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抗生素胁迫下金黄色葡萄球菌生物被膜形成的分子调控机制

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第12-28页
    1.1 抗生素在畜牧业中的滥用与食品安全第12-17页
        1.1.1 抗生素在畜牧业中的应用第12-15页
        1.1.2 抗生素在食品中的残留第15-16页
        1.1.3 抗生素残留与食品微生物安全第16-17页
    1.2 生物被膜第17-23页
        1.2.1 生物被膜的组成第18-19页
        1.2.2 生物被膜的形成及其调控第19-23页
    1.3 金黄色葡萄球菌第23-27页
        1.3.1 金葡菌与食品安全第23-24页
        1.3.2 金葡菌的二元调控系统第24-27页
    1.4 本课题的研究背景、意义和内容第27-28页
        1.4.1 本课题的研究背景和意义第27页
        1.4.2 主要研究内容第27-28页
第二章 抗生素胁迫环境对金葡菌生物被膜形成的影响第28-44页
    2.1 前言第28页
    2.2 实验材料与设备第28-30页
        2.2.1 所用实验菌株第28页
        2.2.2 实验试剂及材料第28-29页
        2.2.3 实验仪器与设备第29-30页
        2.2.4 培养基和常用溶液的配制第30页
    2.3 实验过程与方法第30-33页
        2.3.1 所用实验菌株与抗生素的筛选第30-31页
        2.3.2 耐药表型的测定第31-32页
        2.3.3 抗生素胁迫条件下金葡菌生物被膜的形成第32-33页
        2.3.4 被膜总量的测定第33页
        2.3.5 被膜活性的测定第33页
    2.4 实验结果与讨论第33-43页
        2.4.1 耐药表型结果第33-35页
        2.4.2 对照组金葡菌生物被膜的生长情况第35-36页
        2.4.3 抗生素胁迫条件对金葡菌生物被膜总量的影响第36-39页
        2.4.4 抗生素胁迫条件对金葡菌生物被膜活性的影响第39-40页
        2.4.5 抗生素亚致死浓度下对于生物被膜的促进作用第40-43页
    2.5 本章小结第43-44页
第三章 亚致死浓度抗生素促进生物被膜形成的转录组研究第44-63页
    3.1 前言第44页
    3.2 实验材料与设备第44-45页
        3.2.1 实验菌株第44页
        3.2.2 实验试剂第44-45页
        3.2.3 实验仪器与设备第45页
        3.2.4 培养基和常用溶液的配制第45页
    3.3 实验过程与方法第45-46页
        3.3.1 培养时间的确定第45页
        3.3.2 抗生素亚致死浓度下生物被膜样品的培养第45-46页
        3.3.3 RNA的提取以及质量检测第46页
        3.3.4 RNA测序第46页
        3.3.5 生物信息学分析第46页
        3.3.6 关键基因的筛选第46页
    3.4 实验结果与讨论第46-62页
        3.4.1 制样时间的确定第46-48页
        3.4.2 RNA质量分析第48页
        3.4.3 RNA-Seq文库制备及测序第48-49页
        3.4.4 生物信息学分析第49-58页
        3.4.5 关键基因的筛选第58-62页
    3.5 本章小结第62-63页
第四章 被膜基因以及TCSs基因表达量的变化第63-77页
    4.1 前言第63页
    4.2 实验材料与设备第63-65页
        4.2.1 所用实验菌株第63页
        4.2.2 实验试剂及材料第63-64页
        4.2.3 实验仪器与设备第64-65页
        4.2.4 培养基和常用溶液的配制第65页
    4.3 实验过程与方法第65-70页
        4.3.1 被膜的培养第65页
        4.3.2 RNA的提取第65页
        4.3.3 qPCR引物的设计第65-69页
        4.3.4 RT-qPCR第69-70页
            4.3.4.1 逆转录第69页
            4.3.4.2 qPCR第69-70页
    4.4 实验结果第70-76页
        4.4.1 RNA质量检测第70-71页
        4.4.2 lipA,tagA以及lytR的验证第71页
        4.4.3 TCS相关基因定量结果第71-73页
        4.4.4 被膜相关基因定量结果第73-76页
    4.5 本章小结第76-77页
结论与展望第77-81页
    一、结论第77-79页
    二、主要创新点第79页
    三、展望第79-81页
参考文献第81-97页
附录1第97-112页
附录2第112-127页
附录3第127-130页
附录4第130-142页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第142-143页
致谢第143-144页
附表第144页

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