| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 缩写词表 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| ·纳豆及功能性介 | 第15-17页 |
| ·纳豆芽孢杆菌及氨味成 | 第17-19页 |
| ·谷氨酸脱氢酶和尿素酶简介 | 第19-20页 |
| ·纳豆风味改良现状与展容 | 第20-21页 |
| ·生物信息技术 | 第21-22页 |
| ·基因敲除技术 | 第22-24页 |
| ·研究依据和研究容 | 第24-26页 |
| ·研究依据 | 第24-25页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 基因 rocG和 ure特征分析 | 第26-48页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·溶液配制 | 第26-27页 |
| ·仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·纳豆芽孢杆菌 DNA 提取 | 第28-29页 |
| ·琼脂糖凝胶的制备和基因组 DNA 的检测 | 第29页 |
| ·基因 rocG 和 ure 的克隆 | 第29-30页 |
| ·基因 rocG 和 ure PCR 产物纯化 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌 E. coli JM109 感受态细胞的制备（CaCl2法） | 第31-32页 |
| ·TA 克隆 | 第32-33页 |
| ·基因 rocG 和 ure 编码区及其氨基酸序列分析 | 第33页 |
| ·系统发生树的构建 | 第33页 |
| ·基因 rocG 和 ure 非编码区克隆及析 | 第33-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-46页 |
| ·纳豆芽孢杆菌生长曲线 | 第34-35页 |
| ·纳豆芽孢杆菌基因组 DNA 的提取 | 第35页 |
| ·基因 rocG 和 ure 扩增与测序结果分析 | 第35-36页 |
| ·基因 rocG 和 ure 编码区 GC 含量及其氨基酸序列分析 | 第36-40页 |
| ·基因进化树的构建 | 第40-42页 |
| ·基因 rocG 和 ure 非编码区克隆及析 | 第42-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 第三章 基因 rocG 和 ure 敲除载体的构建 | 第48-71页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·菌株与质粒 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-56页 |
| ·纳豆芽孢杆菌 DNA 提取 | 第49页 |
| ·质粒 pMUTin4 提取 | 第49-50页 |
| ·酶切位点分析与鉴定 | 第50页 |
| ·基因 rocG 和 ure 旁邻片段扩增 | 第50-51页 |
| ·抗性筛选基因 nisI 扩增 | 第51-52页 |
| ·基因 rocG 和 ure 旁邻片段和 nisI 基因 TA 克隆质粒的提取 | 第52页 |
| ·5'旁邻片段与 pMUTin4 质粒的酶切酶连 | 第52-53页 |
| ·3'旁邻片段与质粒 pMUTin4-r-u、pMUTin4-u-u 的酶切酶连 | 第53-54页 |
| ·基因 nisI 与质粒 pMUTin4-r-u-d、pMUTin4-u-u-d 的酶切酶连 | 第54-56页 |
| ·实验结果 | 第56-70页 |
| ·纳豆芽孢杆菌 DNA 提取 | 第56页 |
| ·酶切位点分析与鉴定 | 第56-57页 |
| ·自杀质粒pMUTin4 单酶切鉴定 | 第57-59页 |
| ·基因 rocG 和 ure 旁邻片段扩增与测序结果分析 | 第59-61页 |
| ·基因 nisI 扩增与测序结果分析 | 第61-62页 |
| ·5 '旁邻片段与质粒 pMUTin4 的酶切酶连 | 第62-64页 |
| ·重组质粒 pMUTin4-r-u、pMUTin4-u-u 的鉴定 | 第64-65页 |
| ·3 ' 旁邻片段与质粒 pMUTin4-r-u、pMUTin4-u-u 的酶切酶连 | 第65-67页 |
| ·重组质粒 pMUTin4-r-u-d、pMUTin4-u-u-d 的鉴定 | 第67页 |
| ·基因 nisI 与质粒 pMUTin4-r-u-d 和 pMUTin4-u-u-d 的酶切酶连 | 第67-68页 |
| ·重组质粒 pMUTin4-rocG::nisI 和 pMUTin4-ure::nisI 的鉴定 | 第68-70页 |
| ·本章小结 | 第70-71页 |
| 第四章 结论与展望 | 第71-73页 |
| ·结论 | 第71-72页 |
| ·展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 附录 | 第78-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第83页 |
