| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 1 绪论 | 第8-17页 |
| 1.1 反 10，顺 12-共轭亚油酸简介 | 第8页 |
| 1.2 亚油酸异构酶（PAI）的研究进展 | 第8-13页 |
| 1.2.1 PAI的结构及催化反应机理 | 第8-11页 |
| 1.2.2 PAI的异源表达及反 10，顺 12-共轭亚油酸的生物合成 | 第11-13页 |
| 1.3 全细胞催化方法概述 | 第13-14页 |
| 1.4 课题意义及内容 | 第14-17页 |
| 1.4.1 来源及研究意义 | 第14-15页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 培养基配置 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂及配置 | 第17-18页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 菌体培养及收集 | 第18-19页 |
| 2.2.2 生长曲线测定 | 第19页 |
| 2.2.3 粗酶液制备 | 第19页 |
| 2.2.4 酶的分离纯化 | 第19页 |
| 2.2.5 酶学性质分析 | 第19-21页 |
| 2.2.6 全细胞催化剂的制备 | 第21页 |
| 2.2.7 透性化处理方法 | 第21页 |
| 2.2.8 全细胞催化体系及条件 | 第21-23页 |
| 2.2.9 透射电子显微镜（TEM）的前处理 | 第23页 |
| 2.3 分析方法 | 第23-27页 |
| 2.3.1 蛋白浓度的测定 | 第23-24页 |
| 2.3.2 SDS-PAGE凝胶电泳和Western Blot | 第24页 |
| 2.3.3 粗酶液活性测定方法 | 第24页 |
| 2.3.4 纯酶活性测定方法 | 第24-25页 |
| 2.3.5 脂肪酸酸甲酯化及高效气相色谱分析 | 第25-26页 |
| 2.3.6 重组解脂耶氏酵母菌体活力测定方法 | 第26-27页 |
| 3 结果与讨论 | 第27-59页 |
| 3.1 亚油酸异构酶（PAI）的分离纯化 | 第27-30页 |
| 3.1.1 Hitrap DEAE FF阴离子交换层析 | 第27-28页 |
| 3.1.2 Hitrap Butyl HP疏水层析 | 第28页 |
| 3.1.3 Superdux 20010/300GL凝胶过滤层析 | 第28-29页 |
| 3.1.4 分离纯化结果 | 第29-30页 |
| 3.2 亚油酸异构酶（PAI）酶学性质研究 | 第30-36页 |
| 3.2.1 温度对酶活性的影响 | 第30-33页 |
| 3.2.2 pH对酶活性的影响 | 第33页 |
| 3.2.3 金属离子对酶活性的影响 | 第33-34页 |
| 3.2.4 表面活性剂对酶活性的影响 | 第34-36页 |
| 3.2.5 其它脂肪酸对酶活性的影响 | 第36页 |
| 3.3 亚油酸异构酶（PAI）的催化反应动力学研究 | 第36-41页 |
| 3.3.1 底物对酶催化反应的影响 | 第36-38页 |
| 3.3.2 产物对酶催化反应的影响 | 第38-41页 |
| 3.4 全细胞催化剂的制备方法 | 第41-50页 |
| 3.4.1 油酸浓度对全细胞催化的影响 | 第42-48页 |
| 3.4.2 培养时间对全细胞催化的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.3 透性化处理对全细胞催化的影响 | 第49-50页 |
| 3.5 重组解脂耶氏酵母全细胞催化合成反 10，顺 12-共轭亚油酸条件的研究 | 第50-53页 |
| 3.5.1 温度对全细胞催化的影响 | 第50-51页 |
| 3.5.2 pH对全细胞催化的影响 | 第51-52页 |
| 3.5.3 转速对全细胞催化的影响 | 第52页 |
| 3.5.4 限制氧气对全细胞催化的影响 | 第52-53页 |
| 3.6 重组解脂耶氏酵母全细胞催化合成反 10，顺 12-共轭亚油酸体系的研究 | 第53-56页 |
| 3.6.1 缓冲液类型对全细胞催化的影响 | 第53-54页 |
| 3.6.2 缓冲液浓度对全细胞催化的影响 | 第54-55页 |
| 3.6.3 添加乙酸钠对全细胞催化的影响 | 第55页 |
| 3.6.4 底物浓度对全细胞催化的影响 | 第55-56页 |
| 3.7 重组解脂耶氏酵母全细胞多批次催化合成反 10，顺 12-共轭亚油酸的研究 | 第56-59页 |
| 3.7.1 反应时间对全细胞催化的影响 | 第56-57页 |
| 3.7.2 多批次催化对合成反 10，顺 12-共轭亚油酸的影响 | 第57-59页 |
| 主要结论与展望 | 第59-61页 |
| 主要结论 | 第59页 |
| 展望 | 第59-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67页 |
