| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩写词对照表 | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-30页 |
| 1.1 引言 | 第11页 |
| 1.2 巯基和二硫键对实现蛋白质营养功能的作用 | 第11-12页 |
| 1.2.1 巯基的抗氧化活性 | 第11页 |
| 1.2.2 巯基有助于钝化植物胰蛋白酶抑制剂及解毒 | 第11-12页 |
| 1.2.3 巯基参与维持体内氧化-还原反应平衡 | 第12页 |
| 1.3 巯基和二硫键对蛋白质聚集和功能性质的影响 | 第12-15页 |
| 1.3.1 巯基和二硫键对蛋白质功能性质的影响 | 第13-14页 |
| 1.3.2 巯基和二硫键对蛋白质聚集的影响 | 第14-15页 |
| 1.4 蛋白质巯基氧化反应和巯基/二硫键交换反应的研究方法 | 第15-16页 |
| 1.5 大豆蛋白组成 | 第16-18页 |
| 1.5.1 11S 亚基组成、结构、巯基与二硫键分布 | 第17-18页 |
| 1.5.2 7S 亚基组成、结构 | 第18页 |
| 1.6 大豆蛋白热处理后亚基解离/缔合:二硫键连接产物的研究现状 | 第18-20页 |
| 1.7 论文立题依据和研究意义 | 第20-21页 |
| 1.8 研究内容及技术路线 | 第21页 |
| 参考文献 | 第21-30页 |
| 第二章 大豆蛋白巯基检测方法的研究 | 第30-44页 |
| 2.1 引言 | 第30-31页 |
| 2.2 材料与设备 | 第31-32页 |
| 2.2.1 材料 | 第31页 |
| 2.2.2 主要设备 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.3.1 大豆蛋白的制备 | 第32页 |
| 2.3.2 大豆蛋白的热处理 | 第32页 |
| 2.3.3 变性剂缓冲液的配制 | 第32页 |
| 2.3.4 不同条件下 NTB 和 4-TP 的摩尔消光系数的测定 | 第32-33页 |
| 2.3.5 DTNB 法测定 SH | 第33页 |
| 2.3.6 DPS 法测定 SH | 第33页 |
| 2.3.7 酶解辅助 DPS 法测定 SH | 第33页 |
| 2.3.8 mBBr 法测定 SH | 第33-34页 |
| 2.3.9 NPM 法测定 SH | 第34页 |
| 2.3.10 氨基酸分析法测定半胱氨酸 | 第34页 |
| 2.3.11 统计分析 | 第34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-41页 |
| 2.4.1 不同条件下 NTB 和 4-TP 的摩尔消光系数 | 第34-35页 |
| 2.4.2 两种芳香族二硫试剂 DTNB 和 DPS 测定 SH | 第35-40页 |
| 2.4.2.1 pH 对 SH 测定的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.2.2 变性剂与 SH 检测试剂添加至蛋白溶液的顺序以及蛋白质与变性剂的接触时间对 SH测定的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.2.3 变性剂浓度和 EDTA 对 SH 测定的影响 | 第37-40页 |
| 2.4.3. 荧光试剂 mBBr 和 NPM 检测 SH | 第40-41页 |
| 2.4.4 酶解辅助 DPS 法测定 SH 含量和氨基酸分析法测定半胱氨酸含量 | 第41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
| 第三章 大豆蛋白热诱导二硫键连接产物的形成及其亚基组成 | 第44-61页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 材料与设备 | 第44-45页 |
| 3.2.1 材料 | 第44页 |
| 3.2.2 主要设备 | 第44-45页 |
| 3.3 实验方法 | 第45-47页 |
| 3.3.1 大豆蛋白的制备 | 第45页 |
| 3.3.2 大豆蛋白的热处理 | 第45页 |
| 3.3.3 非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析(SDS-PAGE) | 第45页 |
| 3.3.4 对角线电泳 | 第45页 |
| 3.3.5 胶内酶解和基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱 | 第45-46页 |
| 3.3.6 应用数据库判读质谱数据 | 第46页 |
| 3.3.7 圆二色谱(CD) | 第46-47页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第47-57页 |
| 3.4.1 大豆蛋白热诱导 SS 连接产物的生成及亚基组成 | 第47-49页 |
| 3.4.2 热处理温度和时间对 SS 连接产物生成的影响 | 第49-52页 |
| 3.4.3 质谱鉴定 SS 连接产物的亚基组成 | 第52-54页 |
| 3.4.4 未加热蛋白一级结构中半胱氨酸存在状态的初步研究 | 第54-56页 |
| 3.4.5 加热蛋白一级结构中半胱氨酸存在状态的初步研究 | 第56-57页 |
| 3.5 本章小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-61页 |
| 第四章 生成二硫键聚合体的巯基氧化反应和巯基/二硫键交换反应的研究 | 第61-78页 |
| 4.1 引言 | 第61页 |
| 4.2 材料与设备 | 第61-62页 |
| 4.2.1 材料 | 第61页 |
| 4.2.2 主要设备 | 第61-62页 |
| 4.3 实验方法 | 第62-63页 |
| 4.3.1 大豆蛋白的制备 | 第62页 |
| 4.3.2 大豆蛋白的热处理 | 第62页 |
| 4.3.3 DPS 法测定大豆蛋白总巯基含量 | 第62页 |
| 4.3.4 非还原十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第62页 |
| 4.3.5 巯基特异性荧光标记结合 SDS-PAGE 分析 | 第62-63页 |
| 4.3.6 对角线电泳 | 第63页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第63-75页 |
| 4.4.1 大豆蛋白热诱导二硫键连接产物质量含量的变化 | 第63-66页 |
| 4.4.2 大豆蛋白总巯基含量的变化 | 第66页 |
| 4.4.3 大豆蛋白亚基的巯基含量变化与二硫键聚合体生成的关系 | 第66-71页 |
| 4.4.4 巯基氧化反应和巯基/二硫键交换反应对二硫键聚合体生成的作用 | 第71-75页 |
| 4.5 本章小结 | 第75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
| 第五章 二硫键连接产物的生成对大豆蛋白热诱导聚集的影响 | 第78-96页 |
| 5.1 引言 | 第78页 |
| 5.2 材料与设备 | 第78-79页 |
| 5.2.1 材料 | 第78页 |
| 5.2.2 主要设备 | 第78-79页 |
| 5.3 实验方法 | 第79-81页 |
| 5.3.1 大豆蛋白的制备 | 第79页 |
| 5.3.2 大豆蛋白的还原以及热处理 | 第79页 |
| 5.3.3 大豆蛋白表面 SH 含量的测定 | 第79页 |
| 5.3.4 大豆蛋白总 SH 含量的测定 | 第79页 |
| 5.3.5 采用氨基酸分析法测定半胱氨酸总量 | 第79页 |
| 5.3.6 测定聚集体粒径(动态光散射分析) | 第79-80页 |
| 5.3.7 非还原电泳分析 | 第80页 |
| 5.3.8 对角线电泳分析 | 第80页 |
| 5.3.9 大豆蛋白分散液的粘度测定 | 第80页 |
| 5.3.10 原子力显微镜 | 第80页 |
| 5.3.11 超速离心分离 | 第80页 |
| 5.3.12 圆二色谱(CD)分析 | 第80-81页 |
| 5.3.13 统计分析 | 第81页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第81-92页 |
| 5.4.1 不同程度还原处理对大豆蛋白的影响 | 第81-83页 |
| 5.4.1.1 还原处理对二级和三级结构的影响 | 第81页 |
| 5.4.1.2 还原处理对表面 SH 和总 SH 的影响 | 第81-82页 |
| 5.4.1.3 还原处理对粒径的影响 | 第82-83页 |
| 5.4.1.4 还原处理对 SS 的影响 | 第83页 |
| 5.4.2 热处理对不同还原程度的大豆蛋白的影响 | 第83-92页 |
| 5.4.2.1 还原程度对热诱导聚集体的影响 | 第83-85页 |
| 5.4.2.2 还原程度对热诱导聚集体分散液粘度的影响 | 第85页 |
| 5.4.2.3 还原程度对加热大豆蛋白 SH 和 SS 的影响 | 第85-87页 |
| 5.4.2.4 还原程度对聚集体蛋白成分的影响 | 第87-88页 |
| 5.4.2.5 还原程度对 SS 连接产物生成的影响 | 第88-92页 |
| 5.5 本章小结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-96页 |
| 论文主要结论与展望 | 第96-98页 |
| 主要结论 | 第96-97页 |
| 展望 | 第97-98页 |
| 论文创新点 | 第98-99页 |
| 附录 | 第99-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第106页 |