摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-16页 |
1.1 木瓜蛋白酶概述 | 第10页 |
1.1.1 木瓜蛋白酶的研究现状 | 第10页 |
1.1.2 木瓜蛋白酶的分离纯化方法概况 | 第10页 |
1.2 双水相萃取技术概述 | 第10-12页 |
1.2.1 双水相萃取技术原理及特点 | 第10-11页 |
1.2.2 双水相萃取技术的研究进展 | 第11-12页 |
1.3 离子液体在萃取分离技术中的应用 | 第12-13页 |
1.3.1 离子液体双水相的简介 | 第12页 |
1.3.2 离子液体双水相的应用 | 第12-13页 |
1.4 双水相体系分配理论研究 | 第13-15页 |
1.4.1 分配理论 | 第13-14页 |
1.4.2 分配模型的研究 | 第14-15页 |
1.5 本实验研究内容与意义 | 第15-16页 |
2 材料与方法 | 第16-24页 |
2.1 主要试剂及配制方法 | 第16-19页 |
2.1.1 实验试剂 | 第16-17页 |
2.1.2 试剂配制 | 第17-19页 |
2.2 仪器与设备 | 第19页 |
2.3 木瓜蛋白酶的粗提取 | 第19页 |
2.4 木瓜蛋白酶活力测定 | 第19-20页 |
2.5 蛋白质测定方法 | 第20页 |
2.6 相平衡测定方法 | 第20-21页 |
2.6.1 相图测定方法 | 第20-21页 |
2.6.2 离子液体双水相组分测定方法 | 第21页 |
2.6.3 液-液相平衡测定方法 | 第21页 |
2.7 离子液体双水相萃取木瓜蛋白酶试验方法 | 第21-22页 |
2.7.1 无机盐对酶活力的影响 | 第22页 |
2.7.2 不同离子液体对分配行为的影响 | 第22页 |
2.7.3 无机盐浓度对分配行为的影响 | 第22页 |
2.7.4 pH对分配行为的影响 | 第22页 |
2.7.5 响应面试验设计 | 第22页 |
2.8 分配模型建立方法 | 第22-23页 |
2.9 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第23页 |
2.10 数据及图形处理 | 第23-24页 |
3 结果与分析 | 第24-48页 |
3.1 L-酪氨酸标准曲线 | 第24页 |
3.2 牛血清蛋白标准曲线 | 第24-25页 |
3.3 离子液体检测波长确定及标准曲线 | 第25-29页 |
3.4 相图绘制 | 第29-33页 |
3.5 液-液相平衡数据测定及关联 | 第33-34页 |
3.6 离子液体双水相萃取分离蛋白质 | 第34-43页 |
3.6.1 无机盐对酶活力的影响 | 第34页 |
3.6.2 [C_nmim]N(CN)_2-K_2HPO_4的离子液体双水相系统 | 第34-36页 |
3.6.3 [Cnmim]Ac(n=4,6,8)-K_2HPO_4的离子液体双水相系统 | 第36-39页 |
3.6.4 响应面试验设计及方差分析 | 第39-43页 |
3.7 木瓜蛋白酶在离子液体双水相中分配模型的建立 | 第43-45页 |
3.8 模型验证 | 第45-46页 |
3.8.1 硫酸铵分级沉淀鲜木瓜乳汁中的蛋白酶 | 第45-46页 |
3.8.2 分配模型的运用及验证 | 第46页 |
3.9 纯化结果分析 | 第46-48页 |
3.9.1 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第46-47页 |
3.9.2 纯化结果分析 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-50页 |
4.1 离子液体双水相体系双节线的评价 | 第48页 |
4.2 离子液体双水相体系液-液相平衡的评价 | 第48页 |
4.3 木瓜蛋白酶分离纯化技术的评价 | 第48页 |
4.4 木瓜蛋白酶分配模型的评价 | 第48-49页 |
4.5 要进一步研究的内容和方向 | 第49-50页 |
5 结论 | 第50-52页 |
5.1 离子液体双水相体系双节线的研究 | 第50页 |
5.2 离子液体双水相体系液液相平衡的研究 | 第50页 |
5.3 无机盐对酶活力影响的研究 | 第50页 |
5.4 离子液体双水相体系优化萃取木瓜蛋白酶的研究 | 第50页 |
5.5 分配模型的建立 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附录 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |