| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 主要缩略语词汇表 | 第13-14页 |
| 第1章 引言 | 第14-24页 |
| 1.1 ROS的作用 | 第14-17页 |
| 1.1.1 ROS在植物气孔运动中的作用 | 第14-16页 |
| 1.1.2 ROS在植物根向重力性中的作用 | 第16页 |
| 1.1.3 ROS在植物细胞增殖和分化中的作用 | 第16页 |
| 1.1.4 ROS在植物根毛和花粉管生长中的作用 | 第16-17页 |
| 1.1.5 ROS在植物维管组织发育中的作用 | 第17页 |
| 1.2 植物细胞中ROS的来源 | 第17-19页 |
| 1.2.1 NADPH氧化酶 | 第17-18页 |
| 1.2.2 细胞壁过氧化物酶 | 第18-19页 |
| 1.2.3 多胺氧化酶 | 第19页 |
| 1.3 多胺和多胺氧化酶 | 第19-22页 |
| 1.3.1 多胺和多胺的代谢 | 第19-20页 |
| 1.3.2 FAD依赖的多胺氧化酶(PAOs) | 第20页 |
| 1.3.3 含铜的多胺氧化酶(CuAOs) | 第20-22页 |
| 1.4 铜胺氧化酶在气孔运动中的作用 | 第22-23页 |
| 1.5 待解决的问题 | 第23-24页 |
| 第2章 材料与方法 | 第24-34页 |
| 2.1 试剂和药品 | 第24页 |
| 2.2 拟南芥(Arabidopsis thaliana)的培养 | 第24-25页 |
| 2.3 大肠杆菌的培养 | 第25页 |
| 2.4 质粒DNA提取(Axygen质粒小量提取法) | 第25页 |
| 2.5 PCR (Polymerase Chain Reaction)体系 | 第25-26页 |
| 2.6 巢式PCR (Nest-PCR) | 第26页 |
| 2.7 限制性内切酶酶切体系 | 第26页 |
| 2.8 T4 DNA连接酶连接体系 | 第26-27页 |
| 2.9 大肠杆菌的转化 | 第27页 |
| 2.10 植物基因组DNA提取 | 第27页 |
| 2.11 拟南芥转基因 | 第27-29页 |
| 2.12 烟草(Nicotiana benthamiana)叶片的瞬时转染 | 第29页 |
| 2.13 GUS染色分析 | 第29-30页 |
| 2.14 Western Blot方法 | 第30-31页 |
| 2.15 激光共聚焦显微镜观察 | 第31页 |
| 2.16 引物序列 | 第31-34页 |
| 第3章 结果与分析 | 第34-72页 |
| 3.1 利用Plant CARE软件分析铜胺氧化酶基因启动子的结构 | 第34-36页 |
| 3.2 载体的构建及转基因植物的鉴定 | 第36-51页 |
| 3.2.1 骨架载体(pCambia1305-GUSA-eGFP-4×Myc)的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.2 铜胺氧化酶家族基因启动子的克隆 | 第37-38页 |
| 3.2.3 将铜胺氧化酶基因的启动子连入骨架载体 | 第38-47页 |
| 3.2.4 用烟草叶片瞬时转化法验证载体 | 第47-49页 |
| 3.2.5 稳定转化拟南芥以及转基因植物的鉴定 | 第49-51页 |
| 3.3 拟南芥铜胺氧化酶家族基因的表达分析 | 第51-70页 |
| 3.3.1 CuAO1的表达分析 | 第51-52页 |
| 3.3.2 CuAO2的表达分析 | 第52-54页 |
| 3.3.3 CuAO3的表达分析 | 第54-56页 |
| 3.3.4 CuAO4的表达分析 | 第56-58页 |
| 3.3.5 CuAO5的表达分析 | 第58-59页 |
| 3.3.6 CuAO6的表达分析 | 第59-61页 |
| 3.3.7 CuAO7的表达分析 | 第61-63页 |
| 3.3.8 CuAO8的表达分析 | 第63-64页 |
| 3.3.9 CuAO9的表达分析 | 第64-66页 |
| 3.3.10 ATAO1的表达分析 | 第66-67页 |
| 3.3.11 铜胺氧化酶基因在叶片气孔保卫细胞及排水器中的表达分析 | 第67-69页 |
| 3.3.12 铜胺氧化酶基因在三周龄植物根中表达的对比分析 | 第69-70页 |
| 3.4 ABA、ACC、SA和暗对保卫细胞铜胺氧化酶基因表达的影响 | 第70-72页 |
| 第4章 讨论 | 第72-76页 |
| 4.1 GUS染色分析和GFP荧光观察的区别 | 第72页 |
| 4.2 铜胺氧化酶家族基因的表达与发育阶段的关系 | 第72-73页 |
| 4.3 铜胺氧化酶家族基因与植物维管束分化及发育有极大的相关性 | 第73页 |
| 4.4 铜胺氧化酶家族基因与气孔运动及发育有紧密联系 | 第73-74页 |
| 4.5 铜胺氧化酶在植物叶片排水器中可能发挥重要功能 | 第74页 |
| 4.6 CuAO5可能在拟南芥根尖分化和发育中发挥重要作用 | 第74-76页 |
| 第5章 总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
