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酱香型白酒酿造中Aspergillus hennebergii及其分泌酸性蛋白酶的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
目录第7-11页
第一章 绪论第11-21页
    1.1 中国白酒的固态发酵与曲霉第11页
    1.2 固态法白酒酿造过程中曲霉的主要功能第11-15页
        1.2.1 主要淀粉水解酶种类及其特性第11-14页
        1.2.2 主要蛋白水解酶及其特性第14-15页
    1.3 酱香型白酒酿造中曲霉的研究进展第15-17页
        1.3.1 酱香型白酒酿造微生物研究第15-16页
        1.3.2 酱香型白酒酿造过程曲霉的研究进展第16页
        1.3.3 酱香型白酒酿造过程曲霉菌的功能研究第16-17页
    1.4 曲霉菌分泌胞外蛋白组的研究第17页
    1.5 本研究的内容与意义第17-21页
        1.5.1 解决的科学问题第17-18页
        1.5.2 本文研究的意义第18-19页
        1.5.3 本研究的思路和内容第19-21页
第二章 曲霉多样性及其关键产酶功能曲霉的分离与鉴定第21-38页
    2.1 前言第21页
    2.2 材料与方法第21-24页
        2.2.1 样品采集第21页
        2.2.2 试剂及仪器第21-22页
        2.2.3 培养基与贮液第22页
        2.2.4 曲霉的分离与筛选第22-23页
        2.2.5 酶活测定分析第23页
        2.2.6 菌株的鉴定第23页
        2.2.7 固态法酿造条件对菌株产酶的影响第23-24页
        2.2.8 菌株粗酶对主要酿造工艺胁迫因子的应激表征第24页
        2.2.9 菌株 A.hennebergii 的进化分析第24页
    2.3 结果与讨论第24-37页
        2.3.1 曲霉菌的分离第24-26页
        2.3.2 固态法酿造条件对优势曲霉菌产酶的影响第26-30页
        2.3.3 发酵工艺胁迫因子对菌株粗酶酶活的影响第30-34页
        2.3.4 菌株分泌酶性能比较第34-35页
        2.3.5 A. hennebergii 进化与形态分析第35-37页
    2.4 本章小结第37-38页
第三章 Aspergillus hennebergii 生长及其酿造功能酶分泌的胁迫条件特性表征第38-47页
    3.1 前言第38页
    3.2 材料与方法第38-40页
        3.2.1 菌种与培养基第38页
        3.2.2 主要试剂与仪器第38-39页
        3.2.3 主要酿造胁迫条件对 A.hennebergii 生长及产酶的影响第39-40页
    3.3 结果与讨论第40-45页
        3.3.1 初始水分对 A. hennebergii 生长及产酶的影响第40页
        3.3.2 初始 pH 对 A.hennebergii 生长及产酶的影响第40-41页
        3.3.3 发酵温度对 A. hennebergii 生长及产酶的影响第41-42页
        3.3.4 不同初始乙醇浓度对 A. hennebergii 生长及产酶的影响第42-43页
        3.3.5 不同氮源对 A. hennebergii 生长及产酶的影响第43页
        3.3.6 不同碳源对 A. hennebergii 生长及产酶的影响第43-44页
        3.3.7 不同无机盐对 A.hennebergii 生长及产酶的影响第44页
        3.3.8 不同发酵方式对 A.hennebergii 生长及产酶的影响第44-45页
    3.4 本章小节第45-47页
第四章 Aspergillus hennebergii 分泌胞外蛋白的分析第47-59页
    4.1 前言第47页
    4.2 材料与方法第47-49页
        4.2.1 菌株第47页
        4.2.2 主要试剂与仪器第47页
        4.2.3 主要溶液配制第47-48页
        4.2.4 菌株发酵培养第48页
        4.2.5 蛋白的提取第48页
        4.2.6 二维电泳实验第48-49页
        4.2.7 凝胶扫描和图像分析第49页
        4.2.8 蛋白质鉴定第49页
    4.3 结果与讨论第49-58页
        4.3.1 A. hennebergii 胞外蛋白研究方法的确定第49-52页
        4.3.2 A. hennebergii 分泌胞外蛋白的分析第52-55页
        4.3.3 不同发酵方式分泌的相同胞外酶第55页
        4.3.4 不同发酵条件下分泌胞外蛋白的差异性第55-58页
    4.4 本章小结第58-59页
第五章 Aspergillus hennebergii 分泌胞外酸性蛋白酶的纯化及其酶学性质研究第59-77页
    5.1 前言第59页
    5.2 材料与方法第59-62页
        5.2.1 菌种与培养基第59页
        5.2.2 主要试剂与仪器第59页
        5.2.3 缓冲液第59页
        5.2.4 菌株培养第59页
        5.2.5 蛋白提取与纯化第59-60页
        5.2.6 纯酶动力学分析第60-61页
        5.2.7 纯化酶的光学性质第61页
        5.2.8 纯酶的最适 pH 值与 pH 稳定性第61页
        5.2.9 纯酶的最适温度与温度稳定性第61-62页
        5.2.10 金属离子对纯酶酶活的影响第62页
        5.2.11 抑制剂对纯化酶酶活的影响第62页
        5.2.12 底物特异性分析第62页
        5.2.13 纯化酶的圆二色性第62页
    5.3 结果与讨论第62-76页
        5.3.1 菌株分泌酸性蛋白酶的纯化第62-64页
        5.3.2 纯化酶动力学参数第64-66页
        5.3.3 纯化酶的光谱特征第66-67页
        5.3.4 最适 pH 与 pH 的稳定性第67-68页
        5.3.5 最适温度与热稳定性第68-69页
        5.3.6 金属离子对纯酶酶活的影响第69-70页
        5.3.7 抑制剂对纯酶酶活的影响第70-71页
        5.3.8 纯酶的底物特异性第71页
        5.3.9 纯酶二级结构的圆二色性第71-72页
        5.3.10 酿造工艺胁迫因子对纯酶二级结构的影响第72-76页
    5.4 本章小结第76-77页
第六章 Aspergillus hennebergii 酸性蛋白酶固态发酵功能验证第77-87页
    6.1 前言第77页
    6.2 材料与方法第77-78页
        6.2.1 菌种与试材第77页
        6.2.2 主要试剂与仪器第77页
        6.2.3 原料预处理与固态发酵第77-78页
        6.2.4 分析方法第78页
        6.2.5 数据处理方法第78页
    6.3 结果与讨论第78-86页
        6.3.1 挥发性风味成分的影响第78-80页
        6.3.2 S.cerevisiae 生物量的变化第80-81页
        6.3.3 乙醇浓度的变化第81-82页
        6.3.4 氨基酸态氮含量的影响第82-83页
        6.3.5 还原糖含量的影响第83-84页
        6.3.6 总酸含量的影响第84页
        6.3.7 蛋白水解度的影响第84-86页
    6.4 本章小结第86-87页
主要结论与展望第87-90页
    主要结论第87-88页
    展望第88-90页
论文主要创新点第90-91页
致谢第91-92页
参考文献第92-101页
附录:图(表)第101-108页
附录:作者在攻读博士学位期间发表的论文第108页

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