| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略符号对照表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1. 小牛皱胃酶在干酪加工中的作用机理 | 第12-15页 |
| 1.1.1 小牛皱胃酶 | 第12-13页 |
| 1.1.2 Chymosin的凝乳机理 | 第13-14页 |
| 1.1.3 小牛皱胃酶在干酪成熟中的作用 | 第14-15页 |
| 1.2 小牛皱胃酶替代物研究 | 第15-22页 |
| 1.2.1 动物来源凝乳酶 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物来源凝乳酶 | 第16-19页 |
| 1.2.3 基因重组凝乳酶 | 第19-20页 |
| 1.2.4 微生物凝乳酶 | 第20-22页 |
| 1.3 凝乳酶重要评价指标和测定方法 | 第22-25页 |
| 1.3.1 凝乳酶活力测定方法 | 第22-23页 |
| 1.3.2 蛋白酶水解活力测定方法 | 第23-25页 |
| 1.3.3 热稳定性 | 第25页 |
| 1.4 微生物凝乳酶在干酪应用中的研究 | 第25-29页 |
| 1.4.1 微生物凝乳酶对干酪组成、理化指标和得率的影响 | 第26-27页 |
| 1.4.2 微生物凝乳酶对干酪成熟过程的影响 | 第27-28页 |
| 1.4.3 微生物凝乳酶对干酪质构和风味的影响 | 第28-29页 |
| 1.5 本论文研究主要内容 | 第29-31页 |
| 1.5.1 立题依据和研究意义 | 第29页 |
| 1.5.2 本论文主要研究内容 | 第29-31页 |
| 第二章 Paenibacillus spp. BD3526的筛选及其鉴定 | 第31-43页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 材料与方法 | 第31-32页 |
| 2.2.1 主要材料 | 第31页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第31-32页 |
| 2.2.3 主要仪器和设备 | 第32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-34页 |
| 2.3.1 产凝乳酶微生物的筛选 | 第32页 |
| 2.3.2 凝乳酶活力的测定 | 第32页 |
| 2.3.3 蛋白酶水解活力的测定 | 第32-33页 |
| 2.3.4 BD3526凝乳酶与商业化凝乳酶的比较 | 第33页 |
| 2.3.5 菌种鉴定 | 第33-34页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第34-41页 |
| 2.4.1 产凝乳酶菌株BD3526的筛选 | 第34-35页 |
| 2.4.2 BD3526发酵上清凝乳酶活力和蛋白酶活力 | 第35页 |
| 2.4.3 BD3526凝乳酶与商业化凝乳酶的比较 | 第35-37页 |
| 2.4.4 菌株鉴定 | 第37-41页 |
| 2.5 本章小结 | 第41-43页 |
| 第三章 Paenibacillus spp. BD3526产酶条件优化 | 第43-56页 |
| 3.1 前言 | 第43页 |
| 3.2 材料与方法 | 第43页 |
| 3.2.1 主要材料 | 第43页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第43页 |
| 3.2.3 主要仪器和设备 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.3.1 蛋白含量的测定方法 | 第43页 |
| 3.3.2 总糖和还原糖的测定方法 | 第43-44页 |
| 3.3.3 小麦麸皮含量和培养时间对发酵上清酶活的影响 | 第44页 |
| 3.3.4 碳源和氮源对发酵上清酶活的影响 | 第44页 |
| 3.3.5 摇床转数对发酵上清酶活的影响 | 第44页 |
| 3.3.6 装液量对发酵上清酶活的影响 | 第44页 |
| 3.3.7 接种量对发酵上清酶活的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.8 培养温度对发酵上清酶活的影响 | 第45页 |
| 3.3.9 培养基初始pH对发酵上清酶活的影响 | 第45页 |
| 3.3.10 H2O2浓度对发酵上清酶活的影响 | 第45页 |
| 3.3.11 BD3526发酵罐产酶条件优化 | 第45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-55页 |
| 3.4.1 小麦麸皮含量和培养时间对发酵上清酶活的影响 | 第45-47页 |
| 3.4.2 碳源对发酵上清酶活的影响 | 第47页 |
| 3.4.3 氮源对发酵上清酶活的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.4 摇床转数对发酵上清酶活的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.5 装液量对发酵上清酶活的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.6 接种量对发酵上清酶活的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.7 培养温度对发酵上清酶活的影响 | 第51页 |
| 3.4.8 培养基初始pH对发酵上清酶活的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.9 H_2O_2浓度对发酵上清酶活的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.10 BD3526发酵罐产酶条件优化 | 第53-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 第四章 Paenibacillus spp. BD3526凝乳酶的纯化与酶学特性研究 | 第56-79页 |
| 4.1 前言 | 第56页 |
| 4.2 材料与方法 | 第56-57页 |
| 4.2.1 主要材料 | 第56页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第56页 |
| 4.2.3 主要仪器和设备 | 第56-57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-60页 |
| 4.3.1 粗酶制备 | 第57页 |
| 4.3.2 酶的分离纯化 | 第57页 |
| 4.3.3 SDS-PAGE和Native-PAGE电泳 | 第57-58页 |
| 4.3.4 亲水高效液相色谱 | 第58页 |
| 4.3.5 不同蛋白酶抑制剂对BD3526凝乳酶的影响 | 第58页 |
| 4.3.6 金属离子对BD3526凝乳酶的影响 | 第58页 |
| 4.3.7 失活动力学及保护方法 | 第58-59页 |
| 4.3.8 最适温度 | 第59页 |
| 4.3.9 脱脂乳pH和Ca2+浓度对酶活影响 | 第59页 |
| 4.3.10 热稳定性 | 第59页 |
| 4.3.11 pH稳定性 | 第59页 |
| 4.3.12 BD3526凝乳酶水解酪蛋白酶促反应动力学 | 第59页 |
| 4.3.13 BD3526凝乳酶对 α、β 和 κ-CN的水解特性 | 第59页 |
| 4.3.14 BD3526凝乳酶对酪蛋白的水解位点 | 第59-60页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第60-77页 |
| 4.4.1 粗酶的制备和分离纯化 | 第60-63页 |
| 4.4.2 BD3526凝乳酶的分子量 | 第63-64页 |
| 4.4.3 不同蛋白酶抑制剂对BD3526凝乳酶的影响 | 第64-65页 |
| 4.4.4 金属离子对BD3526凝乳酶的影响 | 第65-66页 |
| 4.4.5 BD3526凝乳酶的失活动力学及保护方法 | 第66-70页 |
| 4.4.6 脱脂乳pH和Ca2+浓度对BD3526凝乳酶的影响 | 第70-71页 |
| 4.4.7 BD3526凝乳酶的最适温度、耐热性和pH稳定性 | 第71-72页 |
| 4.4.8 BD3526凝乳酶水解酪蛋白的动力学方程 | 第72-73页 |
| 4.4.9 BD3526凝乳酶对 α、β 和 κ-CN的水解特性 | 第73-75页 |
| 4.4.10 BD3526凝乳酶对不同酪蛋白的水解位点 | 第75-77页 |
| 4.5 本章小结 | 第77-79页 |
| 第五章 Paenibacillus spp. BD3526凝乳酶的结构特征研究 | 第79-95页 |
| 5.1 前言 | 第79页 |
| 5.2 材料与方法 | 第79页 |
| 5.2.1 主要材料 | 第79页 |
| 5.2.2 主要试剂 | 第79页 |
| 5.2.3 主要仪器和设备 | 第79页 |
| 5.3 实验方法 | 第79-81页 |
| 5.3.1 MALDI-TOF MS/MS二级质谱 | 第79-80页 |
| 5.3.2 BD3526基因组的提取 | 第80页 |
| 5.3.3 BD3526全基因组测序 | 第80页 |
| 5.3.4 BD3526基因组分析及凝乳酶功能基因注释 | 第80页 |
| 5.3.5 BD3526凝乳酶N-端序列 | 第80-81页 |
| 5.3.6 BD3526凝乳酶圆二色谱 | 第81页 |
| 5.3.7 BD3526凝乳酶氨基酸序列分析及三级结构模型构建 | 第81页 |
| 5.3.8 BD3526凝乳酶结构分析 | 第81页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第81-94页 |
| 5.4.1 MALDI-TOF MS/MS | 第81-82页 |
| 5.4.2 BD3526全基因组测序及凝乳酶目的基因 | 第82-85页 |
| 5.4.3 BD3526凝乳酶的N-端氨基酸序列 | 第85-87页 |
| 5.4.4 BD3526凝乳酶的氨基酸序列分析 | 第87-91页 |
| 5.4.5 BD3526凝乳酶圆二色谱 | 第91-92页 |
| 5.4.6 BD3526凝乳酶的三维结构预测 | 第92-94页 |
| 5.5 本章小结 | 第94-95页 |
| 主要结论与展望 | 第95-97页 |
| 主要结论 | 第95页 |
| 展望 | 第95-97页 |
| 论文创新点 | 第97-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-113页 |
| 附录I: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第113-114页 |
| 附录Ⅱ | 第114-126页 |
