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鸡蛋清卵粘蛋白的纯化、增溶及抗感染活性研究

目录第1-10页
摘要第10-13页
Abstract第13-16页
缩略语表第16-17页
第一章 文献综述第17-43页
 1 OVOMUCIN的含量和分布第17-20页
 2 OVOMUCIN的结构与分子特性第20-28页
   ·Ovomucin的分子量和亚基组成第20-21页
   ·Ovomucin的氨基酸组成第21-23页
   ·氨基酸序列第23-25页
     ·粘蛋白基因分类及特征第23页
     ·Ovomucin的序列第23-25页
   ·Ovomucin的糖链结构第25-27页
   ·Ovomucin的分子特性第27-28页
 3 OVOMUCIN的理化性质与功能特性第28-32页
   ·溶解性第28-30页
   ·热稳定性第30页
   ·胶凝性第30-31页
   ·乳化性与起泡性第31页
   ·Ovomucin与蛋清稀变的关系第31-32页
 4 OVOMUCIN的生物活性第32-37页
   ·抑制肿瘤细胞的增殖第33-34页
   ·提高机体免疫力第34页
   ·降低血清胆固醇第34页
   ·抗菌活性第34-35页
   ·抗病毒活性第35-37页
 5 OVOMUCIN的分离纯化第37-40页
   ·等电点沉降法第38-39页
   ·色层析法第39页
   ·其它方法第39-40页
 6 本课题选题的学术思想第40-43页
   ·研究目的与意义第40-41页
   ·学术思路第41页
   ·主要研究内容第41-43页
第二章 OVOMUCIN的分离纯化与鉴定第43-67页
 1 材料与方法第44-49页
   ·材料第44-45页
     ·原料第44页
     ·主要试剂第44页
     ·主要仪器和设备第44-45页
   ·方法第45-49页
     ·Ovomucin分离纯化的工艺流程第45页
     ·盐种类和浓度对ovomucin制备过程的影响第45-46页
     ·分步盐析制备ovomucin粗品第46页
     ·凝胶过滤层析第46页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第46页
     ·纯度测定第46-47页
     ·质谱鉴定第47页
     ·血凝抑制活性的测定第47页
     ·产量和得率的测定第47页
     ·回收率的测定第47页
     ·产物组成分析第47-48页
     ·Ovomucin的氨基酸分析第48页
     ·Ovomucin的糖组成分析第48页
     ·Ovomucin NDV粘附能力的测定第48-49页
     ·数据分析第49页
 2 结果与分析第49-65页
   ·盐种类和浓度对ovomucin制备过程的影响第49-56页
     ·NaCl浓度对ovomucin制备的影响第49-53页
     ·MgCl_2浓度对ovomucin制备的影响第53-56页
   ·Ovomucin粗制备第56-59页
   ·层析纯化第59-60页
   ·质谱鉴定第60-61页
   ·纯度鉴定第61页
   ·纯化效果评价第61-62页
   ·Ovomucin组成分析第62-64页
   ·Ovomucin NDV的粘附性能第64-65页
 3 讨论第65-66页
 4 小结第66-67页
第三章 OVOMUCIN的增溶效果与机制研究第67-93页
 1 材料与方法第68-71页
   ·材料第68-69页
     ·主要试剂第68页
     ·主要仪器设备第68-69页
   ·方法第69-71页
     ·氮溶性指数的测定第69页
     ·蛋白质的溶解度测定第69页
     ·表面疏水性测定第69页
     ·芘溶解性的测定第69-70页
     ·荧光扫描第70页
     ·Ovomucin内源荧光的静态光谱扫描第70页
     ·电导率的测定第70页
     ·红外光谱第70-71页
     ·数据处理第71页
 2 结果与分析第71-89页
   ·Ovomucin在不同介质中的溶解性质第71-73页
   ·精氨酸对ovomucin的增溶效果第73-74页
   ·精氨酸对ovomucin紫外光谱特性的影响第74-75页
   ·Ovomucin与精氨酸相互作用的荧光光谱分析第75-80页
     ·荧光猝灭机理第75-78页
     ·精氨酸与ovomucin的结合常数及结合位点数第78-79页
     ·精氨酸与ovomucin之间作用力类型的判断第79-80页
   ·芘荧光探针法研究精氨酸与ovomucin的相互作用第80-82页
   ·Ovomucin-精氨酸体系的电导率变化第82-83页
   ·精氨酸对ovomucin构象的影响第83-86页
     ·对同步荧光光谱特性的影响第83-84页
     ·对二级结构的影响第84-86页
   ·精氨酸结合对ovomucin表面疏水性的影响第86-88页
   ·对粘附病毒能力的影响第88-89页
 3 讨论第89-92页
 4 小结第92-93页
第四章 OVOMUCIN的抗菌特性第93-106页
 1 材料与方法第93-96页
   ·材料第93-94页
     ·实验菌株第93-94页
     ·主要试剂第94页
     ·主要仪器与设备第94页
   ·方法第94-96页
     ·菌种的活化与接种第94-95页
     ·最小抑菌浓度的测定第95页
     ·生长曲线的测定第95页
     ·抑菌率的测定第95页
     ·粘附能力的测定第95-96页
     ·Ovomucin的酸碱稳定性第96页
     ·Ovomucin的热稳定性第96页
     ·金属盐对ovomucin抗菌活性的影响第96页
     ·数据处理第96页
 2 结果与分析第96-103页
   ·Ovomucin对不同细菌的抑制效果第96-98页
   ·Ovomucin对细菌生长曲线的影响第98-99页
   ·Ovomucin对不同菌体的粘附能力第99-100页
   ·Ovomucin抑菌活性的酸碱稳定性第100-101页
   ·Ovomucin抗菌活性的热稳定性第101-102页
   ·常见金属盐对ovomucin抗菌活性的影响第102-103页
 3 讨论第103-105页
   ·Ovomucin对不同细菌的抑制效果存在差异第103-104页
   ·Ovomucin在不同酸碱条件下抗菌活性的稳定性第104-105页
   ·Ovomucin的热稳定性第105页
 4 小结第105-106页
第五章 OVOMUCIN体外抗病毒活性评价第106-127页
 1 材料与方法第107-112页
   ·材料第107-108页
     ·病毒株第107页
     ·细胞株第107页
     ·主要试剂第107-108页
     ·主要仪器设备第108页
   ·方法第108-112页
     ·细胞的复苏第108-109页
     ·病毒的活化及病毒悬液的制备第109页
     ·鸡红细胞的制备第109页
     ·病毒毒力的测定第109-110页
     ·不同样品对鸡红细胞的毒性第110页
     ·对体外血凝滴度的抑制作用第110页
     ·对MDCK的细胞毒性第110页
     ·细胞存活率的测定第110-111页
     ·加样方式对ovomucin抗流感病毒效果的影响第111-112页
     ·统计学分析第112页
 2 结果与分析第112-124页
   ·受试病毒株的毒力第112页
   ·样品对鸡红细胞的毒性第112-113页
   ·Ovomucin对鸡新城疫病毒血凝效价的影响第113-115页
   ·抗流感病毒活性细胞模型的建立第115-117页
     ·细胞数量的影响第115页
     ·病毒滴度的影响第115-116页
     ·CCK-8的孵育时间第116-117页
   ·样品对MDCK细胞毒性测定第117-118页
   ·抗流感病毒作用效果第118-121页
     ·Ovomucin对流感病毒血凝效价的影响第118-119页
     ·加样方式对ovomucin抗流感病毒效果的影响第119-121页
   ·不同来源粘蛋白的抗病毒活性第121-123页
     ·不同来源粘蛋白对H_5N_1病毒血凝效价的影响第121-122页
     ·不同来源粘蛋白对H_5N_1病毒感染细胞的影响第122-123页
   ·pH对ovomucin抗病毒活性的影响第123-124页
 3 讨论第124-126页
   ·Ovomucin作为抗病毒天然物质的优势第124页
   ·抗病毒活性评价方法的选择第124-125页
   ·本研究存在的问题第125-126页
 4 小结第126-127页
第六章 OVOMUCIN抗流感病毒生化机制的初步研究第127-147页
 1 材料与方法第128-132页
   ·材料第128页
     ·细胞与病毒第128页
     ·主要试剂第128页
     ·主要仪器设备第128页
   ·实验方法第128-132页
     ·Ovomucin对H_5N_1的直接灭活作用第128-129页
     ·不同时间加入ovomucin对H_5N_1的抑制作用第129页
     ·血凝滴度实验第129页
     ·神经氨酸酶抑制试验第129-130页
     ·Ovomucin对流感病毒血凝抑制作用的显微观察第130-131页
     ·酶联免疫吸附实验第131页
     ·双偏振极化干涉(DPI)第131-132页
     ·统计学分析第132页
 2 结果与分析第132-143页
   ·Ovomucin对H_5N_1的直接灭活作用第132页
   ·抗流感病毒环节的初步探讨第132-133页
   ·体外血凝抑制实验第133-136页
   ·神经氨酸酶抑制实验第136-138页
   ·ELISA第138-139页
   ·Ovomucin与血凝素相互作用的DPI分析第139-143页
 3 讨论第143-146页
 4 小结第146-147页
第七章 OVOMUCIN的构象稳定性第147-178页
 1 材料与方法第148-150页
   ·材料第148页
     ·主要试剂第148页
     ·主要仪器设备第148页
   ·方法第148-150页
     ·Ovomucin的内源荧光静态扫描第148-149页
     ·表面疏水性的测定第149页
     ·红外光谱扫描第149页
     ·二维相关分析第149页
     ·差式量热扫描第149页
     ·动态光散射第149-150页
 2 结果与分析第150-173页
   ·Ovomucin的热稳定性分析第150-157页
     ·一维红外吸收图谱分析第150页
     ·升温过程中ovomucin红外光谱的变化第150-154页
     ·Ovomucin红外光谱的二维相关图谱分析第154-157页
   ·Ovomucin的酸碱稳定性第157-167页
     ·酸碱转变过程中ovomucin荧光光谱性质的变化第157-160页
     ·酸碱转变过程中ovomucin红外图谱的变化第160页
     ·二维相关分析pH微扰对ovomucin构象的影响第160-163页
     ·pH对ovomucin二级结构的影响第163-167页
   ·Mg~(2+)对ovomucin构象的影响第167-173页
     ·Mg~(2+)对ovomucin荧光光谱性质的影响第167-169页
     ·Mg~(2+)对ovomucin红外光谱性质的影响第169-172页
     ·Mg~(2+)对ovomucin分子粒径的影响第172-173页
 3 讨论第173-176页
   ·Ovomucin构象研究的方法选择第173-175页
   ·Ovomucin的结构与功能关系的探讨第175-176页
 4 小结第176-178页
第八章 结论与展望第178-182页
 1 结论第178-179页
 2 创新性第179-180页
 3 本研究存在的问题与展望第180-182页
参考文献第182-202页
致谢第202-204页
附录 研究生期间科研情况第204-205页

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