米曲霉盐胁迫机制解析和耐盐蛋白酶分离纯化、酶学性质研究
| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略符号对照表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 酱油发酵工艺及主要菌种介绍 | 第9-11页 |
| 1.2 微生物盐胁迫机制的相关研究 | 第11-15页 |
| 1.2.1 HOG-MAPK信号传导途径 | 第12-13页 |
| 1.2.2 钙调磷酸酶信号传导途径 | 第13页 |
| 1.2.3 渗透性溶质积累 | 第13-14页 |
| 1.2.4 离子转运 | 第14页 |
| 1.2.5 氧化还原代谢 | 第14-15页 |
| 1.2.6 质膜流动性 | 第15页 |
| 1.3 蛋白质组学在微生物胁迫反应中的应用 | 第15-16页 |
| 1.4 蛋白酶纯化的相关研究 | 第16-17页 |
| 1.5 论文的立题背景与意义 | 第17-18页 |
| 1.6 论文的主要研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 米曲霉盐胁迫机制解析 | 第19-33页 |
| 2.1 引言 | 第19页 |
| 2.2 实验材料与设备 | 第19页 |
| 2.2.1 实验材料与试剂 | 第19页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-21页 |
| 2.3.1 菌株培养 | 第19-20页 |
| 2.3.2 蛋白质提取 | 第20页 |
| 2.3.3 胰蛋白酶裂解 | 第20页 |
| 2.3.4 TMT标记 | 第20页 |
| 2.3.5 HPLC分离 | 第20页 |
| 2.3.6 LC-MS/MS蛋白质组学定量分析 | 第20-21页 |
| 2.3.7 数据库检索 | 第21页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第21-32页 |
| 2.4.1 蛋白质组特征 | 第21-23页 |
| 2.4.2 碳水化合物代谢 | 第23-25页 |
| 2.4.3 脂质代谢 | 第25-26页 |
| 2.4.4 氨基酸代谢 | 第26-29页 |
| 2.4.5 脂肪酸代谢 | 第29页 |
| 2.4.6 核酸代谢 | 第29页 |
| 2.4.7 维生素代谢 | 第29页 |
| 2.4.8 其他代谢通路 | 第29-31页 |
| 2.4.9 其他蛋白质 | 第31-32页 |
| 2.5 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 米曲霉耐盐蛋白酶分离纯化和酶学性质研究 | 第33-46页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第33页 |
| 3.2.1 实验材料与试剂 | 第33页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-36页 |
| 3.3.1 菌株培养 | 第33-34页 |
| 3.3.2 种曲制作 | 第34页 |
| 3.3.3 大曲制作 | 第34页 |
| 3.3.4 粗酶液提取 | 第34页 |
| 3.3.5 硫酸铵分级沉淀 | 第34页 |
| 3.3.6 Q-HP阴离子交换层析 | 第34页 |
| 3.3.7 Superdux75凝胶层析 | 第34页 |
| 3.3.8 蛋白酶酶活测定方法 | 第34页 |
| 3.3.9 蛋白浓度测定方法 | 第34-35页 |
| 3.3.10 蛋白酶的SDS-PAGE分析 | 第35页 |
| 3.3.11 蛋白酶的飞行时间质谱鉴定 | 第35页 |
| 3.3.12 蛋白酶三级结构预测 | 第35页 |
| 3.3.13 蛋白酶最适温度和温度稳定性测定 | 第35页 |
| 3.3.14 蛋白酶最适pH和pH稳定性测定 | 第35-36页 |
| 3.3.15 金属离子对蛋白酶活性的影响 | 第36页 |
| 3.3.16 金属离子影响下蛋白酶二级结构测定 | 第36页 |
| 3.3.17 蛋白酶动力学特征测定 | 第36页 |
| 3.3.18 蛋白酶的耐盐特性 | 第36页 |
| 3.3.19 数据分析 | 第36页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第36-45页 |
| 3.4.1 蛋白酶的分离纯化 | 第36-39页 |
| 3.4.2 蛋白酶的SDS-PAGE分析 | 第39-40页 |
| 3.4.3 蛋白酶的耐盐特性 | 第40页 |
| 3.4.4 蛋白酶的飞行时间质谱鉴定 | 第40-41页 |
| 3.4.5 蛋白酶三级结构预测 | 第41页 |
| 3.4.6 金属离子对蛋白酶活性的影响 | 第41-42页 |
| 3.4.7 金属离子对蛋白酶二级结构的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.8 蛋白酶的最适温度及温度稳定性 | 第43页 |
| 3.4.9 蛋白酶的最适pH及pH稳定性 | 第43-44页 |
| 3.4.10 蛋白酶的动力学特征 | 第44-45页 |
| 3.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-47页 |
| 主要结论 | 第46页 |
| 展望 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-58页 |
| 附录Ⅰ 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第58-59页 |
| 附录Ⅱ 米曲霉3.042盐胁迫下的差异蛋白 | 第59-77页 |
| 附录Ⅲ 米曲霉耐盐蛋白酶纯化条件摸索 | 第77-78页 |
