标准计数方法 | 第43-44页 |
| ·PCR检测方法可行性分析 | 第44-45页 |
| ·PCR技术的定性分析 | 第44页 |
| ·PCR技术的定量分析 | 第44-45页 |
| ·PCR检测方法的影响因素 | 第45-47页 |
| ·原料乳的前处理及DNA提取 | 第45-46页 |
| ·实验条件优化选择 | 第46页 |
| ·PCR产物的荧光定量 | 第46-47页 |
| ·两种方法比较分析 | 第47页 |
| ·原料乳中假单胞菌属PCR计数方法优点与不足 | 第47-49页 |
| 5 结论 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
