| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 主要符号表 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-19页 |
| ·日本鳗鲡简介 | 第12-13页 |
| ·胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的研究现状 | 第13-15页 |
| ·胰蛋白酶原和胰蛋白酶 | 第13-14页 |
| ·胰蛋白酶分离纯化 | 第14页 |
| ·胰凝乳蛋白酶原和胰凝乳蛋白酶 | 第14-15页 |
| ·胰凝乳蛋白酶的分离纯化 | 第15页 |
| ·胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的应用研究 | 第15-17页 |
| ·本课题研究的内容与意义 | 第17-19页 |
| 第2章 材料与方法 | 第19-32页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·原料 | 第19页 |
| ·试剂与层析树脂 | 第19页 |
| ·实验所用溶液的配制 | 第19-22页 |
| ·纯化与活性测定所用溶液 | 第19-20页 |
| ·SDS-PAGE所用溶液 | 第20-21页 |
| ·Native-PAGE所用溶液 | 第21页 |
| ·酶联免疫吸附印迹反应所用溶液 | 第21页 |
| ·酶活力检测所需明胶 | 第21页 |
| ·普通硝酸银显色所用试剂 | 第21-22页 |
| ·实验所用仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-25页 |
| ·蛋白酶活力的测定 | 第22-23页 |
| ·蛋白酶浓度的测定 | 第23页 |
| ·SDS-PAGE | 第23-24页 |
| ·Native-PAGE | 第24页 |
| ·Casein-zymography | 第24页 |
| ·硝酸银染色方法 | 第24-25页 |
| ·分离纯化方案 | 第25-29页 |
| ·实验鱼预处理 | 第27页 |
| ·样品预处理 | 第27页 |
| ·硫酸铵分级沉淀 | 第27页 |
| ·DEAE-Sepharose阴离子交换柱层析 | 第27页 |
| ·Phenyl-Sepharose疏水层析 | 第27-28页 |
| ·Sephacryl S-200 HR凝胶过滤层析 | 第28页 |
| ·SP-Sepharose阳离子交换层析 | 第28-29页 |
| ·性质分析 | 第29-32页 |
| ·蛋白酶分子量的大小和纯度的鉴定 | 第29页 |
| ·最适p H和p H稳定性 | 第29页 |
| ·最适温度和热稳定性 | 第29页 |
| ·底物特异性测定 | 第29页 |
| ·抑制剂对蛋白酶活力的影响 | 第29页 |
| ·金属离子对胰蛋白酶活力的影响 | 第29页 |
| ·酶动力学研究 | 第29-30页 |
| ·免疫交叉反应 | 第30页 |
| ·胰蛋白酶的肽指纹质量图谱分析 | 第30页 |
| ·蛋白酶对虾肉肌原纤维蛋白的分解作用 | 第30页 |
| ·PVDF干法转膜及氨基酸测序 | 第30-32页 |
| 第3章 结果与讨论 | 第32-62页 |
| ·阳离子型胰凝乳蛋白酶的分离纯化 | 第32-38页 |
| ·硫酸铵饱和度的确定 | 第32页 |
| ·胰凝乳蛋白的柱层析分离 | 第32-38页 |
| ·胰凝乳蛋白酶的性质分析 | 第38-46页 |
| ·SDS-PAGE、Native-PAGE以及Gelatin Zymography分析 | 第38-39页 |
| ·胰凝乳蛋白酶A的最适p H和p H稳定性 | 第39-40页 |
| ·胰凝乳蛋白酶A的最适温度和热稳定性 | 第40-42页 |
| ·蛋白酶抑制剂对胰凝乳蛋白酶A活性的影响 | 第42-43页 |
| ·金属离子对胰凝乳蛋白酶A活性的影响 | 第43-44页 |
| ·日本鳗鲡胰凝乳蛋白酶的动力学参数 | 第44-45页 |
| ·日本鳗鲡胰凝乳蛋白酶的免疫印迹反应 | 第45-46页 |
| ·阴离子型胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的分离纯化及性质分析 | 第46-62页 |
| ·胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的柱层析分离 | 第46-49页 |
| ·SDS-PAGE和Native-PAGE分析 | 第49-50页 |
| ·胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的最适p H和p H稳定性 | 第50-51页 |
| ·胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的最适温度和热稳定性 | 第51-52页 |
| ·蛋白酶抑制剂对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性的影响 | 第52-53页 |
| ·金属离子对胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶活性的影响 | 第53-54页 |
| ·胰蛋白酶对荧光底物的分解作用 | 第54-55页 |
| ·日本鳗鲡胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的动力学参数 | 第55页 |
| ·日本鳗鲡胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的免疫印迹反应 | 第55-56页 |
| ·日本鳗鲡胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶对虾肌原纤维的降解作用 | 第56-58页 |
| ·日本鳗鲡胰蛋白酶和猪胰蛋白酶对虾肌原纤维的降解作用 | 第58-60页 |
| ·日本鳗鲡胰蛋白酶的N末端氨基酸序列的测定 | 第60页 |
| ·日本鳗鲡胰蛋白酶肽指纹质量图谱的分析 | 第60-62页 |
| 第4章 结论与展望 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-72页 |
| 在学期间发表的学术论文 | 第72页 |
