| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-17页 |
| ·苯丙素类化合物概述 | 第7-8页 |
| ·利用大肠杆菌生产苯丙素类化合物的可行性及限制因素 | 第8-10页 |
| ·苯丙素类化合物合成途径 | 第8-9页 |
| ·苯丙素类化合物在大肠杆菌中生产面临的问题 | 第9-10页 |
| ·膜蛋白质组学 | 第10-15页 |
| ·蛋白质组学简介 | 第10-11页 |
| ·蛋白质组学的主要研究技术及技术路线 | 第11-14页 |
| ·蛋白质组学在大肠杆菌中的应用 | 第14-15页 |
| ·立题意义 | 第15页 |
| ·主要研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-31页 |
| ·实验仪器设备与主要试剂 | 第17-18页 |
| ·实验所用主要仪器 | 第17页 |
| ·实验所用主要试剂 | 第17-18页 |
| ·菌种和质粒 | 第18页 |
| ·培养方法 | 第18-19页 |
| ·培养基 | 第18页 |
| ·不同实验中 E. coli BL21 (DE3)的培养 | 第18-19页 |
| ·蛋白质组学实验方法 | 第19-25页 |
| ·双向电泳实验 | 第19-22页 |
| ·胶内酶解和质谱鉴定 | 第22-23页 |
| ·鉴定蛋白基因的定量 PCR 验证 | 第23-25页 |
| ·分子生物学实验方法 | 第25-31页 |
| ·表达载体及基因过量表达菌株的构建 | 第25-27页 |
| ·表达载体及基因抑制菌株的构建 | 第27-28页 |
| ·抑制及过量表达基因 qPCR 验证 | 第28-29页 |
| ·过量表达基因编码的蛋白 SDS-PAGE 验证 | 第29-31页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第31-51页 |
| ·大肠杆菌 AraE 蛋白对苯丙素类化合物转运情况 | 第31-33页 |
| ·araE 基因过量表达和基因沉默菌株构建及验证 | 第31-32页 |
| ·过量表达和沉默 araE 基因对大肠杆菌苯丙素类化合物转运的影响 | 第32-33页 |
| ·E. coli BL21 (DE3)膜蛋白质组学双向电泳方法优化 | 第33-35页 |
| ·不同蛋白纯化方法对双向电泳结果的影响 | 第34-35页 |
| ·不同凝胶参数的确定 | 第35页 |
| ·不同苯丙素类化合物刺激下 E. coli BL21 (DE3)膜蛋白质组学研究结果 | 第35-40页 |
| ·不同苯丙素类化合物对 E. coli BL21 (DE3)膜蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| ·差异表达蛋白的鉴定及鉴定结果分析 | 第37-40页 |
| ·关键差异蛋白 qPCR 验证 | 第40-41页 |
| ·E. coli BL21 (DE3)中鉴定关键膜蛋白对苯丙素类化合物耐受的影响 | 第41-51页 |
| ·关键蛋白基因过量表达菌株的构建 | 第41-43页 |
| ·过量表达膜蛋白基因对 E. coli BL21 (DE3)苯丙素类化合物耐受性的影响 | 第43-45页 |
| ·关键蛋白基因沉默菌株的构建 | 第45-47页 |
| ·沉默膜蛋白基因对 E. coli BL21 (DE3)苯丙素类化合物耐受性的影响 | 第47-51页 |
| 主要结论与展望 | 第51-53页 |
| 主要结论 | 第51页 |
| 展望 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 附录 | 第59-62页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62页 |
