| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略符号对照表 | 第8-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-22页 |
| 1.1 3-羟基丁酮的理化性质 | 第13-14页 |
| 1.2 3-羟基丁酮的应用 | 第14页 |
| 1.3 3-羟基丁酮的生产方法 | 第14页 |
| 1.4 微生物产生3-羟基丁酮的生理意义 | 第14-15页 |
| 1.4.1 维持pH稳定，贮存碳源 | 第14页 |
| 1.4.2 维持NAD/NADH比例的稳定 | 第14-15页 |
| 1.4.3 调控细胞内支链氨基酸的合成 | 第15页 |
| 1.4.4 调控细胞的死亡和自溶 | 第15页 |
| 1.5 微生物体内3-羟基丁酮的代谢途径 | 第15-18页 |
| 1.5.1 合成代谢途径 | 第16-17页 |
| 1.5.2 分解代谢途径 | 第17-18页 |
| 1.6 3-羟基丁酮的发酵菌株 | 第18-19页 |
| 1.7 提高微生物发酵3-羟基丁酮产量的策略 | 第19-20页 |
| 1.7.1 培养基组分的优化 | 第19页 |
| 1.7.2 发酵工艺的优化 | 第19-20页 |
| 1.7.3 利用分子生物学手段构建高产菌株 | 第20页 |
| 1.8 3-羟基丁酮的下游技术 | 第20页 |
| 1.9 本研究立题意义与目的 | 第20-21页 |
| 1.10 本研究研究思路与主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 诱变选育3-羟基丁酮高产突变株 | 第22-39页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 材料与方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2.4 培养基 | 第23页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.6 分析方法 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第25-37页 |
| 2.3.1 致死率曲线与诱变条件的选择 | 第26-27页 |
| 2.3.2 UV诱变的结果分析 | 第27-28页 |
| 2.3.3 DES诱变的结果分析 | 第28-29页 |
| 2.3.4 NTG诱变的结果分析 | 第29页 |
| 2.3.5 3-羟基丁酮高产突变株的选育谱系图 | 第29-30页 |
| 2.3.6 突变株B. subtilis SF3-102发酵液的GC-MS鉴定 | 第30-31页 |
| 2.3.7 突变株B. subtilis SF3-102的遗传稳定性 | 第31页 |
| 2.3.8 B. subtilis SF3-102菌株生长曲线及接种种龄、接种量对3-羟基丁酮发酵的影响 | 第31-32页 |
| 2.3.9 温度对B. subtilis SF3-102的3-羟基丁酮发酵的影响 | 第32-33页 |
| 2.3.10 碳源对B. subtilis3-102的3-羟基丁酮发酵的影响 | 第33-35页 |
| 2.3.11 氮源对B. subtilis3-102的3-羟基丁酮发酵的影响 | 第35-36页 |
| 2.3.12 金属离子对B. subtilis3-102的3-羟基丁酮发酵的影响 | 第36-37页 |
| 2.3.13 B. subtilis SF3-102的摇瓶发酵进程实验 | 第37页 |
| 2.4 本章小结 | 第37-39页 |
| 第三章 对枯草芽孢杆菌中3-羟基丁酮过量积累因素的探讨 | 第39-54页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第39页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第39-40页 |
| 3.2.4 培养基 | 第40页 |
| 3.2.5 实验方法 | 第40-42页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第42-53页 |
| 3.3.1 基因组的预测与分析 | 第42-44页 |
| 3.3.2 基因功能的预测与分类 | 第44-46页 |
| 3.3.3 比较基因组学分析 | 第46-53页 |
| 3.4 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 枯草芽孢杆菌中3-羟基丁酮代谢途径的基因改造 | 第54-63页 |
| 4.1 引言 | 第54页 |
| 4.2 材料和方法 | 第54-58页 |
| 4.2.1 菌种与质粒 | 第54-55页 |
| 4.2.2 主要仪器和试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.3 溶液 | 第56页 |
| 4.2.4 培养基和培养方式 | 第56页 |
| 4.2.5 培养方法 | 第56页 |
| 4.2.6 引物设计 | 第56页 |
| 4.2.7 质粒提取 | 第56页 |
| 4.2.8 基因组DNA提取 | 第56-57页 |
| 4.2.9 DNA片段回收 | 第57页 |
| 4.2.10 PCR克隆反应和载体片段的连接 | 第57页 |
| 4.2.11 大肠杆菌感受态制备方法及转化 | 第57页 |
| 4.2.12 枯草芽孢杆菌感受态制备方法及转化 | 第57页 |
| 4.2.13 分析方法 | 第57-58页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第58-62页 |
| 4.3.1 bdhA基因敲除系统的构建 | 第58-61页 |
| 4.3.2 bdhA基因敲除对B. subtilis SFAP发酵产3-羟基丁酮的影响 | 第61-62页 |
| 4.4 本章小结 | 第62-63页 |
| 第五章 B. subtilis SFAP的3-羟基丁酮发酵的放大试验 | 第63-74页 |
| 5.1 引言 | 第63页 |
| 5.2 材料与方法 | 第63-64页 |
| 5.2.1 菌种 | 第63页 |
| 5.2.2 培养基 | 第63页 |
| 5.2.3 培养方法 | 第63-64页 |
| 5.2.4 仪器设备 | 第64页 |
| 5.2.5 分析方法 | 第64页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第64-73页 |
| 5.3.1 溶解氧对菌株B. subtilis SFAP的3-羟基丁酮发酵的影响 | 第64-67页 |
| 5.3.2 pH值对菌株SFAP产3-羟基丁酮发酵的影响 | 第67-69页 |
| 5.3.3 3-羟基丁酮补料发酵的研究 | 第69-71页 |
| 5.3.4 放大发酵实验 | 第71-73页 |
| 5.3.5 工业化发酵实验 | 第73页 |
| 5.4 本章小结 | 第73-74页 |
| 第六章 发酵液中分离提取3-羟基丁酮下游技术的研究 | 第74-96页 |
| 6.1 引言 | 第74页 |
| 6.2 材料与方法 | 第74-77页 |
| 6.2.1 发酵液的制备 | 第74页 |
| 6.2.2 主要试剂 | 第74页 |
| 6.2.3 主要仪器 | 第74-75页 |
| 6.2.4 实验方法 | 第75页 |
| 6.2.5 分析方法 | 第75-77页 |
| 6.3 结果与讨论 | 第77-94页 |
| 6.3.1 菌体分离 | 第77-79页 |
| 6.3.2 陶瓷膜过滤操作参数优化 | 第79-80页 |
| 6.3.3 膜过滤清液脱色 | 第80-83页 |
| 6.3.4 精馏 | 第83-85页 |
| 6.3.5 加盐精馏 | 第85-86页 |
| 6.3.6 溶剂萃取 | 第86-92页 |
| 6.3.7 几种提取工艺的比较 | 第92-93页 |
| 6.3.8 3-羟基丁酮高纯度产品的制备 | 第93-94页 |
| 6.4 本章小结 | 第94-96页 |
| 主要结论与展望 | 第96-98页 |
| 主要结论 | 第96-97页 |
| 展望 | 第97-98页 |
| 论文创新点 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-110页 |
| 附录：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第110页 |
