| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 动物骨骼的研究现状 | 第11页 |
| 1.1.1 动物骨骼的营养价值 | 第11页 |
| 1.1.2 动物骨骼的开发利用 | 第11页 |
| 1.2 胶原蛋白研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.1 胶原蛋白的组织 | 第11页 |
| 1.2.2 胶原蛋白的结构 | 第11-12页 |
| 1.3 胶原蛋白肽的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3.1 胶原蛋白肽的主要特点 | 第12-13页 |
| 1.3.2 胶原蛋白肽的研究现状 | 第13页 |
| 1.4 蛋白酶的研究现状 | 第13-15页 |
| 1.4.1 蛋白酶简介 | 第13页 |
| 1.4.2 蛋白酶的分离纯化手段 | 第13-15页 |
| 1.4.3 蛋白酶的研究现状 | 第15页 |
| 1.5 立题背景和意义 | 第15-16页 |
| 1.6 主要研究内容 | 第16-19页 |
| 1.6.1 技术路线 | 第16页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第16-19页 |
| 第2章 B. cereus MBL13-U发酵制备胶原蛋白酶工艺优化 | 第19-31页 |
| 2.1 材料与设备 | 第19-20页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第19页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第19页 |
| 2.1.3 培养基组成 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-21页 |
| 2.2.1 发酵制备胶原蛋白酶的工艺流程 | 第20页 |
| 2.2.2 胶原蛋白酶发酵工艺的单因素试验 | 第20页 |
| 2.2.3 胶原蛋白酶发酵工艺的响应曲面优化试验 | 第20-21页 |
| 2.2.4 指标测定 | 第21页 |
| 2.2.5 数据处理 | 第21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-30页 |
| 2.3.1 甘氨酸标准曲线的绘制 | 第21-22页 |
| 2.3.2 单因素试验结果分析 | 第22-25页 |
| 2.3.3 响应曲面优化试验结果分析 | 第25-28页 |
| 2.3.4 回归模型的等高线与响应面分析 | 第28-30页 |
| 2.3.5 发酵制备胶原蛋白酶工艺的优化及验证 | 第30页 |
| 2.4 小结 | 第30-31页 |
| 第3章 胶原蛋白酶的分离纯化及特性分析 | 第31-43页 |
| 3.1 材料与设备 | 第31-32页 |
| 3.1.1 材料与试剂 | 第31页 |
| 3.1.2 仪器与设备 | 第31-32页 |
| 3.2 方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 CSCD酶粗酶液的制备 | 第32页 |
| 3.2.2 CSCD酶硫酸铵分级沉淀 | 第32页 |
| 3.2.3 CSCD酶DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析 | 第32页 |
| 3.2.4 CSCD酶Sephadex G-100 凝胶层析 | 第32页 |
| 3.2.5 CSCD酶分子量及纯度鉴定 | 第32-33页 |
| 3.2.6 CSCD酶最适温度及热稳定性研究 | 第33页 |
| 3.2.7 CSCD酶最适p H及p H稳定性研究 | 第33页 |
| 3.2.8 不同蛋白底物在CSCD酶的作用下水解度的变化 | 第33页 |
| 3.2.9 不同蛋白酶对牛跟腱I型胶原蛋白的作用对比 | 第33-34页 |
| 3.2.10 指标测定 | 第34页 |
| 3.2.11 数据处理 | 第34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-41页 |
| 3.3.1 牛血清白蛋白标准曲线的绘制 | 第34-35页 |
| 3.3.2 CSCD酶分离纯化结果 | 第35-37页 |
| 3.3.3 CSCD酶分子量及纯度鉴定 | 第37-38页 |
| 3.3.4 CSCD酶最适温度及热稳定性研究 | 第38页 |
| 3.3.5 CSCD酶最适p H及p H稳定性研究 | 第38-39页 |
| 3.3.6 不同蛋白底物在CSCD酶的作用下水解度的变化 | 第39-40页 |
| 3.3.7 不同蛋白酶对牛跟腱I型胶原蛋白的作用对比 | 第40-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-43页 |
| 第4章 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白的工艺优化 | 第43-55页 |
| 4.1 材料与设备 | 第43页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第43页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第43页 |
| 4.2 方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 牛骨胶原蛋白的制备 | 第43页 |
| 4.2.2 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白的工艺流程 | 第43-44页 |
| 4.2.3 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白的单因素试验 | 第44页 |
| 4.2.4 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白的响应曲面优化试验 | 第44-45页 |
| 4.2.5 指标测定 | 第45页 |
| 4.2.6 数据处理 | 第45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-54页 |
| 4.3.1 单因素试验结果分析 | 第45-49页 |
| 4.3.2 响应曲面优化试验结果分析 | 第49-52页 |
| 4.3.3 构建模型的等高线与响应面分析 | 第52-53页 |
| 4.3.4 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白的工艺优化及验证 | 第53-54页 |
| 4.4 小结 | 第54-55页 |
| 第5章 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白的动力学模型构建 | 第55-63页 |
| 5.1 材料与设备 | 第55页 |
| 5.1.1 材料与试剂 | 第55页 |
| 5.1.2 仪器与设备 | 第55页 |
| 5.2 方法 | 第55-56页 |
| 5.2.1 CSCD酶降解牛骨胶原蛋白过程监测 | 第55-56页 |
| 5.2.2 动力学模型的构建 | 第56页 |
| 5.2.3 指标测定 | 第56页 |
| 5.2.4 数据处理 | 第56页 |
| 5.3 结果与分析 | 第56-61页 |
| 5.3.1 CSCD酶和牛骨粗胶原蛋白添加量对水解度的影响 | 第56-57页 |
| 5.3.2 蛋白降解动力学模型的构建 | 第57-58页 |
| 5.3.3 蛋白降解动力学模型中各参数的确定 | 第58-60页 |
| 5.3.4 蛋白降解动力学模型的实验验证 | 第60-61页 |
| 5.4 小结 | 第61-63页 |
| 第6章 CSCD酶对牛骨胶原蛋白降解机理的初步探讨 | 第63-71页 |
| 6.1 材料与设备 | 第63页 |
| 6.1.1 材料与试剂 | 第63页 |
| 6.1.2 仪器与设备 | 第63页 |
| 6.2 方法 | 第63-64页 |
| 6.2.1 牛骨胶原蛋白降解产物的预处理 | 第63-64页 |
| 6.2.2 牛骨胶原蛋白与胶原蛋白肽的氨基酸含量分析 | 第64页 |
| 6.2.3 不同降解时间下胶原蛋白肽的紫外光谱分析 | 第64页 |
| 6.2.4 不同降解时间下胶原蛋白肽的荧光光谱分析 | 第64页 |
| 6.2.5 牛骨胶原蛋白与胶原蛋白肽的差示量热扫描分析 | 第64页 |
| 6.2.6 牛骨胶原蛋白与胶原蛋白肽的红外光谱分析 | 第64页 |
| 6.2.7 不同降解时间下牛骨胶原蛋白的扫描电镜分析 | 第64页 |
| 6.3 结果与分析 | 第64-70页 |
| 6.3.1 牛骨胶原蛋白与胶原蛋白肽的氨基酸含量分析 | 第64-65页 |
| 6.3.2 不同降解时间下胶原蛋白肽的紫外光谱分析 | 第65-66页 |
| 6.3.3 不同降解时间下胶原蛋白肽的荧光光谱分析 | 第66-67页 |
| 6.3.4 牛骨胶原蛋白与胶原蛋白肽的差示量热扫描分析 | 第67-68页 |
| 6.3.5 牛骨胶原蛋白与胶原蛋白肽的红外光谱分析 | 第68-69页 |
| 6.3.6 不同降解时间下牛骨胶原蛋白的扫描电镜分析 | 第69-70页 |
| 6.4 小结 | 第70-71页 |
| 第7章 结论与展望 | 第71-73页 |
| 7.1 结论 | 第71-72页 |
| 7.2 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第79页 |
