摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-28页 |
1.1 抗生素在畜牧业中的滥用与食品安全 | 第12-17页 |
1.1.1 抗生素在畜牧业中的应用 | 第12-15页 |
1.1.2 抗生素在食品中的残留 | 第15-16页 |
1.1.3 抗生素残留与食品微生物安全 | 第16-17页 |
1.2 生物被膜 | 第17-23页 |
1.2.1 生物被膜的组成 | 第18-19页 |
1.2.2 生物被膜的形成及其调控 | 第19-23页 |
1.3 金黄色葡萄球菌 | 第23-27页 |
1.3.1 金葡菌与食品安全 | 第23-24页 |
1.3.2 金葡菌的二元调控系统 | 第24-27页 |
1.4 本课题的研究背景、意义和内容 | 第27-28页 |
1.4.1 本课题的研究背景和意义 | 第27页 |
1.4.2 主要研究内容 | 第27-28页 |
第二章 抗生素胁迫环境对金葡菌生物被膜形成的影响 | 第28-44页 |
2.1 前言 | 第28页 |
2.2 实验材料与设备 | 第28-30页 |
2.2.1 所用实验菌株 | 第28页 |
2.2.2 实验试剂及材料 | 第28-29页 |
2.2.3 实验仪器与设备 | 第29-30页 |
2.2.4 培养基和常用溶液的配制 | 第30页 |
2.3 实验过程与方法 | 第30-33页 |
2.3.1 所用实验菌株与抗生素的筛选 | 第30-31页 |
2.3.2 耐药表型的测定 | 第31-32页 |
2.3.3 抗生素胁迫条件下金葡菌生物被膜的形成 | 第32-33页 |
2.3.4 被膜总量的测定 | 第33页 |
2.3.5 被膜活性的测定 | 第33页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第33-43页 |
2.4.1 耐药表型结果 | 第33-35页 |
2.4.2 对照组金葡菌生物被膜的生长情况 | 第35-36页 |
2.4.3 抗生素胁迫条件对金葡菌生物被膜总量的影响 | 第36-39页 |
2.4.4 抗生素胁迫条件对金葡菌生物被膜活性的影响 | 第39-40页 |
2.4.5 抗生素亚致死浓度下对于生物被膜的促进作用 | 第40-43页 |
2.5 本章小结 | 第43-44页 |
第三章 亚致死浓度抗生素促进生物被膜形成的转录组研究 | 第44-63页 |
3.1 前言 | 第44页 |
3.2 实验材料与设备 | 第44-45页 |
3.2.1 实验菌株 | 第44页 |
3.2.2 实验试剂 | 第44-45页 |
3.2.3 实验仪器与设备 | 第45页 |
3.2.4 培养基和常用溶液的配制 | 第45页 |
3.3 实验过程与方法 | 第45-46页 |
3.3.1 培养时间的确定 | 第45页 |
3.3.2 抗生素亚致死浓度下生物被膜样品的培养 | 第45-46页 |
3.3.3 RNA的提取以及质量检测 | 第46页 |
3.3.4 RNA测序 | 第46页 |
3.3.5 生物信息学分析 | 第46页 |
3.3.6 关键基因的筛选 | 第46页 |
3.4 实验结果与讨论 | 第46-62页 |
3.4.1 制样时间的确定 | 第46-48页 |
3.4.2 RNA质量分析 | 第48页 |
3.4.3 RNA-Seq文库制备及测序 | 第48-49页 |
3.4.4 生物信息学分析 | 第49-58页 |
3.4.5 关键基因的筛选 | 第58-62页 |
3.5 本章小结 | 第62-63页 |
第四章 被膜基因以及TCSs基因表达量的变化 | 第63-77页 |
4.1 前言 | 第63页 |
4.2 实验材料与设备 | 第63-65页 |
4.2.1 所用实验菌株 | 第63页 |
4.2.2 实验试剂及材料 | 第63-64页 |
4.2.3 实验仪器与设备 | 第64-65页 |
4.2.4 培养基和常用溶液的配制 | 第65页 |
4.3 实验过程与方法 | 第65-70页 |
4.3.1 被膜的培养 | 第65页 |
4.3.2 RNA的提取 | 第65页 |
4.3.3 qPCR引物的设计 | 第65-69页 |
4.3.4 RT-qPCR | 第69-70页 |
4.3.4.1 逆转录 | 第69页 |
4.3.4.2 qPCR | 第69-70页 |
4.4 实验结果 | 第70-76页 |
4.4.1 RNA质量检测 | 第70-71页 |
4.4.2 lipA,tagA以及lytR的验证 | 第71页 |
4.4.3 TCS相关基因定量结果 | 第71-73页 |
4.4.4 被膜相关基因定量结果 | 第73-76页 |
4.5 本章小结 | 第76-77页 |
结论与展望 | 第77-81页 |
一、结论 | 第77-79页 |
二、主要创新点 | 第79页 |
三、展望 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-97页 |
附录1 | 第97-112页 |
附录2 | 第112-127页 |
附录3 | 第127-130页 |
附录4 | 第130-142页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第142-143页 |
致谢 | 第143-144页 |
附表 | 第144页 |