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戊型肝炎病毒ORF3的表达及其相互作用蛋白的筛选和鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略词表第7-8页
目录第8-10页
第一章 绪论第10-17页
   ·戊型肝炎病毒研究研究进展第10-15页
     ·戊型肝炎的发现与爆发第11页
     ·戊型肝炎病毒分子流行病学第11-13页
     ·戊型肝炎病毒细胞培养模型第13页
     ·戊型肝炎病毒结构第13-14页
     ·戊型肝炎病毒疫苗第14-15页
     ·戊型肝炎病毒受体第15页
   ·本课题的研究内容及研究意义第15-17页
第二章 材料和方法第17-30页
   ·菌株第17页
   ·载体质粒第17-18页
   ·主要仪器及设备第18-19页
   ·试剂及其配制第19-21页
   ·本研究克隆所用引物及其序列第21-22页
   ·实验方法第22-30页
     ·PCR 扩增目标片段第22-23页
     ·限制性内切酶切割第23-24页
     ·琼脂糖凝胶 DNA 回收第24-25页
     ·连接酶连接及同源重组法克隆第25页
     ·转化感受态细胞第25-26页
     ·小规模质粒提取第26-27页
     ·昆虫细胞培养及运用重组杆状病毒侵染昆虫细胞表达目的蛋白第27-28页
     ·哺乳动物细胞培养及转染第28页
     ·哺乳动物细胞裂解及免疫沉淀第28-29页
     ·免疫印迹检测第29页
     ·银染及液相色谱-质谱联用第29-30页
第三章 戊型肝炎病毒 ORF3 的真核表达及其相互作用蛋白的筛选和鉴定第30-55页
   ·前言第30页
   ·戊型肝炎病毒 ORF3 的生物信息学分析第30-40页
     ·戊型肝炎病毒 ORF3 氨基酸序列比对第30-32页
     ·戊型肝炎病毒 ORF3 二级结构预测第32-34页
     ·戊型肝炎病毒 ORF3 折叠倾向性预测第34-36页
     ·戊型肝炎病毒 ORF3 磷酸化位点的预测第36-38页
     ·戊型肝炎病毒 ORF3 三级结构预测及分析第38-40页
   ·戊型肝炎病毒 ORF3 的真核表达第40-43页
     ·昆虫杆状病毒表达系统表达 ORF3 蛋白第40-41页
     ·哺乳动物细胞表达系统表达及纯化 ORF3 蛋白第41-43页
   ·ORF3 在肝细胞中相互作用蛋白的筛选与鉴定第43-55页
     ·酵母双杂交筛选 ORF3 在肝细胞中相互作用蛋白第44-45页
     ·ORF3 候选相互作用蛋白的克隆和表达第45-50页
     ·免疫共沉淀验证 ORF3 可以和 Hepsin 相互作用第50-52页
     ·Co-IP 结合 LC/MS 筛选与鉴定 ORF3 在肝细胞中相互作用的蛋白第52-55页
第四章 总结与讨论第55-60页
   ·全文结论第55-56页
   ·讨论第56-60页
参考文献第60-65页
致谢第65-67页
攻读学位期间发表的学术论文第67页

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