摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-22页 |
1.1 CIT概况 | 第13-16页 |
1.1.1 CIT的理化性质 | 第13-14页 |
1.1.2 CIT的来源 | 第14-16页 |
1.2 控制CIT的传统方法 | 第16-18页 |
1.2.1 改变物理环境 | 第16页 |
1.2.2 添加外源化学物质 | 第16-17页 |
1.2.3 传统方法的缺陷 | 第17-18页 |
1.3 生物方法控制CIT | 第18-20页 |
1.3.1 控制产毒途径 | 第18-19页 |
1.3.2 生物拮抗作用 | 第19-20页 |
1.3.3 微生物脱毒 | 第20页 |
1.4 本课题立题的目的与意义 | 第20-22页 |
第二章 CIT降解菌的筛选与鉴定 | 第22-31页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 材料与方法 | 第22-25页 |
2.2.1 主要仪器 | 第22页 |
2.2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.2.3 菌种来源 | 第23页 |
2.2.4 培养基 | 第23页 |
2.2.5 酵母菌的分离筛选 | 第23页 |
2.2.6 分子生物学鉴定 | 第23-24页 |
2.2.7 高效液相检测条件 | 第24页 |
2.2.8 高效液相色谱法定量分析CIT | 第24-25页 |
2.2.9 急性动物试验 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-30页 |
2.3.1 酵母菌的分离、筛选和Y3菌株形态学鉴定 | 第25-26页 |
2.3.2 分子生物学鉴定 | 第26-27页 |
2.3.3 CIT的标准曲线 | 第27-28页 |
2.3.4 降解CIT酵母菌株的筛选 | 第28-29页 |
2.3.5 急性动物试验 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-31页 |
第三章 C. podzolicus Y3降解CIT的特性研究 | 第31-38页 |
3.1 引言 | 第31页 |
3.2 材料和方法 | 第31-33页 |
3.2.1 主要仪器 | 第31页 |
3.2.2 实验试剂 | 第31页 |
3.2.3 培养基 | 第31页 |
3.2.4 酵母菌悬液的制备 | 第31-32页 |
3.2.5 CIT检测条件 | 第32页 |
3.2.6 C. podzolicus Y3细胞浓度对CIT降解效果的影响 | 第32页 |
3.2.7 温度对CIT降解效果的影响 | 第32页 |
3.2.8 pH对CIT降解效果的影响 | 第32页 |
3.2.9 不同CIT初始浓度对其的降解效果 | 第32页 |
3.2.10 培养基对CIT降解效果的影响 | 第32-33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-36页 |
3.3.1 C. podzolicus Y3酵母浓度对CIT降解效果的影响 | 第33页 |
3.3.2 温度对CIT降解效果的影响 | 第33-34页 |
3.3.3 pH对CIT降解效果的影响 | 第34-35页 |
3.3.4 不同CIT初始浓度对降解效果的影响 | 第35-36页 |
3.3.5 不同培养基下的降解效果 | 第36页 |
3.4 讨论 | 第36-38页 |
第四章 C. podzolicus Y3降解CIT的机制和产物的安全性研究 | 第38-47页 |
4.1 引言 | 第38页 |
4.2 材料和方法 | 第38-41页 |
4.2.1 主要仪器 | 第38页 |
4.2.2 实验试剂 | 第38页 |
4.2.3 CIT的测定 | 第38-39页 |
4.2.4 C. podzolicus Y3酵母细胞壁对CIT的吸附作用 | 第39页 |
4.2.5 C. podzolicus Y3酵母对CIT的吸收作用 | 第39页 |
4.2.6 C. podzolicus Y3酵母细胞代谢物对CIT的降解作用 | 第39页 |
4.2.7 CIT诱导后C. podzolicus Y3酵母代谢物对CIT的降解作用 | 第39-40页 |
4.2.8 HepG2细胞在含有不同浓度CIT中的生长状态 | 第40页 |
4.2.9 MTT法检测CIT降解产物对HepG2细胞活性的影响 | 第40-41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-46页 |
4.3.1 C. podzolicus Y3酵母细胞壁对CIT的吸附作用 | 第41-42页 |
4.3.2 C. podzolicus Y3酵母对CIT的吸收作用 | 第42页 |
4.3.3 C. podzolicus Y3胞外代谢物对CIT的降解作用 | 第42-43页 |
4.3.4 CIT刺激后C. podzolicus Y3酵母外代谢物对CIT的降解作用 | 第43-44页 |
4.3.5 降解产物细胞MTT检验 | 第44-46页 |
4.4 讨论 | 第46-47页 |
第五章 C. podzolicus Y3降解CIT的蛋白质组学研究 | 第47-56页 |
5.1 引言 | 第47页 |
5.2 材料和方法 | 第47-51页 |
5.2.1 主要仪器 | 第47页 |
5.2.2 化学试剂 | 第47-48页 |
5.2.3 C. podzolicus Y3酵母培养 | 第48页 |
5.2.4 总蛋白的提取 | 第48页 |
5.2.5 双向电泳 | 第48-50页 |
5.2.6 凝胶图谱分析 | 第50页 |
5.2.7 质谱实验操作流程 | 第50页 |
5.2.8 蛋白鉴定 | 第50-51页 |
5.2.9 GO分析 | 第51页 |
5.3 结果与分析 | 第51-54页 |
5.3.1 C. podzolicus Y3酵母蛋白双向电泳图 | 第51-52页 |
5.3.2 C. podzolicus Y3酵母差异蛋白点鉴定结果 | 第52-54页 |
5.3.3 差异蛋白质的GO分析 | 第54页 |
5.4 讨论 | 第54-56页 |
第六章 转录组分析C. podzolicus Y3对CIT的应答 | 第56-70页 |
6.1 引言 | 第56页 |
6.2 材料和方法 | 第56-59页 |
6.2.1 主要仪器 | 第56页 |
6.2.2 化学试剂 | 第56页 |
6.2.3 C. podzolicus Y3酵母菌样品总RNA的提取 | 第56-57页 |
6.2.4 C. podzolicus Y3酵母菌样品总RNA的浓度和纯度检测 | 第57页 |
6.2.5 C. podzolicus Y3酵母菌转录组测序及生物信息学分析 | 第57-58页 |
6.2.6 RT-qPCR验证差异表达基因 | 第58-59页 |
6.2.7 数据处理与分析 | 第59页 |
6.3 结果与分析 | 第59-63页 |
6.3.1 总RNA质量检测 | 第59-61页 |
6.3.2 差异表达基因的COG富集分析 | 第61-62页 |
6.3.3 差异表达基因的GO分类 | 第62页 |
6.3.4 DEGs的KEGG分类 | 第62-63页 |
6.4 RT-qPCR验证 | 第63-67页 |
6.4.1 特异性引物设计验证 | 第63-66页 |
6.4.2 RT-qPCR结果分析 | 第66-67页 |
6.5 讨论 | 第67-70页 |
第七章 总结与展望 | 第70-72页 |
7.1 结论 | 第70页 |
7.2 展望 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
攻读硕士期间发表论文 | 第80页 |