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文蛤纤维素酶的分离纯化及性质研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
引言第9-10页
第一章 文献综述第10-17页
    1.1 纤维素简介第10页
    1.2 纤维素酶简介第10-14页
        1.2.1 纤维素酶的来源第10-11页
        1.2.2 纤维素酶的组分第11-12页
        1.2.3 纤维素酶的分子结构第12页
        1.2.4 纤维素酶的应用第12-14页
    1.3 文蛤的营养与药用价值第14-15页
    1.4 立题的依据、意义和内容第15-17页
        1.4.1 立题的依据及意义第15-16页
        1.4.2 研究内容第16-17页
第二章 文蛤纤维素酶的分离纯化第17-33页
    2.1 材料与仪器第17-19页
    2.2 实验方法第19-25页
        2.2.1 文蛤纤维素酶粗酶液的制备第19页
        2.2.2 粗酶液中蛋白质含量的测定第19-20页
        2.2.3 还原糖与DNS反应产物的最大吸收波长确定第20页
        2.2.4 葡萄糖标准曲线的制作第20页
        2.2.5 粗酶液中纤维素酶各组分酶活的研究第20-21页
        2.2.6 硫酸铵分级沉淀第21页
        2.2.7 透析除盐第21-22页
        2.2.8 DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析第22页
        2.2.9 苯基低取代疏水层析第22页
        2.2.10 SDS-凝胶电泳第22-25页
        2.2.11 酶分子量的测定第25页
    2.3 结果与讨论第25-32页
        2.3.1 粗酶液中的蛋白质浓度第25-26页
        2.3.2 DNS与还原糖反应产物的最大吸收波长的确定第26-27页
        2.3.3 葡萄糖标准曲线第27页
        2.3.4 粗酶液中的纤维素酶活力第27-28页
        2.3.5 硫酸铵的分级沉淀结果第28页
        2.3.6 DEAE Sepharose Fast Flow 离子交换层析结果第28-29页
        2.3.7 苯基低取代疏水层析结果第29-30页
        2.3.8 酶的纯度鉴定第30页
        2.3.9 酶的纯化结果分析第30-31页
        2.3.10 全酶分子量及亚基数的确定第31-32页
    2.4 小结第32-33页
第三章 文蛤内切型纤维素酶性质研究第33-46页
    3.1 材料与仪器第33-34页
    3.2 实验方法第34-36页
        3.2.1 酶的最适反应pH及酶的pH稳定性第34-35页
        3.2.2 酶的最适反应温度和酶的热稳定性第35页
        3.2.3 卤素离子对文蛤内切纤维素酶的影响第35页
        3.2.4 金属离子对文蛤内切纤维素酶的影响及动力学研究第35页
        3.2.5 有机试剂对文蛤纤维素酶的影响第35-36页
    3.3 结果与讨论第36-45页
        3.3.1 纯化后内切纤维素酶的最适pH和pH稳定性第36-37页
        3.3.2 纯化后内切纤维素酶的最适反应温度和温度稳定性第37-38页
        3.3.3 卤素离子对文蛤内切纤维素酶活力的影响第38-39页
        3.3.4 金属离子对文蛤内切纤维素酶活力的影响第39-44页
        3.3.5 有机试剂对文蛤纤维素酶活力的影响第44-45页
    3.4 小结第45-46页
第四章 文蛤内切纤维素酶的化学修饰及动力学研究第46-57页
    4.1 材料与仪器第46-47页
    4.2 实验方法第47-48页
        4.2.1 酶催化反应动力学性质研究第47页
        4.2.2 纤维素酶的化学修饰及动力学研究第47-48页
    4.3 结果与讨论第48-56页
        4.3.1 酶催化反应动力学性质研究第48-49页
        4.3.2 DTT对酶的化学修饰第49-50页
        4.3.3 pCMB对酶的化学修饰第50页
        4.3.4 乙酰丙酮对酶的化学修饰第50-51页
        4.3.5 PMSF对酶的化学修饰第51-52页
        4.3.6 溴乙酸对纤维素酶的化学修饰及动力学研究第52-54页
        4.3.7 醋酸酐对酶的化学修饰及动力学研究第54-56页
    4.4 小结第56-57页
主要结论第57-58页
待解决的问题第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63页

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