摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第7-8页 |
目录 | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第10-17页 |
·戊型肝炎病毒研究研究进展 | 第10-15页 |
·戊型肝炎的发现与爆发 | 第11页 |
·戊型肝炎病毒分子流行病学 | 第11-13页 |
·戊型肝炎病毒细胞培养模型 | 第13页 |
·戊型肝炎病毒结构 | 第13-14页 |
·戊型肝炎病毒疫苗 | 第14-15页 |
·戊型肝炎病毒受体 | 第15页 |
·本课题的研究内容及研究意义 | 第15-17页 |
第二章 材料和方法 | 第17-30页 |
·菌株 | 第17页 |
·载体质粒 | 第17-18页 |
·主要仪器及设备 | 第18-19页 |
·试剂及其配制 | 第19-21页 |
·本研究克隆所用引物及其序列 | 第21-22页 |
·实验方法 | 第22-30页 |
·PCR 扩增目标片段 | 第22-23页 |
·限制性内切酶切割 | 第23-24页 |
·琼脂糖凝胶 DNA 回收 | 第24-25页 |
·连接酶连接及同源重组法克隆 | 第25页 |
·转化感受态细胞 | 第25-26页 |
·小规模质粒提取 | 第26-27页 |
·昆虫细胞培养及运用重组杆状病毒侵染昆虫细胞表达目的蛋白 | 第27-28页 |
·哺乳动物细胞培养及转染 | 第28页 |
·哺乳动物细胞裂解及免疫沉淀 | 第28-29页 |
·免疫印迹检测 | 第29页 |
·银染及液相色谱-质谱联用 | 第29-30页 |
第三章 戊型肝炎病毒 ORF3 的真核表达及其相互作用蛋白的筛选和鉴定 | 第30-55页 |
·前言 | 第30页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 的生物信息学分析 | 第30-40页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 氨基酸序列比对 | 第30-32页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 二级结构预测 | 第32-34页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 折叠倾向性预测 | 第34-36页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 磷酸化位点的预测 | 第36-38页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 三级结构预测及分析 | 第38-40页 |
·戊型肝炎病毒 ORF3 的真核表达 | 第40-43页 |
·昆虫杆状病毒表达系统表达 ORF3 蛋白 | 第40-41页 |
·哺乳动物细胞表达系统表达及纯化 ORF3 蛋白 | 第41-43页 |
·ORF3 在肝细胞中相互作用蛋白的筛选与鉴定 | 第43-55页 |
·酵母双杂交筛选 ORF3 在肝细胞中相互作用蛋白 | 第44-45页 |
·ORF3 候选相互作用蛋白的克隆和表达 | 第45-50页 |
·免疫共沉淀验证 ORF3 可以和 Hepsin 相互作用 | 第50-52页 |
·Co-IP 结合 LC/MS 筛选与鉴定 ORF3 在肝细胞中相互作用的蛋白 | 第52-55页 |
第四章 总结与讨论 | 第55-60页 |
·全文结论 | 第55-56页 |
·讨论 | 第56-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
致谢 | 第65-67页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第67页 |