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牛肉风味强化肽在酿酒酵母中的克隆和表达

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
1 前言第9-25页
   ·生物活性肽第9页
     ·生物活性肽的分类第9页
     ·生物活性肽的特点第9页
   ·食品感官肽第9-12页
     ·肽呈味作用的特点第9-10页
     ·肽呈味功能的多样性第10-12页
   ·牛肉风味强化肽第12-13页
   ·生物活性肽的生产方法第13-15页
     ·生物活性肽的传统生产方法第13-15页
     ·生物技术生产风味肽的研究进展第15页
     ·生物技术生产牛肉风味强化肽的研究进展第15页
   ·酿酒酵母表达系统第15-21页
     ·酿酒酵母表达系统的特点第16页
     ·酿酒酵母的常用载体第16-17页
     ·酿酒酵母的筛选标记和转化第17-18页
     ·影响酵母表达外源蛋白的因素第18-21页
     ·表达蛋白的纯化方法第21页
   ·重组酵母菌的组成型表达第21-23页
     ·优化重组酵母菌摇瓶发酵条件第21-22页
     ·重组酵母菌的高密度发酵表达第22-23页
   ·本课题研究的目的与研究内容第23-25页
     ·研究的目的和意义第23-24页
     ·研究的主要内容第24页
     ·主要技术路线图第24-25页
2 材料与方法第25-40页
   ·实验材料第25-29页
     ·菌种与质粒第25页
     ·试剂第25-27页
     ·工具酶及DNA、蛋白质Marker第27页
     ·抗生素第27页
     ·实验仪器第27-28页
     ·培养基第28-29页
   ·实验方法第29-40页
     ·标准溶液的配制第29-31页
     ·组成型表达载体YEp352-16BMP的构建第31-36页
     ·酿酒酵母工程菌W303-1A(YEp-16BMP)的构建第36-37页
     ·工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)发酵表达BMP第37-40页
3 结果与讨论第40-62页
   ·YEp352-16BMP表达载体的构建第40-43页
     ·PCR扩增pGAP9-16BMP片段和酿酒酵母终止子CYC1第41页
     ·YEp352-16BMP表达载体的构建第41-43页
   ·酿酒酵母工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)构建结果分析第43-45页
   ·酿酒酵母工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)摇瓶发酵条件的研究第45-55页
     ·种子质量的研究第45-46页
     ·酿酒酵母工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)摇瓶发酵培养基的研究第46-49页
     ·酿酒酵母工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)摇瓶发酵条件的研究第49-51页
     ·酿酒酵母工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)摇瓶发酵的优化第51-55页
   ·发酵罐发酵表达BMP第55-59页
     ·葡萄糖标准曲线的测定第55页
     ·W303-1A(YEp352-16BMP)在5L发酵罐中的分批培养第55-57页
     ·W303-1A(YEp352-16BMP)在5L发酵罐中的补料分批培养第57-59页
   ·16BMP在发酵液中的稳定性第59-60页
   ·中空纤维超滤浓缩发酵液中的BMP第60-62页
4 结论第62-64页
   ·表达载体YEp352-16BMP的构建第62页
   ·工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)的构建第62页
   ·工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)摇瓶培养的研究第62页
   ·工程菌W303-1A(YEp352-16BMP)高密度发酵的研究第62-63页
     ·分批发酵第62-63页
     ·补料分批发酵第63页
   ·中空纤维超滤膜浓缩发酵液中蛋白第63-64页
5 展望第64-65页
6 参考文献第65-71页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第71-72页
8 致谢第72页

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