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酿酒酵母和解脂耶氏酵母对脂多糖刺激的响应机制研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
第一章 引言第8-14页
   ·脂多糖概述第8-10页
     ·脂多糖的结构第8-9页
     ·脂多糖的功能研究第9-10页
   ·酵母细胞的环境响应机制研究第10-12页
     ·酵母细胞凋亡第11页
     ·酵母细胞自噬第11-12页
   ·酵母细胞的转录组学研究第12页
   ·立题背景和意义第12页
   ·课题研究方案及研究内容第12-14页
第二章 材料与方法第14-27页
   ·实验材料与仪器设备第14-17页
     ·菌株、质粒、引物第14-15页
     ·培养基及培养条件第15页
     ·主要试剂第15-16页
     ·主要仪器设备第16-17页
   ·分子生物学相关操作第17-19页
     ·酵母基因组及质粒 DNA 的提取第17页
     ·PCR 反应第17页
     ·酵母菌株的 18S rDNA 鉴定第17页
     ·酵母细胞的单基因敲除第17-18页
     ·酵母总 RNA 的提取及 cDNA 的合成第18-19页
     ·RT-PCR 分析第19页
   ·脂多糖的提取、纯化与鉴定第19-21页
     ·脂多糖的大量提取第19页
     ·脂多糖的纯化第19-20页
     ·脂多糖的定量方法第20页
     ·脂多糖及其类脂 A 结构的确定第20-21页
   ·建立脂多糖与酵母细胞的共存体系第21-22页
     ·酵母细胞的美蓝着色观察第21页
     ·共存体系中浓度、温度、时间等条件的探索第21页
     ·荧光示踪法观察酵母细胞吸附脂多糖现象第21-22页
   ·酵母细胞活性检测第22-24页
     ·酵母细胞存活率测定第22页
     ·酵母细胞表面疏水性测定第22页
     ·酵母细胞的超微结构观察第22页
     ·酵母细胞凋亡的检测第22-24页
     ·酵母细胞自噬现象观察第24页
   ·酿酒酵母的转录组水平分析第24-27页
     ·建立脂多糖与酿酒酵母细胞的共培养体系第24页
     ·差异表达基因的筛选与功能分析第24-26页
     ·差异基因产物的 PPPI 网络分析第26-27页
第三章 结果与讨论第27-50页
   ·酵母细胞的脂多糖降解特性第27-30页
     ·脂多糖含量降低现象第27-28页
     ·解脂耶氏酵母的脂多糖吸附特性第28-30页
   ·酵母细胞的美蓝着色反应第30-33页
     ·脂多糖胁迫酵母细胞活性降低第30页
     ·脂多糖浓度影响美蓝着色反应第30-31页
     ·美蓝着色现象的非特异性第31-33页
   ·脂多糖刺激酿酒酵母与解脂耶氏酵母产生细胞活性变化第33-35页
     ·脂多糖胁迫不影响酵母细胞的正常生存第33页
     ·脂多糖诱导的酵母细胞超微结构变化第33-35页
   ·脂多糖诱导酿酒酵母与解脂耶氏酵母进行细胞程序性活动第35-38页
     ·脂多糖刺激酿酒酵母细胞产生早期凋亡信号第35-36页
     ·脂多糖刺激酿酒酵母细胞线粒体膜电位增强第36-37页
     ·脂多糖胁迫解脂耶氏酵母产生类细胞凋亡现象第37-38页
   ·脂多糖共培养对酿酒酵母转录水平的影响第38-48页
     ·共培养条件下脂多糖诱导酿酒酵母相关基因的表达第38-39页
     ·脂多糖刺激酿酒酵母转录水平发生显著变化第39-40页
     ·差异表达基因的比较分析第40-43页
     ·差异基因的蛋白相互作用网络分析第43-46页
     ·转录组研究结果的拓展分析第46-48页
   ·脂多糖胁迫下酵母细胞存活原因的探究第48-50页
     ·脂多糖胁迫下酿酒酵母的“细胞防御”机制第48-49页
     ·解脂耶氏酵母的脂多糖吸附特性与细胞防御反应第49-50页
主要结论与展望第50-52页
 主要结论第50-51页
 展望第51-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-57页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第57-58页
附表 1 GO 功能分析所得差异表达基因的相关信息第58-65页
附表 2 不同蛋白相互作用网络中的关键节点第65-68页

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