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大豆蛋白热诱导二硫键连接物的形成及巯基变化亚基水平研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
中英文缩写词对照表第7-11页
第一章 绪论第11-30页
    1.1 引言第11页
    1.2 巯基和二硫键对实现蛋白质营养功能的作用第11-12页
        1.2.1 巯基的抗氧化活性第11页
        1.2.2 巯基有助于钝化植物胰蛋白酶抑制剂及解毒第11-12页
        1.2.3 巯基参与维持体内氧化-还原反应平衡第12页
    1.3 巯基和二硫键对蛋白质聚集和功能性质的影响第12-15页
        1.3.1 巯基和二硫键对蛋白质功能性质的影响第13-14页
        1.3.2 巯基和二硫键对蛋白质聚集的影响第14-15页
    1.4 蛋白质巯基氧化反应和巯基/二硫键交换反应的研究方法第15-16页
    1.5 大豆蛋白组成第16-18页
        1.5.1 11S 亚基组成、结构、巯基与二硫键分布第17-18页
        1.5.2 7S 亚基组成、结构第18页
    1.6 大豆蛋白热处理后亚基解离/缔合:二硫键连接产物的研究现状第18-20页
    1.7 论文立题依据和研究意义第20-21页
    1.8 研究内容及技术路线第21页
    参考文献第21-30页
第二章 大豆蛋白巯基检测方法的研究第30-44页
    2.1 引言第30-31页
    2.2 材料与设备第31-32页
        2.2.1 材料第31页
        2.2.2 主要设备第31-32页
    2.3 实验方法第32-34页
        2.3.1 大豆蛋白的制备第32页
        2.3.2 大豆蛋白的热处理第32页
        2.3.3 变性剂缓冲液的配制第32页
        2.3.4 不同条件下 NTB 和 4-TP 的摩尔消光系数的测定第32-33页
        2.3.5 DTNB 法测定 SH第33页
        2.3.6 DPS 法测定 SH第33页
        2.3.7 酶解辅助 DPS 法测定 SH第33页
        2.3.8 mBBr 法测定 SH第33-34页
        2.3.9 NPM 法测定 SH第34页
        2.3.10 氨基酸分析法测定半胱氨酸第34页
        2.3.11 统计分析第34页
    2.4 结果与讨论第34-41页
        2.4.1 不同条件下 NTB 和 4-TP 的摩尔消光系数第34-35页
        2.4.2 两种芳香族二硫试剂 DTNB 和 DPS 测定 SH第35-40页
            2.4.2.1 pH 对 SH 测定的影响第35-36页
            2.4.2.2 变性剂与 SH 检测试剂添加至蛋白溶液的顺序以及蛋白质与变性剂的接触时间对 SH测定的影响第36-37页
            2.4.2.3 变性剂浓度和 EDTA 对 SH 测定的影响第37-40页
        2.4.3. 荧光试剂 mBBr 和 NPM 检测 SH第40-41页
        2.4.4 酶解辅助 DPS 法测定 SH 含量和氨基酸分析法测定半胱氨酸含量第41页
    2.5 本章小结第41-42页
    参考文献第42-44页
第三章 大豆蛋白热诱导二硫键连接产物的形成及其亚基组成第44-61页
    3.1 引言第44页
    3.2 材料与设备第44-45页
        3.2.1 材料第44页
        3.2.2 主要设备第44-45页
    3.3 实验方法第45-47页
        3.3.1 大豆蛋白的制备第45页
        3.3.2 大豆蛋白的热处理第45页
        3.3.3 非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE)第45页
        3.3.4 对角线电泳第45页
        3.3.5 胶内酶解和基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱第45-46页
        3.3.6 应用数据库判读质谱数据第46页
        3.3.7 圆二色谱(CD)第46-47页
    3.4 结果与讨论第47-57页
        3.4.1 大豆蛋白热诱导 SS 连接产物的生成及亚基组成第47-49页
        3.4.2 热处理温度和时间对 SS 连接产物生成的影响第49-52页
        3.4.3 质谱鉴定 SS 连接产物的亚基组成第52-54页
        3.4.4 未加热蛋白一级结构中半胱氨酸存在状态的初步研究第54-56页
        3.4.5 加热蛋白一级结构中半胱氨酸存在状态的初步研究第56-57页
    3.5 本章小结第57-58页
    参考文献第58-61页
第四章 生成二硫键聚合体的巯基氧化反应和巯基/二硫键交换反应的研究第61-78页
    4.1 引言第61页
    4.2 材料与设备第61-62页
        4.2.1 材料第61页
        4.2.2 主要设备第61-62页
    4.3 实验方法第62-63页
        4.3.1 大豆蛋白的制备第62页
        4.3.2 大豆蛋白的热处理第62页
        4.3.3 DPS 法测定大豆蛋白总巯基含量第62页
        4.3.4 非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第62页
        4.3.5 巯基特异性荧光标记结合 SDS-PAGE 分析第62-63页
        4.3.6 对角线电泳第63页
    4.4 结果与讨论第63-75页
        4.4.1 大豆蛋白热诱导二硫键连接产物质量含量的变化第63-66页
        4.4.2 大豆蛋白总巯基含量的变化第66页
        4.4.3 大豆蛋白亚基的巯基含量变化与二硫键聚合体生成的关系第66-71页
        4.4.4 巯基氧化反应和巯基/二硫键交换反应对二硫键聚合体生成的作用第71-75页
    4.5 本章小结第75页
    参考文献第75-78页
第五章 二硫键连接产物的生成对大豆蛋白热诱导聚集的影响第78-96页
    5.1 引言第78页
    5.2 材料与设备第78-79页
        5.2.1 材料第78页
        5.2.2 主要设备第78-79页
    5.3 实验方法第79-81页
        5.3.1 大豆蛋白的制备第79页
        5.3.2 大豆蛋白的还原以及热处理第79页
        5.3.3 大豆蛋白表面 SH 含量的测定第79页
        5.3.4 大豆蛋白总 SH 含量的测定第79页
        5.3.5 采用氨基酸分析法测定半胱氨酸总量第79页
        5.3.6 测定聚集体粒径(动态光散射分析)第79-80页
        5.3.7 非还原电泳分析第80页
        5.3.8 对角线电泳分析第80页
        5.3.9 大豆蛋白分散液的粘度测定第80页
        5.3.10 原子力显微镜第80页
        5.3.11 超速离心分离第80页
        5.3.12 圆二色谱(CD)分析第80-81页
        5.3.13 统计分析第81页
    5.4 结果与讨论第81-92页
        5.4.1 不同程度还原处理对大豆蛋白的影响第81-83页
            5.4.1.1 还原处理对二级和三级结构的影响第81页
            5.4.1.2 还原处理对表面 SH 和总 SH 的影响第81-82页
            5.4.1.3 还原处理对粒径的影响第82-83页
            5.4.1.4 还原处理对 SS 的影响第83页
        5.4.2 热处理对不同还原程度的大豆蛋白的影响第83-92页
            5.4.2.1 还原程度对热诱导聚集体的影响第83-85页
            5.4.2.2 还原程度对热诱导聚集体分散液粘度的影响第85页
            5.4.2.3 还原程度对加热大豆蛋白 SH 和 SS 的影响第85-87页
            5.4.2.4 还原程度对聚集体蛋白成分的影响第87-88页
            5.4.2.5 还原程度对 SS 连接产物生成的影响第88-92页
    5.5 本章小结第92-93页
    参考文献第93-96页
论文主要结论与展望第96-98页
    主要结论第96-97页
    展望第97-98页
论文创新点第98-99页
附录第99-105页
致谢第105-106页
攻读博士学位期间发表的论文第106页

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