摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
第一章 引言 | 第8-14页 |
·脂多糖概述 | 第8-10页 |
·脂多糖的结构 | 第8-9页 |
·脂多糖的功能研究 | 第9-10页 |
·酵母细胞的环境响应机制研究 | 第10-12页 |
·酵母细胞凋亡 | 第11页 |
·酵母细胞自噬 | 第11-12页 |
·酵母细胞的转录组学研究 | 第12页 |
·立题背景和意义 | 第12页 |
·课题研究方案及研究内容 | 第12-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-27页 |
·实验材料与仪器设备 | 第14-17页 |
·菌株、质粒、引物 | 第14-15页 |
·培养基及培养条件 | 第15页 |
·主要试剂 | 第15-16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
·分子生物学相关操作 | 第17-19页 |
·酵母基因组及质粒 DNA 的提取 | 第17页 |
·PCR 反应 | 第17页 |
·酵母菌株的 18S rDNA 鉴定 | 第17页 |
·酵母细胞的单基因敲除 | 第17-18页 |
·酵母总 RNA 的提取及 cDNA 的合成 | 第18-19页 |
·RT-PCR 分析 | 第19页 |
·脂多糖的提取、纯化与鉴定 | 第19-21页 |
·脂多糖的大量提取 | 第19页 |
·脂多糖的纯化 | 第19-20页 |
·脂多糖的定量方法 | 第20页 |
·脂多糖及其类脂 A 结构的确定 | 第20-21页 |
·建立脂多糖与酵母细胞的共存体系 | 第21-22页 |
·酵母细胞的美蓝着色观察 | 第21页 |
·共存体系中浓度、温度、时间等条件的探索 | 第21页 |
·荧光示踪法观察酵母细胞吸附脂多糖现象 | 第21-22页 |
·酵母细胞活性检测 | 第22-24页 |
·酵母细胞存活率测定 | 第22页 |
·酵母细胞表面疏水性测定 | 第22页 |
·酵母细胞的超微结构观察 | 第22页 |
·酵母细胞凋亡的检测 | 第22-24页 |
·酵母细胞自噬现象观察 | 第24页 |
·酿酒酵母的转录组水平分析 | 第24-27页 |
·建立脂多糖与酿酒酵母细胞的共培养体系 | 第24页 |
·差异表达基因的筛选与功能分析 | 第24-26页 |
·差异基因产物的 PPPI 网络分析 | 第26-27页 |
第三章 结果与讨论 | 第27-50页 |
·酵母细胞的脂多糖降解特性 | 第27-30页 |
·脂多糖含量降低现象 | 第27-28页 |
·解脂耶氏酵母的脂多糖吸附特性 | 第28-30页 |
·酵母细胞的美蓝着色反应 | 第30-33页 |
·脂多糖胁迫酵母细胞活性降低 | 第30页 |
·脂多糖浓度影响美蓝着色反应 | 第30-31页 |
·美蓝着色现象的非特异性 | 第31-33页 |
·脂多糖刺激酿酒酵母与解脂耶氏酵母产生细胞活性变化 | 第33-35页 |
·脂多糖胁迫不影响酵母细胞的正常生存 | 第33页 |
·脂多糖诱导的酵母细胞超微结构变化 | 第33-35页 |
·脂多糖诱导酿酒酵母与解脂耶氏酵母进行细胞程序性活动 | 第35-38页 |
·脂多糖刺激酿酒酵母细胞产生早期凋亡信号 | 第35-36页 |
·脂多糖刺激酿酒酵母细胞线粒体膜电位增强 | 第36-37页 |
·脂多糖胁迫解脂耶氏酵母产生类细胞凋亡现象 | 第37-38页 |
·脂多糖共培养对酿酒酵母转录水平的影响 | 第38-48页 |
·共培养条件下脂多糖诱导酿酒酵母相关基因的表达 | 第38-39页 |
·脂多糖刺激酿酒酵母转录水平发生显著变化 | 第39-40页 |
·差异表达基因的比较分析 | 第40-43页 |
·差异基因的蛋白相互作用网络分析 | 第43-46页 |
·转录组研究结果的拓展分析 | 第46-48页 |
·脂多糖胁迫下酵母细胞存活原因的探究 | 第48-50页 |
·脂多糖胁迫下酿酒酵母的“细胞防御”机制 | 第48-49页 |
·解脂耶氏酵母的脂多糖吸附特性与细胞防御反应 | 第49-50页 |
主要结论与展望 | 第50-52页 |
主要结论 | 第50-51页 |
展望 | 第51-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57-58页 |
附表 1 GO 功能分析所得差异表达基因的相关信息 | 第58-65页 |
附表 2 不同蛋白相互作用网络中的关键节点 | 第65-68页 |