| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 1 前言 | 第8-16页 |
| ·生物催化概述 | 第8-10页 |
| ·生物催化定义 | 第8页 |
| ·生物催化的优点 | 第8页 |
| ·生物催化方式 | 第8-9页 |
| ·工业规模的生物催化 | 第9-10页 |
| ·羰基还原酶概述 | 第10-14页 |
| ·羰基还原酶分类 | 第10-11页 |
| ·羰基还原酶研究进展及应用 | 第11-14页 |
| ·生物信息学在发现新的羰基还原酶中的应用 | 第14-15页 |
| ·本课题研究目的、意义及内容 | 第15-16页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第15页 |
| ·本课题研究的内容 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-28页 |
| ·实验材料 | 第16-20页 |
| ·菌种与质粒 | 第16页 |
| ·实验主要仪器及耗材 | 第16-17页 |
| ·实验主要试剂 | 第17-18页 |
| ·实验所选用底物 | 第18-19页 |
| ·实验主要用到的缓冲液 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·基因组的提取 | 第20页 |
| ·目的基因的分析及克隆 | 第20-23页 |
| ·目的基因的表达与优化 | 第23-24页 |
| ·蛋白的大量表达及纯化 | 第24页 |
| ·酶学性质测定 | 第24-25页 |
| ·羰基还原酶PasCR底物谱的研究 | 第25-26页 |
| ·羰基还原酶不对称还原苯甲酰甲醛生成(R)-1-苯基-1,2-乙二醇 | 第26页 |
| ·检测方法 | 第26-28页 |
| 3 结果与讨论 | 第28-47页 |
| ·羰基还原酶基因的筛选 | 第28页 |
| ·羰基还原酶的克隆表达、纯化及性质初步测定 | 第28-33页 |
| ·羰基还原酶基因的扩增 | 第28-29页 |
| ·表达质粒的构建及验证 | 第29-30页 |
| ·蛋白的表达及小量纯化 | 第30-32页 |
| ·以4-氯-3-羰基丁酸乙酯为底物对酶进行筛选 | 第32-33页 |
| ·以苯乙酮为底物对酶进行复筛 | 第33页 |
| ·羰基还原酶chr_30449(Pas CR)的序列比对及分析 | 第33-34页 |
| ·羰基还原酶PasCR的表达优化及酶学性质研究 | 第34-47页 |
| ·羰基还原酶PasCR的表达优化 | 第34-36页 |
| ·PasCR的纯化 | 第36页 |
| ·酶学性质测定 | 第36-39页 |
| ·羰基还原酶PasCR对二芳香基甲酮的不对称还原 | 第39-40页 |
| ·羰基还原酶PasCR对其他羰基底物的性质 | 第40-43页 |
| ·PasCR还原苯甲酰甲醛生成光学纯(R)-1-苯基-1,2-乙二醇 | 第43-47页 |
| 4 结论 | 第47-48页 |
| 5 展望 | 第48-49页 |
| 6 参考文献 | 第49-55页 |
| 7 攻读硕士期间发表论文情况 | 第55-56页 |
| 8 致谢 | 第56页 |
