| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 生物胺简介 | 第9-10页 |
| 1.1.1 生物胺的分类 | 第9-10页 |
| 1.1.2 生物胺的生理作用和毒性 | 第10页 |
| 1.1.3 生物胺的检测方法 | 第10页 |
| 1.2 果酒中生物胺的来源和去除方法 | 第10-12页 |
| 1.3 生物胺分解菌株在食品中的应用 | 第12-14页 |
| 1.4 微生物组胺分解酶的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 本论文的研究意义和主要研究内容 | 第15-17页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第15-16页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第16-17页 |
| 2 多功能乳酸菌的筛选和鉴定 | 第17-32页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 材料与方法 | 第17-23页 |
| 2.2.1 菌种 | 第17页 |
| 2.2.2 培养基 | 第17-18页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.4 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.5 研究方法 | 第20-23页 |
| 2.2.5.1 乳酸菌的筛选方法 | 第20页 |
| 2.2.5.2 具有组胺降解活性的菌株的筛选方法 | 第20-21页 |
| 2.2.5.3 降酸菌株的筛选方法 | 第21页 |
| 2.2.5.4 抗性筛查方法 | 第21-22页 |
| 2.2.5.5 菌株的形态学鉴定方法 | 第22页 |
| 2.2.5.6 糖发酵产酸实验方法 | 第22页 |
| 2.2.5.7 乳酸菌DNA的提取及 16S rDNA和recA基因的测序方法 | 第22-23页 |
| 2.2.5.9 数据处理方法 | 第23页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第23-31页 |
| 2.3.1 乳酸菌的分离和筛选 | 第23-24页 |
| 2.3.2 具有生物胺降解活性的菌株的筛选 | 第24-25页 |
| 2.3.3 具有降酸活性的菌株的筛选 | 第25页 |
| 2.3.4 乳酸菌抗性试验分析 | 第25-28页 |
| 2.3.4.1 菌株对乙醇的抗性分析 | 第25-26页 |
| 2.3.4.2 菌株对pH的抗性分析 | 第26页 |
| 2.3.4.3 菌株对SO_2的抗性分析 | 第26-27页 |
| 2.3.4.4 菌株对复合因子的抗性分析 | 第27-28页 |
| 2.3.5 筛选乳酸菌的鉴定分析 | 第28-31页 |
| 2.3.5.1 形态学观察和扫描电镜实验 | 第28页 |
| 2.3.5.2 糖发酵产酸实验 | 第28-30页 |
| 2.3.5.3 16S rDNA基因与recA基因的鉴定 | 第30-31页 |
| 2.4 小结 | 第31-32页 |
| 3 植物乳杆菌组胺分解酶的分离纯化 | 第32-48页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与方法 | 第32-38页 |
| 3.2.1 菌种 | 第32页 |
| 3.2.2 培养基 | 第32-33页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第33页 |
| 3.2.4 主要仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.5 溶液配制 | 第34页 |
| 3.2.6 研究方法 | 第34-38页 |
| 3.2.6.1 菌体培养方法 | 第34-35页 |
| 3.2.6.2 组胺分解酶的酶活力测定方法 | 第35-36页 |
| 3.2.6.3 蛋白质含量测定方法 | 第36页 |
| 3.2.6.4 组胺分解酶存在位置的确定方法 | 第36页 |
| 3.2.6.5 细胞的破碎方式 | 第36-37页 |
| 3.2.6.6 组胺分解酶的纯化流程 | 第37-38页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第38-47页 |
| 3.3.1 组胺分解酶活力分布分析 | 第38-39页 |
| 3.3.2 细胞破碎条件分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 硫酸铵沉淀分析 | 第40-42页 |
| 3.3.4 离子交换层析分析 | 第42-43页 |
| 3.3.5 Superdex 75 凝胶过滤层析分析 | 第43-45页 |
| 3.3.6 组胺分解酶的SDS-PAGE分析分析 | 第45-47页 |
| 3.3.7 各步纯化倍数分析 | 第47页 |
| 3.4 小结 | 第47-48页 |
| 4. L. plantarum组胺分解酶的生化特征和酶学性质解析 | 第48-59页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 材料与方法 | 第48-51页 |
| 4.2.1 菌种 | 第48页 |
| 4.2.2 培养基 | 第48-49页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第49页 |
| 4.2.4 主要仪器 | 第49-50页 |
| 4.2.5 溶液的配制 | 第50页 |
| 4.2.6 研究方法 | 第50-51页 |
| 4.2.6.1 菌体培养方法 | 第50页 |
| 4.2.6.2 组胺分解酶的制备方法 | 第50页 |
| 4.2.6.3 酶活力测定方法 | 第50页 |
| 4.2.6.4 N-末端氨基酸序列的测定方法 | 第50页 |
| 4.2.6.5 酸碱稳定性、最适pH | 第50-51页 |
| 4.2.6.6 热稳定性、最适温度 | 第51页 |
| 4.2.6.7 抑制剂和金属离子耐受性 | 第51页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第51-58页 |
| 4.3.1 N-末端氨基酸测定结果分析 | 第51页 |
| 4.3.2 组胺分解酶的N-末端测序结果比对分析 | 第51-53页 |
| 4.3.3 最适pH、酸碱稳定性分析 | 第53-54页 |
| 4.3.4 最适温度、热稳定性分析 | 第54-56页 |
| 4.3.5 抑制剂和金属离子耐受性分析 | 第56-58页 |
| 4.4 小结 | 第58-59页 |
| 5 结论与展望 | 第59-61页 |
| 5.1 主要结论 | 第59页 |
| 5.2 创新点 | 第59-60页 |
| 5.3 展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
| 附件一 筛选的植物乳杆菌SGJ-24 的分子系统学鉴定 | 第68-70页 |
| 附录二 蛋白N端测序服务报告 | 第70-79页 |
