| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 1. 前言 | 第13-28页 |
| 1.1 噬菌体的概况 | 第13-16页 |
| 1.1.1 噬菌体的形态结构特征及其分类 | 第13-14页 |
| 1.1.2 噬菌体在现代生物学研究的作用 | 第14-15页 |
| 1.1.3 噬菌体作为基因工程操作的材料 | 第15-16页 |
| 1.2 乳酸菌噬菌体 | 第16-23页 |
| 1.2.1 乳酸菌噬菌体的形态及分类 | 第17-18页 |
| 1.2.2 乳酸菌噬菌体的危害和防治 | 第18页 |
| 1.2.3 乳酸菌噬菌体的分子生物学特征 | 第18-19页 |
| 1.2.4 典型乳酸杆菌噬菌体的研究进展 | 第19-23页 |
| 1.2.5 乳酸菌噬菌体比较基因组学研究 | 第23页 |
| 1.3 乳酸菌质粒表达载体与表达元件研究进展 | 第23-27页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-48页 |
| 2.1 材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 乳酸菌噬菌体分离样品和菌株与质粒 | 第28页 |
| 2.1.2 抗体制剂 | 第28页 |
| 2.1.3 主要生物学试剂 | 第28页 |
| 2.1.4 培养基 | 第28页 |
| 2.1.5 引物 | 第28-29页 |
| 2.1.6 主要仪器与设备 | 第29页 |
| 2.2 试验方法 | 第29-48页 |
| 2.2.1 干酪乳杆菌菌种活化和乳酸菌噬菌体的分离 | 第29页 |
| 2.2.2 乳酸菌噬菌体生物学特性的测定 | 第29-31页 |
| 2.2.3 噬菌体吸附性质的研究 | 第31-32页 |
| 2.2.4 噬菌体LJ株全基因组的测定及序列分析 | 第32-35页 |
| 2.2.5 噬菌体启动子的筛选及其功能的验证 | 第35-41页 |
| 2.2.6 噬菌体复制子的鉴定 | 第41-46页 |
| 2.2.7 免疫荧光鉴定蛋白的表达 | 第46页 |
| 2.2.8 EGFP为模式抗原的启动子活性验证 | 第46-48页 |
| 3 结果 | 第48-78页 |
| 3.1 干酪乳杆菌噬菌体的分离及生物特性 | 第48-57页 |
| 3.1.1 干酪乳杆菌噬菌体的分离纯化 | 第48页 |
| 3.1.2 噬菌体侵染宿主菌电镜观察 | 第48-49页 |
| 3.1.3 噬菌体的形态观察结果 | 第49-50页 |
| 3.1.4 噬菌体的宿主范围 | 第50页 |
| 3.1.5 感染复数的测定结果 | 第50-51页 |
| 3.1.6 噬菌体限制性酶切图谱分析结果 | 第51-52页 |
| 3.1.7 噬菌体外壳蛋白SDS-PAGE分析结果 | 第52页 |
| 3.1.8 一步生长曲线的测定结果 | 第52-53页 |
| 3.1.9 钙镁离子对噬菌体裂解周期的影响 | 第53页 |
| 3.1.10 噬菌体稳定性的检测结果 | 第53-56页 |
| 3.1.11 不同理化因素对噬菌体吸附性质的影响 | 第56-57页 |
| 3.2 噬菌体LJ株全基因组的测定 | 第57-64页 |
| 3.2.1 全基因组分段PCR扩增结果 | 第57-58页 |
| 3.2.2 噬菌体基因组的生物信息学分析 | 第58-64页 |
| 3.3 噬菌体启动子的筛选和鉴定 | 第64-75页 |
| 3.3.1 噬菌体转录起始位点的获得 | 第64-65页 |
| 3.3.2 噬菌体启动子的克隆 | 第65-67页 |
| 3.3.3 启动子探测载体质粒的验证 | 第67-68页 |
| 3.3.4 重组乳酸杆菌启动子质粒的验证 | 第68-70页 |
| 3.3.5 重组乳酸杆菌启动子活性的验证 | 第70-72页 |
| 3.3.6 间接免疫荧光鉴定蛋白的表达 | 第72-73页 |
| 3.3.7 EGFP表达鉴定 | 第73-75页 |
| 3.4 噬菌体复制子载体的鉴定 | 第75-78页 |
| 3.4.1 噬菌体复制子的克隆 | 第75-76页 |
| 3.4.2 重组复制子乳酸菌质粒酶切鉴定 | 第76页 |
| 3.4.3 重组乳酸菌质粒酶切鉴定 | 第76-77页 |
| 3.4.4 噬菌体复制子对质粒复制的影响 | 第77-78页 |
| 4. 讨论 | 第78-83页 |
| 4.1 噬菌体LJ的生物学特性分析 | 第78页 |
| 4.2 噬菌体LJ全基因组的生物信息学分析 | 第78-80页 |
| 4.3 噬菌体LJ启动子的活性分析 | 第80-81页 |
| 4.4 噬菌体LJ复制子的活性分析 | 第81-83页 |
| 5. 结论 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 附录 | 第95-113页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第113页 |