| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 论文技术路线设计图 | 第7-13页 |
| 第1章 引言 | 第13-23页 |
| 1.1 酯酶的简介 | 第13-14页 |
| 1.1.1 酯酶的结构 | 第13-14页 |
| 1.1.2 酯酶的分类 | 第14页 |
| 1.2 酯酶的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.2.1 产酯酶微生物 | 第14页 |
| 1.2.2 酯酶催化特性 | 第14-16页 |
| 1.3 微生物酯酶合成己酸乙酯途径简介 | 第16页 |
| 1.3.1 酵母酯酶代谢合成研究 | 第16页 |
| 1.3.2 霉菌酯酶代谢合成研究 | 第16页 |
| 1.3.3 细菌酯酶代谢合成研究 | 第16页 |
| 1.4 酯酶的酶活检测方法 | 第16-18页 |
| 1.4.1 中和滴定法 | 第17页 |
| 1.4.2 比色法 | 第17-18页 |
| 1.4.3 分光光度法 | 第18页 |
| 1.4.4 荧光法 | 第18页 |
| 1.4.5 气相色谱法 | 第18页 |
| 1.5 酯酶的应用前景 | 第18-21页 |
| 1.5.1 食品中的应用 | 第18-19页 |
| 1.5.2 化工行业中的应用 | 第19页 |
| 1.5.3 生物医药中的应用 | 第19-20页 |
| 1.5.4 环保及军工领域中的应用 | 第20页 |
| 1.5.5 在白酒酿造中的应用 | 第20-21页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第21-23页 |
| 第2章 海洋产酯酶菌株的筛选及鉴定 | 第23-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验样品 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 仪器与药品 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.2.1 气相色谱条件 | 第25页 |
| 2.2.2 富集培养 | 第25页 |
| 2.2.3 产酯酶菌株的初筛 | 第25页 |
| 2.2.4 菌株纯化 | 第25页 |
| 2.2.5 制备种子液 | 第25-26页 |
| 2.2.6 产酯酶菌株的复筛 | 第26页 |
| 2.2.7 菌落形态观察 | 第26页 |
| 2.2.8 菌种鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.9 琼脂糖凝胶电泳 | 第27页 |
| 2.2.10 测序及构建系统发育树 | 第27-28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.3.1 气相色谱条件 | 第28页 |
| 2.3.2 产酯酶菌株初筛结果 | 第28-31页 |
| 2.3.3 产酯酶菌株复筛结果 | 第31页 |
| 2.3.4 菌落形态观察结果 | 第31-32页 |
| 2.3.5 分子鉴定结果 | 第32-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-35页 |
| 第3章 芽孢杆菌的产酶性质 | 第35-47页 |
| 3.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.1 菌株 | 第35页 |
| 3.1.2 培养基 | 第35页 |
| 3.1.3 仪器与试剂 | 第35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 GC检测方法 | 第35页 |
| 3.2.2 含水量计算方法 | 第35-36页 |
| 3.2.3 麸曲酶活的检测方法 | 第36页 |
| 3.2.4 发酵液酶活测定 | 第36页 |
| 3.3 培养温度对菌株生长的影响 | 第36-37页 |
| 3.4 芽孢杆菌固体产酶条件优化 | 第37-38页 |
| 3.4.1 产酶培养基对芽孢杆菌代谢产酶的影响 | 第37页 |
| 3.4.2 培养基初始含水量对芽孢杆菌代谢产酶的影响 | 第37页 |
| 3.4.3 培养温度对芽孢杆菌代谢产酶的影响 | 第37页 |
| 3.4.4 培养基初始pH对芽孢杆菌代谢产酶的影响 | 第37-38页 |
| 3.4.5 种子液接种量对芽孢杆菌代谢产酶的影响 | 第38页 |
| 3.4.6 培养时间对芽孢杆菌代谢产酶的影响 | 第38页 |
| 3.5 芽孢杆菌液体产酶条件优化 | 第38-39页 |
| 3.5.1 产酶培养基对酶活的影响 | 第38页 |
| 3.5.2 培养基初始pH对酶活的影响 | 第38页 |
| 3.5.3 培养温度对酶活的影响 | 第38-39页 |
| 3.6 结果与分析 | 第39-46页 |
| 3.6.1 培养温度对菌株生长的影响 | 第39页 |
| 3.6.2 芽孢杆菌固体产酶条件优化 | 第39-44页 |
| 3.6.3 芽孢杆菌液体产酶条件优化 | 第44-46页 |
| 3.7 小结 | 第46-47页 |
| 第4章 芽孢杆菌酯酶的酶学性质 | 第47-69页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第47-49页 |
| 4.1.1 实验仪器与材料 | 第47页 |
| 4.1.2 培养基 | 第47页 |
| 4.1.3 麸曲酯化能力检测方法 | 第47-48页 |
| 4.1.4 酯酶酶活检测方法 | 第48-49页 |
| 4.2 芽孢杆菌粗酶制剂酯化合成条件优化 | 第49-50页 |
| 4.2.1 酯化体系中己酸浓度对酯化力的影响 | 第49页 |
| 4.2.2 酯化体系中乙醇浓度对酯化力的影响 | 第49页 |
| 4.2.3 酯化体系中初始pH对酯化力的影响 | 第49页 |
| 4.2.4 酯化反应温度对酯化力的影响 | 第49-50页 |
| 4.2.5 麸曲用量对酯化力的影响 | 第50页 |
| 4.2.6 酯化合成酸性底物选择性 | 第50页 |
| 4.3 环境条件对芽孢杆菌粗酶液酯化水解酶活的影响 | 第50-52页 |
| 4.3.1 温度对酯酶酶活的影响 | 第51页 |
| 4.3.2 pH对酯酶酶活的影响 | 第51页 |
| 4.3.3 金属离子对酯酶酶活的影响 | 第51页 |
| 4.3.4 水解底物特异性 | 第51-52页 |
| 4.3.5 葡糖糖浓度对酯酶酶活的影响 | 第52页 |
| 4.3.6 乙醇浓度对酯酶酶活的影响 | 第52页 |
| 4.3.7 有机酸对对酯酶酶活的影响 | 第52页 |
| 4.4 结果和讨论 | 第52-68页 |
| 4.4.1 标准曲线的绘制 | 第52-53页 |
| 4.4.2 芽孢杆菌粗酶酯化合成条件优化 | 第53-58页 |
| 4.4.3 环境条件对发酵液酯酶水解酶活的影响 | 第58-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-69页 |
| 第5章 芽孢杆菌无窖泥酿造浓香型白酒的应用 | 第69-78页 |
| 5.1 实验材料 | 第69页 |
| 5.1.1 实验菌株和培养基 | 第69页 |
| 5.1.2 实验仪器与试剂 | 第69页 |
| 5.2 实验方法 | 第69-72页 |
| 5.2.1 GC检测 | 第69页 |
| 5.2.2 混蒸混烧、续渣双轮底发酵工艺 | 第69-70页 |
| 5.2.4 菌株混合培养制曲配方 | 第70-71页 |
| 5.2.5 无窖泥浓香型白酒酿造 | 第71-72页 |
| 5.3 结果 | 第72-76页 |
| 5.3.1 混蒸混烧、续渣双轮底发酵工艺 | 第72页 |
| 5.3.2 菌株混合培养制曲配方 | 第72-73页 |
| 5.3.3 无窖泥浓香型白酒酿造 | 第73-76页 |
| 5.4 小结 | 第76-78页 |
| 第6章 结论与展望 | 第78-82页 |
| 6.1 结论 | 第78-80页 |
| 6.1.1 芽孢杆菌的产酶性质 | 第78-79页 |
| 6.1.2 芽孢杆菌酯酶的酶学性质 | 第79-80页 |
| 6.1.3 芽孢杆菌无窖泥酿造浓香型白酒的应用 | 第80页 |
| 6.2 展望 | 第80-82页 |
| 论文创新点 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附录Ⅰ:攻读硕士学位期间研究成果 | 第89-90页 |
| 文章 | 第89页 |
| 专利 | 第89-90页 |
| 附录Ⅱ:各菌株测序结果 | 第90-93页 |
