| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-16页 |
| ·引言 | 第9页 |
| ·辅因子工程——代谢工程的一个重要分支 | 第9-12页 |
| ·概述 | 第9-10页 |
| ·CoA 是重要的辅因子 | 第10-11页 |
| ·调控微生物胞内CoA 库的策略及应用 | 第11-12页 |
| ·α-酮戊二酸 | 第12-14页 |
| ·α-酮戊二酸的用途 | 第12-13页 |
| ·发酵法生产α-酮戊二酸 | 第13-14页 |
| ·立题意义及研究的主要内容 | 第14-16页 |
| ·光滑球拟酵母发酵生产α-酮戊二酸时存在的问题 | 第14页 |
| ·本论文的主要研究内容 | 第14-15页 |
| ·本论文中所用到的符号说明 | 第15-16页 |
| 第二章 维生素对光滑球拟酵母胞内CoA 库的调节以及对碳代谢流的影响 | 第16-25页 |
| ·前言 | 第16-17页 |
| ·材料与方法 | 第17-18页 |
| ·菌种与材料 | 第17页 |
| ·培养基 | 第17页 |
| ·培养方法 | 第17页 |
| ·分析方法 | 第17-18页 |
| ·结果与讨论 | 第18-24页 |
| ·乙酸为唯一碳源时乙酸钠浓度对T. GLABRATACOA 库和α-KG 积累的影响 | 第18-20页 |
| ·添加乙酸钠对T. GLABRATACOA 库和α-KG 积累的影响 | 第20-21页 |
| ·V81 浓度对T. GLABRATACOA 库和α-KG 积累的影响 | 第21-22页 |
| ·ACETYL-COA 库对碳代谢流流速度及分布的影响 | 第22-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第三章 过量表达AC52 提高T. glabrata 胞内acetyl-CoA 水平促进α-KG 合成 | 第25-33页 |
| ·前言 | 第25-26页 |
| ·材料与方法 | 第26-28页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·培养基 | 第26页 |
| ·培养条件 | 第26页 |
| ·DNA 操作 | 第26-27页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第27页 |
| ·尿嘧啶缺陷型菌株的构建 | 第27页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第27页 |
| ·T. glabrata 过量表达AC52 工程菌的构建 | 第27页 |
| ·分析与测定 | 第27-28页 |
| ·结果和讨论 | 第28-31页 |
| ·目的基因AC52 扩增与表达质粒的构建 | 第28页 |
| ·过量表达AC52 的T. glabrata 重组菌的筛选 | 第28-29页 |
| ·过量表达AC52 促进T. glabrata 好氧生长性能 | 第29-30页 |
| ·增加acetyl-CoA 含量促进α-酮戊二酸合成 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31-33页 |
| 第四章 过量表达PDC1 提高T. GLABRATA 胞内ACETYL-COA 水平促进α-酮戊二酸合成 | 第33-40页 |
| ·前言 | 第33-34页 |
| ·材料与方法 | 第34-35页 |
| ·菌株和质粒 | 第34页 |
| ·DNA 操作 | 第34页 |
| ·目的片段的PCR 扩增 | 第34页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第34页 |
| ·T. glabrata 过量表达PDC1 工程菌的构建 | 第34页 |
| ·分析与测定 | 第34页 |
| ·胞内PDC1 酶活力的测定 | 第34-35页 |
| ·结果和讨论 | 第35-39页 |
| ·目的基因PDC1 扩增与表达质粒的构建 | 第35页 |
| ·过量表达PDC1 的T. glabrata 重组菌的筛选 | 第35-36页 |
| ·过量表达PDC1 的T. glabrata 重组菌的发酵特性 | 第36-38页 |
| ·T. glabrata PDC1-1 利用丙酮酸提高acetyl-CoA 含量促进α-KG 的合成 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 结论与展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-48页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48页 |
