目录 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
缩略语表 | 第16-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-43页 |
1 OVOMUCIN的含量和分布 | 第17-20页 |
2 OVOMUCIN的结构与分子特性 | 第20-28页 |
·Ovomucin的分子量和亚基组成 | 第20-21页 |
·Ovomucin的氨基酸组成 | 第21-23页 |
·氨基酸序列 | 第23-25页 |
·粘蛋白基因分类及特征 | 第23页 |
·Ovomucin的序列 | 第23-25页 |
·Ovomucin的糖链结构 | 第25-27页 |
·Ovomucin的分子特性 | 第27-28页 |
3 OVOMUCIN的理化性质与功能特性 | 第28-32页 |
·溶解性 | 第28-30页 |
·热稳定性 | 第30页 |
·胶凝性 | 第30-31页 |
·乳化性与起泡性 | 第31页 |
·Ovomucin与蛋清稀变的关系 | 第31-32页 |
4 OVOMUCIN的生物活性 | 第32-37页 |
·抑制肿瘤细胞的增殖 | 第33-34页 |
·提高机体免疫力 | 第34页 |
·降低血清胆固醇 | 第34页 |
·抗菌活性 | 第34-35页 |
·抗病毒活性 | 第35-37页 |
5 OVOMUCIN的分离纯化 | 第37-40页 |
·等电点沉降法 | 第38-39页 |
·色层析法 | 第39页 |
·其它方法 | 第39-40页 |
6 本课题选题的学术思想 | 第40-43页 |
·研究目的与意义 | 第40-41页 |
·学术思路 | 第41页 |
·主要研究内容 | 第41-43页 |
第二章 OVOMUCIN的分离纯化与鉴定 | 第43-67页 |
1 材料与方法 | 第44-49页 |
·材料 | 第44-45页 |
·原料 | 第44页 |
·主要试剂 | 第44页 |
·主要仪器和设备 | 第44-45页 |
·方法 | 第45-49页 |
·Ovomucin分离纯化的工艺流程 | 第45页 |
·盐种类和浓度对ovomucin制备过程的影响 | 第45-46页 |
·分步盐析制备ovomucin粗品 | 第46页 |
·凝胶过滤层析 | 第46页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第46页 |
·纯度测定 | 第46-47页 |
·质谱鉴定 | 第47页 |
·血凝抑制活性的测定 | 第47页 |
·产量和得率的测定 | 第47页 |
·回收率的测定 | 第47页 |
·产物组成分析 | 第47-48页 |
·Ovomucin的氨基酸分析 | 第48页 |
·Ovomucin的糖组成分析 | 第48页 |
·Ovomucin NDV粘附能力的测定 | 第48-49页 |
·数据分析 | 第49页 |
2 结果与分析 | 第49-65页 |
·盐种类和浓度对ovomucin制备过程的影响 | 第49-56页 |
·NaCl浓度对ovomucin制备的影响 | 第49-53页 |
·MgCl_2浓度对ovomucin制备的影响 | 第53-56页 |
·Ovomucin粗制备 | 第56-59页 |
·层析纯化 | 第59-60页 |
·质谱鉴定 | 第60-61页 |
·纯度鉴定 | 第61页 |
·纯化效果评价 | 第61-62页 |
·Ovomucin组成分析 | 第62-64页 |
·Ovomucin NDV的粘附性能 | 第64-65页 |
3 讨论 | 第65-66页 |
4 小结 | 第66-67页 |
第三章 OVOMUCIN的增溶效果与机制研究 | 第67-93页 |
1 材料与方法 | 第68-71页 |
·材料 | 第68-69页 |
·主要试剂 | 第68页 |
·主要仪器设备 | 第68-69页 |
·方法 | 第69-71页 |
·氮溶性指数的测定 | 第69页 |
·蛋白质的溶解度测定 | 第69页 |
·表面疏水性测定 | 第69页 |
·芘溶解性的测定 | 第69-70页 |
·荧光扫描 | 第70页 |
·Ovomucin内源荧光的静态光谱扫描 | 第70页 |
·电导率的测定 | 第70页 |
·红外光谱 | 第70-71页 |
·数据处理 | 第71页 |
2 结果与分析 | 第71-89页 |
·Ovomucin在不同介质中的溶解性质 | 第71-73页 |
·精氨酸对ovomucin的增溶效果 | 第73-74页 |
·精氨酸对ovomucin紫外光谱特性的影响 | 第74-75页 |
·Ovomucin与精氨酸相互作用的荧光光谱分析 | 第75-80页 |
·荧光猝灭机理 | 第75-78页 |
·精氨酸与ovomucin的结合常数及结合位点数 | 第78-79页 |
·精氨酸与ovomucin之间作用力类型的判断 | 第79-80页 |
·芘荧光探针法研究精氨酸与ovomucin的相互作用 | 第80-82页 |
·Ovomucin-精氨酸体系的电导率变化 | 第82-83页 |
·精氨酸对ovomucin构象的影响 | 第83-86页 |
·对同步荧光光谱特性的影响 | 第83-84页 |
·对二级结构的影响 | 第84-86页 |
·精氨酸结合对ovomucin表面疏水性的影响 | 第86-88页 |
·对粘附病毒能力的影响 | 第88-89页 |
3 讨论 | 第89-92页 |
4 小结 | 第92-93页 |
第四章 OVOMUCIN的抗菌特性 | 第93-106页 |
1 材料与方法 | 第93-96页 |
·材料 | 第93-94页 |
·实验菌株 | 第93-94页 |
·主要试剂 | 第94页 |
·主要仪器与设备 | 第94页 |
·方法 | 第94-96页 |
·菌种的活化与接种 | 第94-95页 |
·最小抑菌浓度的测定 | 第95页 |
·生长曲线的测定 | 第95页 |
·抑菌率的测定 | 第95页 |
·粘附能力的测定 | 第95-96页 |
·Ovomucin的酸碱稳定性 | 第96页 |
·Ovomucin的热稳定性 | 第96页 |
·金属盐对ovomucin抗菌活性的影响 | 第96页 |
·数据处理 | 第96页 |
2 结果与分析 | 第96-103页 |
·Ovomucin对不同细菌的抑制效果 | 第96-98页 |
·Ovomucin对细菌生长曲线的影响 | 第98-99页 |
·Ovomucin对不同菌体的粘附能力 | 第99-100页 |
·Ovomucin抑菌活性的酸碱稳定性 | 第100-101页 |
·Ovomucin抗菌活性的热稳定性 | 第101-102页 |
·常见金属盐对ovomucin抗菌活性的影响 | 第102-103页 |
3 讨论 | 第103-105页 |
·Ovomucin对不同细菌的抑制效果存在差异 | 第103-104页 |
·Ovomucin在不同酸碱条件下抗菌活性的稳定性 | 第104-105页 |
·Ovomucin的热稳定性 | 第105页 |
4 小结 | 第105-106页 |
第五章 OVOMUCIN体外抗病毒活性评价 | 第106-127页 |
1 材料与方法 | 第107-112页 |
·材料 | 第107-108页 |
·病毒株 | 第107页 |
·细胞株 | 第107页 |
·主要试剂 | 第107-108页 |
·主要仪器设备 | 第108页 |
·方法 | 第108-112页 |
·细胞的复苏 | 第108-109页 |
·病毒的活化及病毒悬液的制备 | 第109页 |
·鸡红细胞的制备 | 第109页 |
·病毒毒力的测定 | 第109-110页 |
·不同样品对鸡红细胞的毒性 | 第110页 |
·对体外血凝滴度的抑制作用 | 第110页 |
·对MDCK的细胞毒性 | 第110页 |
·细胞存活率的测定 | 第110-111页 |
·加样方式对ovomucin抗流感病毒效果的影响 | 第111-112页 |
·统计学分析 | 第112页 |
2 结果与分析 | 第112-124页 |
·受试病毒株的毒力 | 第112页 |
·样品对鸡红细胞的毒性 | 第112-113页 |
·Ovomucin对鸡新城疫病毒血凝效价的影响 | 第113-115页 |
·抗流感病毒活性细胞模型的建立 | 第115-117页 |
·细胞数量的影响 | 第115页 |
·病毒滴度的影响 | 第115-116页 |
·CCK-8的孵育时间 | 第116-117页 |
·样品对MDCK细胞毒性测定 | 第117-118页 |
·抗流感病毒作用效果 | 第118-121页 |
·Ovomucin对流感病毒血凝效价的影响 | 第118-119页 |
·加样方式对ovomucin抗流感病毒效果的影响 | 第119-121页 |
·不同来源粘蛋白的抗病毒活性 | 第121-123页 |
·不同来源粘蛋白对H_5N_1病毒血凝效价的影响 | 第121-122页 |
·不同来源粘蛋白对H_5N_1病毒感染细胞的影响 | 第122-123页 |
·pH对ovomucin抗病毒活性的影响 | 第123-124页 |
3 讨论 | 第124-126页 |
·Ovomucin作为抗病毒天然物质的优势 | 第124页 |
·抗病毒活性评价方法的选择 | 第124-125页 |
·本研究存在的问题 | 第125-126页 |
4 小结 | 第126-127页 |
第六章 OVOMUCIN抗流感病毒生化机制的初步研究 | 第127-147页 |
1 材料与方法 | 第128-132页 |
·材料 | 第128页 |
·细胞与病毒 | 第128页 |
·主要试剂 | 第128页 |
·主要仪器设备 | 第128页 |
·实验方法 | 第128-132页 |
·Ovomucin对H_5N_1的直接灭活作用 | 第128-129页 |
·不同时间加入ovomucin对H_5N_1的抑制作用 | 第129页 |
·血凝滴度实验 | 第129页 |
·神经氨酸酶抑制试验 | 第129-130页 |
·Ovomucin对流感病毒血凝抑制作用的显微观察 | 第130-131页 |
·酶联免疫吸附实验 | 第131页 |
·双偏振极化干涉(DPI) | 第131-132页 |
·统计学分析 | 第132页 |
2 结果与分析 | 第132-143页 |
·Ovomucin对H_5N_1的直接灭活作用 | 第132页 |
·抗流感病毒环节的初步探讨 | 第132-133页 |
·体外血凝抑制实验 | 第133-136页 |
·神经氨酸酶抑制实验 | 第136-138页 |
·ELISA | 第138-139页 |
·Ovomucin与血凝素相互作用的DPI分析 | 第139-143页 |
3 讨论 | 第143-146页 |
4 小结 | 第146-147页 |
第七章 OVOMUCIN的构象稳定性 | 第147-178页 |
1 材料与方法 | 第148-150页 |
·材料 | 第148页 |
·主要试剂 | 第148页 |
·主要仪器设备 | 第148页 |
·方法 | 第148-150页 |
·Ovomucin的内源荧光静态扫描 | 第148-149页 |
·表面疏水性的测定 | 第149页 |
·红外光谱扫描 | 第149页 |
·二维相关分析 | 第149页 |
·差式量热扫描 | 第149页 |
·动态光散射 | 第149-150页 |
2 结果与分析 | 第150-173页 |
·Ovomucin的热稳定性分析 | 第150-157页 |
·一维红外吸收图谱分析 | 第150页 |
·升温过程中ovomucin红外光谱的变化 | 第150-154页 |
·Ovomucin红外光谱的二维相关图谱分析 | 第154-157页 |
·Ovomucin的酸碱稳定性 | 第157-167页 |
·酸碱转变过程中ovomucin荧光光谱性质的变化 | 第157-160页 |
·酸碱转变过程中ovomucin红外图谱的变化 | 第160页 |
·二维相关分析pH微扰对ovomucin构象的影响 | 第160-163页 |
·pH对ovomucin二级结构的影响 | 第163-167页 |
·Mg~(2+)对ovomucin构象的影响 | 第167-173页 |
·Mg~(2+)对ovomucin荧光光谱性质的影响 | 第167-169页 |
·Mg~(2+)对ovomucin红外光谱性质的影响 | 第169-172页 |
·Mg~(2+)对ovomucin分子粒径的影响 | 第172-173页 |
3 讨论 | 第173-176页 |
·Ovomucin构象研究的方法选择 | 第173-175页 |
·Ovomucin的结构与功能关系的探讨 | 第175-176页 |
4 小结 | 第176-178页 |
第八章 结论与展望 | 第178-182页 |
1 结论 | 第178-179页 |
2 创新性 | 第179-180页 |
3 本研究存在的问题与展望 | 第180-182页 |
参考文献 | 第182-202页 |
致谢 | 第202-204页 |
附录 研究生期间科研情况 | 第204-205页 |