| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第1章 绪论 | 第8-19页 |
| 1.1 立题背景 | 第8页 |
| 1.2 抗菌肽概述 | 第8-13页 |
| 1.2.1 抗菌肽的定义与分类体系 | 第8-9页 |
| 1.2.2 I 型抗菌肽 | 第9-10页 |
| 1.2.3 II 类抗菌肽 | 第10-12页 |
| 1.2.4 抗菌肽产生菌与抑菌谱 | 第12-13页 |
| 1.3 不同类型抗菌肽的分子结构与编码基因 | 第13-14页 |
| 1.3.1 羊毛硫细菌素的分子结构与编码基因 | 第13-14页 |
| 1.3.2 IIa 类抗菌肽的分子结构与编码基因 | 第14页 |
| 1.4 不同类型抗菌肽的生物合成机制 | 第14-16页 |
| 1.4.1 IIa 抗菌肽生物合成机制 | 第14-15页 |
| 1.4.2 Nisin 的生物合成机制 | 第15-16页 |
| 1.5 抗菌肽的筛选方法 | 第16-18页 |
| 1.5.1 基于抑菌活性的抗菌肽的筛选 | 第16页 |
| 1.5.2 基于基因结构的抗菌肽筛选 | 第16-18页 |
| 1.6 本课题研究的目的及意义 | 第18页 |
| 1.7 本课题主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第2章 材料和方法 | 第19-32页 |
| 2.1 材料及仪器 | 第19-24页 |
| 2.1.1 乳酸菌及指示菌来源 | 第19页 |
| 2.1.2 酶及试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.3 引物 | 第19页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第19-20页 |
| 2.1.5 常用生化试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2.1.6 培养基的配制 | 第22页 |
| 2.1.7 试剂及药品 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-32页 |
| 2.2.1 PCR 方法筛选产 IIa 类抗菌肽 | 第24-30页 |
| 2.2.2 重组质粒 DNA 的鉴定 | 第30页 |
| 2.2.3 传统方法验证 | 第30-32页 |
| 第3章 IIa 型抗菌肽聚类分析与筛选引物设计 | 第32-41页 |
| 3.1 IIA 型抗菌肽聚类分析 | 第32-37页 |
| 3.2 IIA 型抗菌肽种属特异性引物的设计 | 第37-38页 |
| 3.3 IIA 型抗菌肽调控基因筛选引物的确定 | 第38-40页 |
| 3.4 本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 PCR 方法筛选与传统方法验证 | 第41-59页 |
| 4.1 乳酸菌的基因组 DNA 及质粒提取 | 第41-44页 |
| 4.1.1 基因组 DNA 提取 | 第41页 |
| 4.1.2 质粒 DNA 的提取 | 第41-44页 |
| 4.2 PCR 条件优化及扩增结果 | 第44-55页 |
| 4.2.1 基因组 DNA 的 PCR 条件优化 | 第44-47页 |
| 4.2.2 以基因组 DNA 为模板抗菌肽基因的筛选和测序 | 第47-53页 |
| 4.2.3 质粒 DNA 抗菌肽基因的扩增 | 第53-55页 |
| 4.3 传统方法的验证及抑菌物质的确定 | 第55-58页 |
| 4.3.1 双层平板法测试抑菌活性 | 第56-57页 |
| 4.3.2 酸的排除 | 第57页 |
| 4.3.3 抑菌物质的蛋白质特性的确定 | 第57-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 附录 | 第70-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第72-74页 |
| 致谢 | 第74页 |