摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
引言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-17页 |
1.1 纤维素简介 | 第10页 |
1.2 纤维素酶简介 | 第10-14页 |
1.2.1 纤维素酶的来源 | 第10-11页 |
1.2.2 纤维素酶的组分 | 第11-12页 |
1.2.3 纤维素酶的分子结构 | 第12页 |
1.2.4 纤维素酶的应用 | 第12-14页 |
1.3 文蛤的营养与药用价值 | 第14-15页 |
1.4 立题的依据、意义和内容 | 第15-17页 |
1.4.1 立题的依据及意义 | 第15-16页 |
1.4.2 研究内容 | 第16-17页 |
第二章 文蛤纤维素酶的分离纯化 | 第17-33页 |
2.1 材料与仪器 | 第17-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-25页 |
2.2.1 文蛤纤维素酶粗酶液的制备 | 第19页 |
2.2.2 粗酶液中蛋白质含量的测定 | 第19-20页 |
2.2.3 还原糖与DNS反应产物的最大吸收波长确定 | 第20页 |
2.2.4 葡萄糖标准曲线的制作 | 第20页 |
2.2.5 粗酶液中纤维素酶各组分酶活的研究 | 第20-21页 |
2.2.6 硫酸铵分级沉淀 | 第21页 |
2.2.7 透析除盐 | 第21-22页 |
2.2.8 DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析 | 第22页 |
2.2.9 苯基低取代疏水层析 | 第22页 |
2.2.10 SDS-凝胶电泳 | 第22-25页 |
2.2.11 酶分子量的测定 | 第25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-32页 |
2.3.1 粗酶液中的蛋白质浓度 | 第25-26页 |
2.3.2 DNS与还原糖反应产物的最大吸收波长的确定 | 第26-27页 |
2.3.3 葡萄糖标准曲线 | 第27页 |
2.3.4 粗酶液中的纤维素酶活力 | 第27-28页 |
2.3.5 硫酸铵的分级沉淀结果 | 第28页 |
2.3.6 DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换层析结果 | 第28-29页 |
2.3.7 苯基低取代疏水层析结果 | 第29-30页 |
2.3.8 酶的纯度鉴定 | 第30页 |
2.3.9 酶的纯化结果分析 | 第30-31页 |
2.3.10 全酶分子量及亚基数的确定 | 第31-32页 |
2.4 小结 | 第32-33页 |
第三章 文蛤内切型纤维素酶性质研究 | 第33-46页 |
3.1 材料与仪器 | 第33-34页 |
3.2 实验方法 | 第34-36页 |
3.2.1 酶的最适反应pH及酶的pH稳定性 | 第34-35页 |
3.2.2 酶的最适反应温度和酶的热稳定性 | 第35页 |
3.2.3 卤素离子对文蛤内切纤维素酶的影响 | 第35页 |
3.2.4 金属离子对文蛤内切纤维素酶的影响及动力学研究 | 第35页 |
3.2.5 有机试剂对文蛤纤维素酶的影响 | 第35-36页 |
3.3 结果与讨论 | 第36-45页 |
3.3.1 纯化后内切纤维素酶的最适pH和pH稳定性 | 第36-37页 |
3.3.2 纯化后内切纤维素酶的最适反应温度和温度稳定性 | 第37-38页 |
3.3.3 卤素离子对文蛤内切纤维素酶活力的影响 | 第38-39页 |
3.3.4 金属离子对文蛤内切纤维素酶活力的影响 | 第39-44页 |
3.3.5 有机试剂对文蛤纤维素酶活力的影响 | 第44-45页 |
3.4 小结 | 第45-46页 |
第四章 文蛤内切纤维素酶的化学修饰及动力学研究 | 第46-57页 |
4.1 材料与仪器 | 第46-47页 |
4.2 实验方法 | 第47-48页 |
4.2.1 酶催化反应动力学性质研究 | 第47页 |
4.2.2 纤维素酶的化学修饰及动力学研究 | 第47-48页 |
4.3 结果与讨论 | 第48-56页 |
4.3.1 酶催化反应动力学性质研究 | 第48-49页 |
4.3.2 DTT对酶的化学修饰 | 第49-50页 |
4.3.3 pCMB对酶的化学修饰 | 第50页 |
4.3.4 乙酰丙酮对酶的化学修饰 | 第50-51页 |
4.3.5 PMSF对酶的化学修饰 | 第51-52页 |
4.3.6 溴乙酸对纤维素酶的化学修饰及动力学研究 | 第52-54页 |
4.3.7 醋酸酐对酶的化学修饰及动力学研究 | 第54-56页 |
4.4 小结 | 第56-57页 |
主要结论 | 第57-58页 |
待解决的问题 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63页 |