| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 引言 | 第11-28页 |
| ·立题背景及意义 | 第11-13页 |
| ·食品微生物快速检测是食品安全体系的重要组成部分 | 第11-12页 |
| ·苹果浓缩汁行业所面临主要质量问题 | 第12-13页 |
| ·耐热菌的简介 | 第13-16页 |
| ·耐热菌的研究概况 | 第13-14页 |
| ·耐热菌的生物学特征 | 第14-15页 |
| ·耐热菌的危害 | 第15-16页 |
| ·耐热菌研究现状 | 第16-18页 |
| ·分离培养基 | 第16-17页 |
| ·耐热菌的检测技术研究 | 第17-18页 |
| ·耐热菌代谢产物的检测技术 | 第18页 |
| ·耐热菌控制 | 第18页 |
| ·环介导等温扩增（LAMP）技术 | 第18-27页 |
| ·LAMP 法的概述 | 第18-19页 |
| ·LAMP 法的特点 | 第19-20页 |
| ·LAMP 法的引物设计 | 第20-21页 |
| ·LAMP 法的扩增原理 | 第21-24页 |
| ·LAMP 法产物的检测方法 | 第24-25页 |
| ·LAMP 法的应用 | 第25-27页 |
| ·研究内容 | 第27-28页 |
| 2 材料和方法 | 第28-39页 |
| ·试验材料与仪器 | 第28-30页 |
| ·试验菌株 | 第28页 |
| ·仪器与设备 | 第28页 |
| ·主要培养基 | 第28-29页 |
| ·样品与生化试剂 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-32页 |
| ·菌种的培养 | 第30页 |
| ·细菌DNA 模板的提取 | 第30-32页 |
| ·LAMP 引物设计及LAMP 主要操作 | 第32-33页 |
| ·引物设计 | 第32-33页 |
| ·LAMP 和PCR 反应体系 | 第33页 |
| ·LAMP 和PCR 主要操作程序 | 第33页 |
| ·LAMP 扩增产物的分析 | 第33-34页 |
| ·LAMP 产物的可视结果分析 | 第33-34页 |
| ·LAMP 产物的凝胶成像分析 | 第34页 |
| ·LAMP 产物酶切结果分析鉴定 | 第34页 |
| ·LAMP 反应条件优化 | 第34-35页 |
| ·适宜镁离子浓度选择 | 第34页 |
| ·Bst DNA 聚合酶对试验结果的影响 | 第34页 |
| ·适宜dNTPs 浓度选择 | 第34页 |
| ·反应时间的优化 | 第34页 |
| ·反应温度的优化 | 第34-35页 |
| ·引物的优化 | 第35页 |
| ·LAMP 引物特异性的检测 | 第35页 |
| ·耐热菌的灵敏度检测 | 第35页 |
| ·LAMP 反应的灵敏度检测 | 第35页 |
| ·PCR 反应的灵敏度检测 | 第35页 |
| ·人工污染果汁中耐热菌模板DNA 提取方法的比较 | 第35-38页 |
| ·普通热裂解法 | 第36页 |
| ·化学试剂法 | 第36页 |
| ·试剂盒法（BS423 细菌基因组DNA 提取试剂盒） | 第36-37页 |
| ·FTA 滤膜法 | 第37页 |
| ·微波炉提取法 | 第37页 |
| ·氯化苄法 | 第37-38页 |
| ·人工污染果汁中耐热菌的检出限 | 第38-39页 |
| ·人工污染果汁中耐热菌的DNA 提取 | 第38页 |
| ·LAMP 的检出限 | 第38页 |
| ·PCR 的检出限 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-49页 |
| ·LAMP 扩增产物的分析 | 第39-40页 |
| ·LAMP 扩增产物的可视结果 | 第39页 |
| ·LAMP 扩增产物的电泳分析 | 第39-40页 |
| ·LAMP 扩增产物的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第40-44页 |
| ·Mg~(2+)浓度的优化 | 第40-41页 |
| ·Bst DNA 聚合酶的优化 | 第41页 |
| ·dNTPs 浓度的优化 | 第41页 |
| ·反应时间的优化 | 第41-42页 |
| ·反应温度的优化 | 第42页 |
| ·引物的优化 | 第42-44页 |
| ·引物特异性的研究 | 第44-45页 |
| ·LAMP 引物特异性的研究 | 第44-45页 |
| ·PCR 引物特异性的研究 | 第45页 |
| ·耐热菌纯培养灵敏度的研究 | 第45-46页 |
| ·LAMP 检测耐热菌的灵敏度 | 第45-46页 |
| ·PCR 检测耐热菌的灵敏度 | 第46页 |
| ·果汁中耐热菌DNA 提取方法比较 | 第46-47页 |
| ·人工污染果汁中耐热菌检出限的研究 | 第47-49页 |
| ·LAMP 检测人工污染果汁中耐热菌的检出限 | 第47-48页 |
| ·PCR 检测人工污染果汁中耐热菌的检出限 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·环介导等温扩增（LAMP）方法检测耐热菌方法学评价 | 第49页 |
| ·靶基因的选择 | 第49页 |
| ·LAMP 引物的确定 | 第49-50页 |
| ·LAMP 反应条件的优化 | 第50页 |
| ·镁离子（Mg~(2+)）浓度 | 第50页 |
| ·dNTPs 浓度 | 第50页 |
| ·DNA 聚合酶 | 第50页 |
| ·LAMP 方法的局限性 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录A | 第58-59页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |