摘要 | 第8-10页 |
前言 | 第10-15页 |
1 多糖的概述 | 第10页 |
2 真菌多糖的研究进展 | 第10-11页 |
3 巴氏蘑菇多糖及其生物活性 | 第11-12页 |
3.1 ABMP的降血糖作用 | 第11页 |
3.2 ABMP的抗氧化、抗衰老作用 | 第11页 |
3.3 ABMP的抗肿瘤作用 | 第11-12页 |
3.4 ABMP的免疫活性作用 | 第12页 |
4 多糖对LPS诱导作用的影响 | 第12-13页 |
5 多糖对MAPK信号通路作用的研究进展 | 第13-14页 |
6 本课题研究的目的和意义 | 第14-15页 |
第一章 ABMP对RAW 264.7巨噬细胞活力的影响 | 第15-25页 |
1 材料与仪器 | 第15-16页 |
1.1 材料与试剂 | 第15-16页 |
1.1.1 实验材料 | 第15页 |
1.1.2 实验细胞 | 第15页 |
1.1.3 主要试剂 | 第15页 |
1.1.4 仪器设备 | 第15-16页 |
2 试验方法 | 第16-18页 |
2.1 试剂的配制 | 第16页 |
2.2 RAW 264.7细胞复苏 | 第16-17页 |
2.3 RAW 264.7细胞传代培养 | 第17页 |
2.4 RAW 264.7细胞冻存 | 第17页 |
2.5 MTT法检测 | 第17-18页 |
3 结果与分析 | 第18-24页 |
3.1 不同浓度ABMP对RAW 264.7巨噬细胞活力影响 | 第18-19页 |
3.2 不同抑制剂浓度对RAW 264.7巨噬细胞活力影响 | 第19-21页 |
3.2.1 不同浓度JNK抑制剂对RAW 264.7巨噬细胞活力影响 | 第19页 |
3.2.2 不同浓度ERK抑制剂对RAW 264.7巨隨细胞活力影响 | 第19-20页 |
3.2.3 不同浓度p38抑制剂对RAW 264.7巨噬细胞活力影响 | 第20-21页 |
3.3 不同浓度ABMP对RAW 264.7巨噬细胞形态的影响 | 第21-24页 |
4 讨论 | 第24页 |
5 小结 | 第24-25页 |
第二章 ABMP对LPS诱导RAW264.7巨噬细胞MAPK信号通路相关基因mRNA表达的影响 | 第25-39页 |
1 材料与仪器 | 第25-26页 |
1.1 材料与试剂 | 第25页 |
1.1.1 实验材料 | 第25页 |
1.1.2 实验细胞 | 第25页 |
1.1.3 主要试剂及耗材 | 第25页 |
1.2 主要仪器及设备 | 第25-26页 |
2 方法 | 第26-29页 |
2.1 实验细胞的分组与处理 | 第26页 |
2.2 RNA的提取与鉴定 | 第26-27页 |
2.2.1 预处理 | 第26页 |
2.2.2 RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.3 RNA的质量检测 | 第27页 |
2.3 逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR) | 第27-29页 |
2.3.1 cDNA的合成 | 第27-28页 |
2.3.2 cDNA的PCR扩增 | 第28-29页 |
2.4 数据分析 | 第29页 |
3 结果与分析 | 第29-37页 |
3.1 RNA检测 | 第29-30页 |
3.2 扩增效率分析 | 第30-32页 |
3.3 样品扩增动力学曲线和熔解曲线 | 第32-35页 |
3.4 ABMP对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞JNK、ERK、p38 mRNA表达量的影响 | 第35-37页 |
3.4.1 ABMP对JNK mRNA表达量的影响 | 第35-36页 |
3.4.2 ABMP对ERK mRNA表达量的影响 | 第36-37页 |
3.4.3 ABMP对p38 mRNA表达量的影响 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-38页 |
5 小结 | 第38-39页 |
第三章 ABMP对LPS诱导RAW 264.7巨噬细胞MAPK相关蛋白表达的影响 | 第39-52页 |
1 材料与仪器 | 第39-40页 |
1.1 实验材料 | 第39-40页 |
1.1.1 实验材料 | 第39页 |
1.1.2 实验细胞 | 第39页 |
1.1.3 主要试剂 | 第39-40页 |
1.1.4 主要仪器和设备 | 第40页 |
2 实验方法 | 第40-43页 |
2.1 试剂的配制 | 第40-41页 |
2.2 实验细胞的分组与处理 | 第41页 |
2.3 细胞总蛋白的提取与浓度测定 | 第41页 |
2.4 Western Blot | 第41-43页 |
2.4.1 蛋白样品的制备 | 第42页 |
2.4.2 SDS-PAGE凝胶制备 | 第42页 |
2.4.3 转膜 | 第42-43页 |
2.4.4 封闭与杂交 | 第43页 |
2.4.5 显色 | 第43页 |
2.5 SDS-PAGE凝胶染色 | 第43页 |
3 结果与分析 | 第43-49页 |
3.1 蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳图 | 第43-44页 |
3.2 BCA蛋白浓度测定结果 | 第44页 |
3.3 蛋白检测免疫印迹结果 | 第44-49页 |
3.3.1 JNK1/2、p-JNK1/2蛋白检测免疫印迹结果分析 | 第45-46页 |
3.3.2 ERK1/2、p-ERK1/2蛋白检测免疫印迹结果分析 | 第46-48页 |
3.3.3 p38、p-p38蛋白检测免疫印迹结果分析 | 第48-49页 |
4 讨论 | 第49-50页 |
5 小结 | 第50-52页 |
全文结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
攻读硕士期间所发表的论文及获得的奖励 | 第60-62页 |
Abstract | 第62-63页 |
致谢 | 第64页 |