摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写注解 | 第8-13页 |
第一章 绪论 | 第13-39页 |
1.1 单增李斯特菌概况 | 第13-19页 |
1.1.1 李斯特菌属类别 | 第14页 |
1.1.2 李斯特菌病的案例及传染情况 | 第14-16页 |
1.1.3 单增李斯特菌的毒力因子和致病机理 | 第16-19页 |
1.2 单增李斯特菌的检测 | 第19-23页 |
1.2.1 传统检测方法 | 第19-20页 |
1.2.2 免疫学检测方法 | 第20-21页 |
1.2.3 分子生物学检测方法 | 第21-23页 |
1.2.4 全自动微生物分析系统检测 | 第23页 |
1.2.5 生物传感器检测 | 第23页 |
1.3 单增李斯特菌的定量 | 第23-25页 |
1.3.1 传统计数定量 | 第23-24页 |
1.3.2 实时荧光定量PCR技术(RT-PCR) | 第24-25页 |
1.4 单增李斯特菌的分型 | 第25-34页 |
1.4.1 传统分型技术 | 第26-28页 |
1.4.2 传统分型技术的缺点 | 第28-29页 |
1.4.3 分子分型技术 | 第29-34页 |
1.5 分型方法的应用及选择标准 | 第34-36页 |
1.5.1 分型方法的应用 | 第34-35页 |
1.5.2 分型方法的选择标准 | 第35-36页 |
1.6 本文研究目的和主要研究内容 | 第36-39页 |
1.6.1 研究目的 | 第36-37页 |
1.6.2 主要研究内容 | 第37-39页 |
第二章三种分子分型技术对单增李斯特菌的分型 | 第39-57页 |
2.1 前言 | 第39-40页 |
2.2 材料与设备 | 第40-44页 |
2.2.1 实验菌株 | 第40-41页 |
2.2.2 主要仪器及设备 | 第41-42页 |
2.2.3 主要试剂及常用耗材 | 第42-43页 |
2.2.4 常用培养基及主要溶液配制 | 第43-44页 |
2.3 实验方法 | 第44-47页 |
2.3.1 菌株培养和保藏条件 | 第44页 |
2.3.2 单增李斯特菌株全基因组DNA的提取 | 第44页 |
2.3.3 RAPD分型技术 | 第44-45页 |
2.3.4 ERIC-PCR分型技术 | 第45-46页 |
2.3.5 Sau-PCR分型技术 | 第46-47页 |
2.3.6 产物分析 | 第47页 |
2.4 实验结果 | 第47-55页 |
2.4.1 RAPD分型结果 | 第47-50页 |
2.4.2 ERIC-PCR分型结果 | 第50-52页 |
2.4.3 Sau-PCR分型结果 | 第52-55页 |
2.5 讨论 | 第55-57页 |
第三章 三种分子分型技术对单增李斯特菌分型的稳定性 | 第57-68页 |
3.1 引言 | 第57-58页 |
3.2 材料与设备 | 第58-62页 |
3.2.1 实验菌株 | 第58-59页 |
3.2.2 主要仪器及设备 | 第59-60页 |
3.2.3 主要试剂及常用耗材 | 第60-61页 |
3.2.4 常用培养基及主要溶液配制 | 第61-62页 |
3.3 实验方法 | 第62页 |
3.3.1 菌株培养和保藏条件 | 第62页 |
3.3.2 单增李斯特菌株全基因组DNA的提取 | 第62页 |
3.3.3 室温放置培养 | 第62页 |
3.3.4 传代培养 | 第62页 |
3.3.5 分别用两种分型方法进行分型 | 第62页 |
3.3.6 产物分析 | 第62页 |
3.4 实验结果 | 第62-66页 |
3.4.1 室温放置和传代培养的ERIC-PCR分型结果 | 第62-64页 |
3.4.2 室温放置和传代培养的ERIC-PCR进化树分析 | 第64-65页 |
3.4.3 室温放置和传代培养的Sau-PCR分型结果 | 第65-66页 |
3.4.4 室温放置和传代培养的Sau-PCR进化树分析 | 第66页 |
3.5 讨论 | 第66-68页 |
第四章 单增李斯特菌的分离与鉴定 | 第68-76页 |
4.1 引言 | 第68页 |
4.2 材料与设备 | 第68-71页 |
4.2.1 样本来源 | 第68页 |
4.2.2 主要仪器及设备 | 第68-70页 |
4.2.3 主要试剂及常用耗材 | 第70-71页 |
4.2.4 常用培养基及主要溶液配制 | 第71页 |
4.3 实验方法 | 第71-73页 |
4.3.1 采用国标法分离鉴定LM | 第71-72页 |
4.3.2 采用PCR法分离鉴定LM | 第72-73页 |
4.4 实验结果 | 第73-74页 |
4.4.1 PCR电泳结果 | 第73-74页 |
4.4.2 菌株的保存 | 第74页 |
4.5 讨论 | 第74-76页 |
第五章 应用Sau-PCR分型技术对单增李斯特菌分型 | 第76-81页 |
5.1 前言 | 第76页 |
5.2 材料与设备 | 第76-79页 |
5.2.1 实验菌株 | 第76页 |
5.2.2 主要仪器及设备 | 第76-77页 |
5.2.3 主要试剂及常用耗材 | 第77-78页 |
5.2.4 常用培养基及主要溶液配制 | 第78-79页 |
5.3 实验方法 | 第79页 |
5.3.1 Sau-PCR分型技术 | 第79页 |
5.3.2 产物分析 | 第79页 |
5.4 实验结果 | 第79-80页 |
5.5 讨论 | 第80-81页 |
结论与展望 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-95页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
附件 | 第97页 |