摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第8-19页 |
1.1 课题背景 | 第8页 |
1.2 大曲微生物的主要研究内容和现状 | 第8-11页 |
1.2.1 酒曲简介 | 第8-9页 |
1.2.2 酒曲中微生物种类及研究现状 | 第9-11页 |
1.3 16S rRNA 在大曲微生物菌种鉴定及分析中的应用研究 | 第11-16页 |
1.3.1 原核微生物 rRNA | 第12-13页 |
1.3.2 TA 克隆及蓝白斑筛选 | 第13-14页 |
1.3.3 16S rDNA 序列分析 | 第14-16页 |
1.4 大曲微生物群落物种快速定量识别策略的研究 | 第16-17页 |
1.5 课题来源和研究内容 | 第17-19页 |
1.5.1 课题来源 | 第17页 |
1.5.2 研究目的及意义 | 第17页 |
1.5.3 主要研究内容 | 第17-19页 |
第2章 古井大曲微生物群落结构的分子鉴定 | 第19-30页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 材料与方法 | 第19-25页 |
2.2.1 主要仪器 | 第19页 |
2.2.2 实验试剂及其配制 | 第19-21页 |
2.2.3 供菌菌株 | 第21页 |
2.2.4 实验方法 | 第21-25页 |
2.3 结果与讨论 | 第25-29页 |
2.3.1 古井大曲混合基因组提取 | 第25页 |
2.3.2 PCR 条件摸索及 16S rDNA 扩增引物筛选 | 第25-28页 |
2.3.3 DNA 的连接、转化及筛选 | 第28-29页 |
2.3.4 菌种保存 | 第29页 |
2.4 本章小结 | 第29-30页 |
第3章 古井大曲中微生物 16S rDNA 分子鉴定及多样性分析 | 第30-64页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 实验方法 | 第30页 |
3.3 结果与讨论 | 第30-63页 |
3.3.1 克隆测序结果 | 第30-32页 |
3.3.2 分子鉴定与生物多样性分析 | 第32-63页 |
3.4 本章小结 | 第63-64页 |
第4章 大曲微生物物种快速定量识别策略 | 第64-89页 |
4.1 引言 | 第64页 |
4.2 实验材料与方法 | 第64-65页 |
4.3 结果与讨论 | 第65-87页 |
4.3.1 古井大曲含量最高前 20 个物种排名 | 第65-66页 |
4.3.2 古井大曲中遗传距离最大的 17 个序列信息 | 第66-67页 |
4.3.3 特异性引物设计及验证实验 | 第67-75页 |
4.3.4 高级琼脂糖区分不同物种 16S 短片段 DNA 的技术测试 | 第75-78页 |
4.3.5 限制性内切酶分析及初步验证 | 第78-86页 |
4.3.6 TaqMan-MGB 探针的设计 | 第86-87页 |
4.4 本章小结 | 第87-89页 |
结论 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-94页 |
附录 | 第94-110页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第110-112页 |
致谢 | 第112页 |