| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-21页 |
| ·食品级微生物 | 第9-10页 |
| ·食品级微生物的简介与应用 | 第9页 |
| ·枯草芽孢杆菌及其表达系统 | 第9-10页 |
| ·功能性稀少糖 | 第10-12页 |
| ·D-阿洛酮糖的介绍 | 第12-14页 |
| ·D-阿洛酮糖的结构来源与理化性质 | 第12-13页 |
| ·D-阿洛酮糖的功能 | 第13-14页 |
| ·D-阿洛酮糖的生产方法 | 第14页 |
| ·D-阿洛酮糖3-差向异构酶 | 第14-18页 |
| ·D-阿洛酮糖3-差向异构酶的微生物来源 | 第14-15页 |
| ·微生物来源D-阿洛酮糖3-差向异构酶的性质 | 第15-16页 |
| ·D-阿洛酮糖3-差向异构酶的固定化 | 第16-18页 |
| ·本课题立题背景及研究意义 | 第18-19页 |
| ·构建含DPE基因载体的食品级重组枯草芽孢杆菌研究价值 | 第18-19页 |
| ·D-阿洛酮糖研究方面意义 | 第19页 |
| ·论文研究的主要内容 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-33页 |
| ·试验材料 | 第21-24页 |
| ·菌种及载体 | 第21页 |
| ·化学试剂 | 第21-23页 |
| ·实验仪器 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-33页 |
| ·培养基的选择及制备 | 第24页 |
| ·D-阿洛酮糖3-差向异构酶酶活检测 | 第24页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE与Ruminococcus sp.DPE基因序列扩增 | 第24-25页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE与Ruminococcus sp.DPE基因表达质粒的构建 | 第25-26页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE基因在B.subtilis WB600中的表达 | 第26-27页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE的纯化 | 第27-29页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE酶学性质研究 | 第29-30页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE的固定化工艺研究 | 第30-32页 |
| ·C cellulolyticum H10 DPE固定化酶与Ruminococcus sp.DPE固定化酶之间理化性质对比 | 第32-33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-52页 |
| ·CCDPE基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·CCDPE基因的扩增 | 第33页 |
| ·CCDPE的C端含有组氨酸标签的重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·CCDPE基因在重组B.subtilis中的表达 | 第34-35页 |
| ·CCDPE蛋白的纯化 | 第35-36页 |
| ·CCDPE的酶学性质 | 第36-39页 |
| ·温度对酶反应的影响 | 第36-37页 |
| ·pH值对酶反应的影响 | 第37页 |
| ·金属离子对酶反应的影响 | 第37-38页 |
| ·底物特异性研究 | 第38页 |
| ·酶反应动力学研究 | 第38-39页 |
| ·CCDPEase固定化工艺研究 | 第39-45页 |
| ·不同固定化方法对酶活回收率的影响 | 第39-40页 |
| ·固定化工艺条件的优化 | 第40-41页 |
| ·CCDPE固定化酶理化性质 | 第41-45页 |
| ·Ruminococcus sp.DPE基因的克隆表达 | 第45-48页 |
| ·Ruminococcus sp.DPE基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·含RDPE基因的重组质粒的构建(不含组氨酸标签) | 第46-47页 |
| ·RDPE基因在重组B.subtilis 168中的表达以及与含CCDPE基因的在重组B.subtilis WB600的表达的情况之间的对比 | 第47-48页 |
| ·RDPE固定化酶与CCDPE固定化酶理化性质之间的比较 | 第48-52页 |
| ·温度对RDPE固定化酶与CCDPE固定化酶酶活的影响 | 第48-49页 |
| ·pH对RDPE固定化酶与CCDPE固定化酶酶活的影响 | 第49-50页 |
| ·金属离子对RDPE固定化酶与CCDPE固定化酶酶活的影响 | 第50页 |
| ·RDPE固定化酶的热稳定性 | 第50-52页 |
| 4 结论 | 第52-54页 |
| 5 展望 | 第54-55页 |
| 6 参考文献 | 第55-61页 |
| 7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第61-62页 |
| 8 致谢 | 第62页 |
