| 摘要 | 第1-14页 |
| ABSTRACT | 第14-18页 |
| 缩略语表 | 第18-20页 |
| 第一章 绪论 | 第20-45页 |
| 1 鸡蛋中胆固醇的存在形式与类型 | 第21-22页 |
| 2 胆固醇小肠吸收的遗传调控 | 第22-29页 |
| ·胆固醇小肠吸收的生理过程 | 第22-24页 |
| ·胆固醇小肠吸收效率的遗传因素变异 | 第24-25页 |
| ·胆固醇小肠吸收效率的影响因素 | 第25-28页 |
| ·胆固醇小肠吸收效率的测定 | 第28-29页 |
| 3 胆固醇细胞代谢的遗传调控 | 第29-33页 |
| ·胆固醇生物合成 | 第29-30页 |
| ·胆固醇动态平衡的转录调控 | 第30-32页 |
| ·胆固醇酯化及胆固醇酯的水解 | 第32页 |
| ·胆固醇代谢产物 | 第32-33页 |
| ·胆汁酸 | 第32-33页 |
| ·羟化固醇衍生物 | 第33页 |
| ·类固醇激素 | 第33页 |
| 4 鸡蛋摄取与血胆固醇的关系 | 第33-36页 |
| ·胆固醇饮食-心血管疾病假说的提出 | 第33-34页 |
| ·鸡蛋胆固醇营养作用争议的产生与持续 | 第34-35页 |
| ·鸡蛋胆固醇营养作用争议产生后的新发现 | 第35-36页 |
| 5 鸡蛋中调控胆固醇吸收代谢的成分 | 第36-41页 |
| ·鸡蛋中的蛋白质与氨基酸 | 第36-37页 |
| ·鸡蛋中个别氨基酸影响胆固醇代谢 | 第36-37页 |
| ·鸡蛋蛋白质对体内胆固醇合成代谢的影响 | 第37页 |
| ·蛋黄中的脂质与脂蛋白 | 第37-38页 |
| ·蛋黄中不饱和脂肪酸的协调作用 | 第37页 |
| ·叶黄素的抗氧化作用 | 第37-38页 |
| ·蛋黄中的脂蛋白 | 第38页 |
| ·蛋黄中的磷脂 | 第38-39页 |
| ·过量磷脂干扰微胶束中磷脂的有效水解 | 第38-39页 |
| ·过量磷脂改变混合微胶束的物理化学性质 | 第39页 |
| ·磷脂直接作用于肠上皮细胞的胆固醇吸收转运 | 第39页 |
| ·鸡蛋整体摄入影响LDL类型的转变 | 第39-40页 |
| ·其他因素 | 第40-41页 |
| 6 展望 | 第41页 |
| 7 选题学术思想 | 第41-45页 |
| ·研究目的和意义 | 第41-42页 |
| ·学术思路 | 第42-43页 |
| ·研究路线 | 第43页 |
| ·主要研究内容 | 第43-45页 |
| ·鸡蛋胆固醇营养效果及主要代谢途径实验动物学研究 | 第43页 |
| ·鸡蛋中调控胆固醇吸收代谢成分的找寻研究 | 第43-44页 |
| ·鸡蛋脂质成分对胆固醇吸收代谢调控机理的研究 | 第44-45页 |
| 第二章 鸡蛋摄取对大鼠血脂水平及肝脏胆固醇代谢相关基因表达的影响 | 第45-67页 |
| 1 材料与方法 | 第46-54页 |
| ·材料 | 第46-48页 |
| ·原料 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器与设备 | 第47-48页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-54页 |
| ·实验设计 | 第48-49页 |
| ·各组大鼠饲料的制备与营养成分的测定 | 第49页 |
| ·大鼠样品采集与处理 | 第49-50页 |
| ·大鼠摄食量、体重及脏器比值的测定 | 第50页 |
| ·大鼠肝脏、血液及粪便生化指标的测定 | 第50-51页 |
| ·大鼠肝组织与胸主动脉病理学检查 | 第51页 |
| ·大鼠肝胆固醇代谢相关基因mRNA表达量的测定 | 第51-53页 |
| ·统计分析 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-66页 |
| ·各组大鼠饲料的营养成分比较 | 第54页 |
| ·各组大鼠摄食量、体重变化及脏器比值变化 | 第54-56页 |
| ·各组大鼠血脂、肝脂及粪脂水平变化 | 第56-60页 |
| ·各组大鼠血脂水平变化 | 第56-59页 |
| ·各组大鼠肝脂水平变化 | 第59页 |
| ·各组大鼠粪脂水平变化 | 第59-60页 |
| ·各组大鼠肝组织病理学变化 | 第60-61页 |
| ·各组大鼠肝实图 | 第60页 |
| ·各组大鼠肝HE切片图 | 第60-61页 |
| ·大鼠肝胆固醇代谢相关基因mRNA表达量的变化 | 第61-64页 |
| ·大鼠肝脏总RNA质量评价与RT-qPCR退火条件的优化 | 第61-62页 |
| ·各组大鼠肝脏胆固醇代谢基因mRNA表达量的变化 | 第62-64页 |
| ·鸡蛋摄入对健康SD大鼠肝脏胆固醇代谢通路的影响 | 第64-66页 |
| 3 小结 | 第66-67页 |
| 第三章 Caco-2细胞单层模型的建立与评价 | 第67-82页 |
| 1 材料与方法 | 第67-75页 |
| ·材料 | 第67-70页 |
| ·Caco-2细胞株 | 第67-68页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第68页 |
| ·主要仪器与设备 | 第68-69页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第69-70页 |
| ·实验方法 | 第70-75页 |
| ·Caco-2细胞培养 | 第70-71页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的建立 | 第71-73页 |
| ·Caco-2细胞生长曲线的制备 | 第73-74页 |
| ·Caco-2细胞单层模型紧密性与完整性的鉴定 | 第74页 |
| ·Caco-2细胞单层模型形态学观察 | 第74页 |
| ·Caco-2细胞生长分化特征的鉴定 | 第74-75页 |
| ·Caco-2细胞单层通透性的验证 | 第75页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-81页 |
| ·Caco-2细胞生长曲线 | 第75-76页 |
| ·接种浓度的选择 | 第75-76页 |
| ·不同时间段Caco-2细胞生长情况 | 第76页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的紧密性与完整性 | 第76-77页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的形态学观察 | 第77-79页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的极化 | 第79页 |
| ·荧光黄转运实验 | 第79-80页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的建立与转运实验注意事项 | 第80-81页 |
| 3 小结 | 第81-82页 |
| 第四章 胆固醇在Caco-2细胞单层模型中的体外转运研究 | 第82-99页 |
| 1 材料与方法 | 第83-92页 |
| ·材料 | 第83-88页 |
| ·Caco-2细胞株 | 第83页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第83-85页 |
| ·主要仪器与设备 | 第85-86页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第86-88页 |
| ·实验方法 | 第88-92页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的建立与验证 | 第88页 |
| ·3H-胆固醇的测定 | 第88页 |
| ·不同pH值下Caco-2细胞单层模型中的胆固醇转运实验 | 第88-89页 |
| ·不同浓度下Caco-2细胞单层模型中的胆固醇转运实验 | 第89页 |
| ·Ezetimibe添加后Caco-2细胞单层模型中的胆固醇转运实验 | 第89-90页 |
| ·RT-qPCR实验 | 第90页 |
| ·Western-blot实验 | 第90-92页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第92页 |
| 2 结果与分析 | 第92-97页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的验证 | 第92-93页 |
| ·pH对胆固醇在Caco-2细胞单层模型转运的影响 | 第93-94页 |
| ·浓度对胆固醇Caco-2细胞单层模型转运的影响 | 第94-95页 |
| ·Eetimibe对胆固醇Caco-2细胞单层模型转运的影响 | 第95-96页 |
| ·Ezetimibe对胆固醇吸收关键蛋白NPC1L1表达的影响 | 第96-97页 |
| ·胆固醇在Caco-2细胞单层模型中转运类型的鉴定 | 第97页 |
| 3 小结 | 第97-99页 |
| 第五章 鸡蛋中调控Caco-2细胞胆固醇吸收转运成分的筛选 | 第99-120页 |
| 1 材料与方法 | 第100-107页 |
| ·材料 | 第100-104页 |
| ·Caco-2细胞株 | 第100页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第100-102页 |
| ·主要仪器与设备 | 第102-103页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第103-104页 |
| ·实验方法 | 第104-107页 |
| ·鸡蛋蛋白质的提取 | 第104页 |
| ·鸡蛋蛋白质的体外胃肠模拟消化 | 第104-105页 |
| ·鸡蛋候选因子的理化特性鉴定 | 第105页 |
| ·候选因子对Caco-2细胞的毒性试验 | 第105-106页 |
| ·鸡蛋各候选因子在Caco-2细胞单层模型中的摄取方案 | 第106-107页 |
| ·鸡蛋各候选因子在Caco-2细胞单层模型中的转运方案 | 第107页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第107页 |
| 2 结果与分析 | 第107-119页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的验证 | 第107-108页 |
| ·鸡蛋蛋白与磷脂的理化特性分析 | 第108-111页 |
| ·鸡蛋候选因子对Caco-2细胞的毒性试验 | 第111-112页 |
| ·鸡蛋中候选因子对Caco-2细胞单层中胆固醇摄取的影响 | 第112-115页 |
| ·鸡蛋中候选因子对Caco-2细胞单层中胆固醇转运的影响 | 第115-118页 |
| ·鸡蛋中调控胆固醇在Caco-2单层模型中转运的成分 | 第118-119页 |
| 3 小结 | 第119-120页 |
| 第六章 磷脂对胆固醇微胶束物理化学性质的影响 | 第120-131页 |
| 1 材料与方法 | 第121-125页 |
| ·材料 | 第121-123页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第121-122页 |
| ·主要仪器与设备 | 第122页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第122-123页 |
| ·实验方法 | 第123-125页 |
| ·微胶束化学成分分析 | 第123-124页 |
| ·牛磺胆酸钠结合能力测定 | 第124页 |
| ·胆固醇的溶解度测定 | 第124页 |
| ·牛磺胆酸盐的溶解度测定 | 第124页 |
| ·微胶束的分子量变化测定 | 第124-125页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第125页 |
| 2 结果与分析 | 第125-130页 |
| ·微胶束化学成分分析 | 第125-126页 |
| ·磷脂对其与牛磺胆酸钠结合能力的影响 | 第126页 |
| ·磷脂对盐溶液中胆固醇溶解度的影响 | 第126-127页 |
| ·磷脂对盐溶液中牛磺胆酸盐溶解度的影响 | 第127-128页 |
| ·磷脂对微胶束分子量变化的影响 | 第128页 |
| ·鸡蛋中磷脂对胆固醇微胶束物理化学性质的影响 | 第128-130页 |
| 3 小结 | 第130-131页 |
| 第七章 鸡蛋卵磷脂与神经鞘磷脂调控Caco-2细胞胆固醇吸收转运的分子机理研究 | 第131-150页 |
| 1 材料与方法 | 第132-140页 |
| ·材料 | 第132-136页 |
| ·Caco-2细胞株 | 第132页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第132-134页 |
| ·主要仪器与设备 | 第134-135页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第135-136页 |
| ·实验方法 | 第136-140页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的建立 | 第136页 |
| ·磷脂脂肪酸的氧化与细胞毒性实验 | 第136-137页 |
| ·鸡蛋卵磷脂与神经鞘磷脂在Caco-2细胞中的孵育 | 第137页 |
| ·Caco-2细胞总RNA提取与RT-qPCR反应 | 第137-139页 |
| ·Western-blot实验 | 第139-140页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第140页 |
| 2 结果与分析 | 第140-149页 |
| ·磷脂脂肪酸氧化性与毒性评价 | 第140页 |
| ·Caco-2细胞总RNA质量评价与RT-qPCR退火条件的优化 | 第140-141页 |
| ·Caco-2细胞中胆固醇转运蛋白NPC1L1翻译与转录水平的变化 | 第141-142页 |
| ·Caco-2细胞中胆固醇吸收代谢相关基因mRNA表达量的变化 | 第142-147页 |
| ·Caco-2细胞中ABCG5与ABCG8 mRNA转录水平的变化情况 | 第142-143页 |
| ·Caco-2细胞中ABCA1 mRNA转录水平的变化情况 | 第143-144页 |
| ·Caco-2细胞中ACAT2与MTP mRNA转录水平的变化情况 | 第144-145页 |
| ·Caco-2细胞中Caveolin 1与Annexin A2 mRNA转录水平的变化情况 | 第145-146页 |
| ·Caco-2细胞中SREBP-1与SREBP-2 mRNA转录水平的变化情况 | 第146-147页 |
| ·磷脂孵育后对Caco-2细胞中胆固醇吸收代谢通路的影响 | 第147-149页 |
| 3 小结 | 第149-150页 |
| 第八章 鸡蛋脂肪酸调控Caco-2细胞胆固醇吸收转运的分子机理研究 | 第150-165页 |
| 1 材料与方法 | 第151-156页 |
| ·材料 | 第151-154页 |
| ·Caco-2细胞株 | 第151页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第151-153页 |
| ·主要仪器与设备 | 第153-154页 |
| ·缓冲溶液配制 | 第154页 |
| ·实验方法 | 第154-156页 |
| ·Caco-2细胞单层模型的建立 | 第154-155页 |
| ·鸡蛋脂肪酸的氧化与细胞毒性实验 | 第155页 |
| ·鸡蛋脂肪酸在Caco-2细胞中的孵育 | 第155页 |
| ·Caco-2细胞总RNA提取与RT-qPCR反应 | 第155页 |
| ·Western-blot实验 | 第155页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第155-156页 |
| 2 结果与分析 | 第156-164页 |
| ·脂肪酸氧化性与毒性评价 | 第156页 |
| ·Caco-2细胞中胆固醇转运蛋白NPC1L1翻译与转录水平的变化 | 第156-157页 |
| ·Caco-2细胞中胆固醇吸收代谢相关基因mRNA转录水平的变化 | 第157-162页 |
| ·Caco-2细胞中ABCG5与ABCG8 mRNA转录水平的变化情况 | 第157-158页 |
| ·Caco-2细胞中ABCA1 mRNA转录水平的变化情况 | 第158-159页 |
| ·Caco-2细胞中ACAT2与MTP mRNA转录水平的变化情况 | 第159-160页 |
| ·Caco-2细胞中Caveolin 1与Annexin A2 mRNA转录水平的变化情况 | 第160-161页 |
| ·Caco-2细胞中SREBP-1与SREBP-2 mRNA转录水平的变化情况 | 第161-162页 |
| ·脂肪酸孵育后对Caco-2细胞中胆固醇吸收代谢通路的影响 | 第162-164页 |
| 3 小结 | 第164-165页 |
| 第九章 结论与展望 | 第165-168页 |
| 1 结论 | 第165-166页 |
| 2 创新性 | 第166-167页 |
| 3 延续研究计划 | 第167-168页 |
| 参考文献 | 第168-185页 |
| 附录 | 第185-187页 |
| 致谢 | 第187-188页 |
