| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 膀胱癌概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 膀胱癌的发病因素 | 第13-14页 |
| 1.1.2 膀胱癌的诊断与治疗 | 第14页 |
| 1.2 膳食黄酮的概述 | 第14-16页 |
| 1.3 细胞凋亡机制概述 | 第16-19页 |
| 1.3.1 内源性线粒体途径 | 第16-17页 |
| 1.3.2 内质网介导凋亡途径 | 第17页 |
| 1.3.3 外源性死亡受体途径 | 第17-18页 |
| 1.3.4 细胞周期阻滞诱导凋亡 | 第18-19页 |
| 1.4 细胞信号转导通路概述 | 第19-20页 |
| 1.4.1 p53通路调控细胞凋亡和周期 | 第19页 |
| 1.4.2 MAPKs通路调控细胞凋亡和周期 | 第19-20页 |
| 1.4.3 PI3K/AKT信号通路调节细胞凋亡和周期 | 第20页 |
| 1.5 代谢组学概述 | 第20-23页 |
| 1.5.1 代谢组学分析流程 | 第20-22页 |
| 1.5.2 AMPK通路对代谢的调控 | 第22-23页 |
| 1.5.3 代谢组学在肿瘤中的应用 | 第23页 |
| 1.6 本课题的研究意义和研究内容 | 第23-25页 |
| 1.6.1 本课题研究意义 | 第23-24页 |
| 1.6.2 本课题研究内容 | 第24-25页 |
| 第二章 ISO抑制膀胱癌细胞增殖活性初探 | 第25-36页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第25-27页 |
| 2.2.1 材料及试剂 | 第25-26页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-30页 |
| 2.3.1 溶液的配制 | 第27-28页 |
| 2.3.2 ISO对SOD、GPx抗氧化物酶活性影响的测定 | 第28页 |
| 2.3.3 ISO在不同环境下稳定性评价 | 第28页 |
| 2.3.4 细胞的培养 | 第28-29页 |
| 2.3.5 MTT测定细胞存活率 | 第29页 |
| 2.3.6 细胞划痕实验检测方法 | 第29-30页 |
| 2.4 实验结果和讨论 | 第30-35页 |
| 2.4.1 ISO对抗氧化物酶SOD和GPx活性的影响 | 第30-32页 |
| 2.4.2 ISO在不同pH的PBS和尿液中的稳定性评价 | 第32-33页 |
| 2.4.3 ISO对膀胱癌细胞EJ和T24以及SV-HUC-1 细胞生长的影响 | 第33-34页 |
| 2.4.4 ISO对膀胱癌细胞EJ和T24的迁移抑制作用 | 第34-35页 |
| 2.5 本章小结 | 第35-36页 |
| 第三章 ISO抑制人体膀胱癌细胞增殖相关蛋白表达水平 | 第36-55页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第36-38页 |
| 3.2.1 材料及试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第37-38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-43页 |
| 3.3.1 溶液的配制 | 第38-39页 |
| 3.3.2 流式细胞术分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 Western blotting检测细胞相关蛋白表达水平 | 第40-42页 |
| 3.3.3.1 蛋白样品的制备 | 第40页 |
| 3.3.3.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第40-41页 |
| 3.3.3.3 转膜 | 第41页 |
| 3.3.3.4 抗体孵育 | 第41-42页 |
| 3.3.3.5 显色反应 | 第42页 |
| 3.3.4 细胞内ROS的检测 | 第42-43页 |
| 3.3.4.1 ROS含量的检测 | 第42页 |
| 3.3.4.2 荧光显微镜观察 | 第42-43页 |
| 3.4 实验结果和讨论 | 第43-53页 |
| 3.4.1 ISO对膀胱癌细胞EJ和T24的细胞周期分布的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.2 ISO通过调控Caspase家族蛋白诱导T24细胞凋亡 | 第44-46页 |
| 3.4.3 ISO诱导线粒体途径相关蛋白表达情况 | 第46-47页 |
| 3.4.4 ISO引起DNA损伤介导的p53磷酸化相关因子表达 | 第47-49页 |
| 3.4.5 ISO引起T24细胞G2/M期阻滞相关因子调控 | 第49-51页 |
| 3.4.6 ISO对T24细胞内ROS产生的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.7 ISO诱导T24细胞发生凋亡和G2/M期阻滞涉及的信号通路图 | 第52-53页 |
| 3.5 本章小结 | 第53-55页 |
| 第四章 代谢组学分析ISO抑制T24细胞增殖的分子机制 | 第55-68页 |
| 4.1 引言 | 第55页 |
| 4.2 实验试剂与设备 | 第55-57页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第55-56页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第56-57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-58页 |
| 4.3.1 细胞样品处理 | 第57页 |
| 4.3.2 色谱条件 | 第57页 |
| 4.3.3 质谱检测条件 | 第57-58页 |
| 4.3.4 数据预处理 | 第58页 |
| 4.4 实验结果 | 第58-66页 |
| 4.4.1 ISO抑制T24细胞增殖的代谢组学分析 | 第58-62页 |
| 4.4.2 ISO通过AMPK通路调节细胞代谢 | 第62-65页 |
| 4.4.3 AMPK信号通路对ISO诱导的T24细胞代谢调节的流程图 | 第65-66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 结论与展望 | 第68-70页 |
| 一、结论 | 第68-69页 |
| 二、本课题主要创新点 | 第69页 |
| 三、展望 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 附件 | 第83页 |
