CONTENTS | 第5-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-19页 |
1.1 立题背景 | 第12-13页 |
1.2 研究的目的与意义 | 第13-14页 |
1.3 文献综述 | 第14-18页 |
1.3.1 乳铁蛋白素 | 第14-15页 |
1.3.2 细胞增殖与细胞周期 | 第15-16页 |
1.3.3 细胞分化 | 第16-17页 |
1.3.4 微小RNA | 第17-18页 |
1.4 研究内容 | 第18-19页 |
2 材料与仪器 | 第19-22页 |
2.1 材料 | 第19-20页 |
2.1.1 细胞系 | 第19页 |
2.1.2 乳铁蛋白素 | 第19页 |
2.1.3 实验所用试剂与耗材 | 第19-20页 |
2.1.4 实验所用试剂的配制 | 第20页 |
2.2 仪器设备 | 第20-22页 |
3 方法 | 第22-30页 |
3.1 实验前的准备 | 第22-23页 |
3.2 Jurkat细胞生长曲线确定 | 第23-24页 |
3.2.1 细胞复苏 | 第23页 |
3.2.2 细胞培养 | 第23页 |
3.2.3 细胞计数 | 第23-24页 |
3.2.4 细胞生长曲线确定 | 第24页 |
3.3 光学显微镜观察LfcinB对Jurkat细胞增殖的抑制作用 | 第24页 |
3.4 MTT法检测LfcinB对Jurkat细胞增殖的影响 | 第24-25页 |
3.5 细胞周期检测 | 第25页 |
3.6 荧光显微镜观察LfcinB对Jurkat细胞凋亡的影响 | 第25-26页 |
3.7 NBT还原反应检测LfcinB对Jurkat细胞分化的影响 | 第26页 |
3.8 流式细胞仪检测细胞表面分化抗原CD11b的表达水平 | 第26页 |
3.9 RT-PCR检测miRNA 19b、miRNA 223表达水平 | 第26-29页 |
3.9.1 样品处理 | 第26-27页 |
3.9.2 RNA提取 | 第27页 |
3.9.3 总RNA的完整性和质量检测 | 第27-28页 |
3.9.4 miRNA反转录成cDNA | 第28页 |
3.9.5 引物设计 | 第28-29页 |
3.9.6 RT-PCR反应 | 第29页 |
3.9.7 目的基因表达分析 | 第29页 |
3.10 统计分析 | 第29-30页 |
4 结果与分析 | 第30-44页 |
4.1 Jurkat细胞培养 | 第30页 |
4.2 生长曲线测定 | 第30-31页 |
4.3 Lfcin对Jurkat细胞的增殖抑制作用 | 第31-32页 |
4.3.1 光学显微镜观察结果 | 第31页 |
4.3.2 MTT检测结果 | 第31-32页 |
4.4 LfcinB对Jurkat细胞的周期阻滞作用 | 第32-36页 |
4.5 荧光显微镜观察LfcinB对Jurkat细胞的形态影响 | 第36-37页 |
4.6 NBT还原反应检测LfcinB对Jurkat细胞的分化的影响 | 第37页 |
4.7 LfcinB对Jurkat细胞分化抗原CD11b表达水平的影响 | 第37-40页 |
4.8 LfcinB对Jurkat细胞miRNA 19b、miRNA 223表达水平的影响 | 第40-44页 |
4.8.1 RNA的数量和质量 | 第40-41页 |
4.8.2 RT-PCR结果 | 第41-42页 |
4.8.3 基因表达情况分析 | 第42-44页 |
5 讨论 | 第44-50页 |
5.1 LfcinB抑制Jurkat细胞增殖、诱导凋亡作用 | 第44-45页 |
5.2 LfcinB对Jurkat细胞周期阻滞作用 | 第45-46页 |
5.3 LficnB对Jurkat细胞分化诱导作用 | 第46-47页 |
5.4 LficnB对Jurkat细胞增殖、分化相关miRNA表达水平的影响 | 第47-50页 |
6 结论 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第61页 |