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中碳链脂肪酸改善脂变肝细胞损伤和脂代谢紊乱的机制

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-9页
缩略语索引第10-17页
第1章 绪论第17-33页
    1.1 概述第17-18页
    1.2 MCFA的种类及来源第18-19页
    1.3 MCT的物理特性第19页
    1.4 FA的生物学特性第19-21页
        1.4.1 MCFA与LCFA在进入肝脏途径和代谢方式的不同第19-20页
        1.4.2 MCFA的生理功能第20-21页
    1.5 MCT的安全性和潜在的局限性第21页
    1.6 NAFLD发病的原因及机制第21-30页
        1.6.1 饮食对脂肪肝的影响第21-22页
        1.6.2 肝脏自我调节能力第22页
        1.6.3 模型的研究第22-23页
        1.6.4 NAFLD发病的机制第23-24页
        1.6.5 MCFA对细胞凋亡的影响第24页
        1.6.6 MCFA对细胞氧化压力的影响第24-25页
        1.6.7 MCFA对NAFLD细胞免疫调控的影响第25-26页
        1.6.8 脂代谢信号通路的影响第26-30页
    1.7 选题意义、研究内容和创新点第30-33页
        1.7.1 选题的目的及意义第30-31页
        1.7.2 主要研究内容第31页
        1.7.3 总体研究的思路第31-32页
        1.7.4 创新点第32-33页
第2章 NAFLD细胞模型的建立第33-50页
    2.1 前言第33-34页
    2.2 实验材料第34页
        2.2.1 实验细胞第34页
        2.2.2 主要试剂和仪器设备第34页
        2.2.3 相关试剂配制第34页
    2.3 实验方法第34-41页
        2.3.1 细胞的复苏及培养第34-35页
        2.3.2 台盼蓝(Trypan Blue)染色第35页
        2.3.3 FA的配制第35-36页
        2.3.4 MTT实验确定FA的无毒性浓度范围第36-37页
        2.3.5 LDH实验确定FA无毒性的作用时间第37-38页
        2.3.6 细胞凋亡检测第38页
        2.3.7 细胞内脂滴的定性定量观察第38-40页
        2.3.8 扫描电镜检测细胞膜的损伤第40-41页
        2.3.9 数据处理及分析第41页
    2.4 实验结果第41-48页
        2.4.1 细胞的生长状态第41-42页
        2.4.2 FA作用LO2细胞最佳条件的确定第42-43页
        2.4.3 FA作用HepG2细胞最佳条件的确定第43-44页
        2.4.4 FA对LO2细胞脂质沉淀的作用第44-47页
        2.4.5 FA对LO2细胞膜完整性的作用第47-48页
    2.5 分析与讨论第48-49页
    2.6 本章小结第49-50页
第3章 MCFA对人肝脂变细胞凋亡和氧化压力的影响第50-73页
    3.1 前言第50-51页
    3.2 实验材料第51页
        3.2.1 实验细胞第51页
        3.2.2 主要试剂和仪器设备第51页
        3.2.3 相关试剂配制第51页
    3.3 实验方法第51-62页
        3.3.1 细胞的培养第51-52页
        3.3.2 FA的配制第52页
        3.3.3 实验分组第52-53页
        3.3.4 流式细胞仪法检测凋亡第53页
        3.3.5 倒置荧光法检测凋亡第53-54页
        3.3.6 细胞的抗氧化及氧化压力的检测第54-57页
        3.3.7 Caspase-3和Caspase-9酶活性的测定第57-58页
        3.3.8 蛋白双向电泳第58-61页
        3.3.9 二级质谱第61-62页
        3.3.10 数据处理及分析第62页
    3.4 实验结果第62-71页
        3.4.1 FA对脂变细胞凋亡的作用第62-64页
        3.4.2 FA对脂变细胞内氧化压力的测定第64-65页
        3.4.3 FA对脂变细胞Caspase 3和Caspase 9酶活性的检测第65页
        3.4.4 蛋白浓度的测定第65-66页
        3.4.5 辛酸对肝脂变细胞作用的蛋白组学分析第66-71页
    3.5 分析与讨论第71-72页
    3.6 本章小结第72-73页
第4章 MCFA对NAFLD细胞免疫调控的影响第73-84页
    4.1 前言第73页
    4.2 实验材料第73-74页
        4.2.1 实验细胞第73页
        4.2.2 主要试剂和仪器设备第73-74页
        4.2.3 相关试剂配制第74页
    4.3 实验方法第74-80页
        4.3.1 细胞的复苏及培养第74页
        4.3.2 FA的配制第74页
        4.3.3 NAFLD模型的建立及实验分组第74页
        4.3.4 NO和iNOS含量的测定第74-75页
        4.3.5 RT-PCR检测免疫因子在转录水平上的影响第75-78页
        4.3.6 WB检测免疫因子在翻译水平上的影响第78-80页
        4.3.7 数据处理及分析第80页
    4.4 实验结果第80-82页
        4.4.1 FA对脂变细胞NO和iNOS含量的检测第80-81页
        4.4.2 FA对肝脂变细胞在免疫因子转录水平的影响第81-82页
        4.4.3 FA对肝脂变细胞免疫因子在翻译水平的作用第82页
    4.5 分析与讨论第82-83页
    4.6 本章小结第83-84页
第5章 MCFA对NAFLD细胞脂质代谢机制的探究第84-94页
    5.1 前言第84-85页
    5.2 实验材料第85页
        5.2.1 实验细胞第85页
        5.2.2 主要试剂和仪器设备第85页
        5.2.3 相关试剂配制第85页
    5.3 实验方法第85-87页
        5.3.1 细胞的复苏及培养第85页
        5.3.2 FA的配制第85页
        5.3.3 NAFLD模型的建立第85页
        5.3.4 实验分组第85-86页
        5.3.5 FA对脂变细胞活性的检测第86页
        5.3.6 FA对脂变细胞脂质沉淀的检测第86页
        5.3.7 RT-PCR法测定FA对脂变细胞脂肪因子的影响第86页
        5.3.8 ELISA法检测FA对脂变细胞脂肪因子的影响第86-87页
        5.3.9 WB法检测FA对脂变细胞脂肪因子的影响第87页
        5.3.10 数据处理及分析第87页
    5.4 实验结果第87-92页
        5.4.1 FA对肝脂变细胞活性的作用第87-88页
        5.4.2 FA对肝脂变细胞脂质含量的作用第88-89页
        5.4.3 FA对肝脂变细胞脂代谢基因在转录水平的作用第89-90页
        5.4.4 FA对肝脂变细胞脂代谢基因在翻译水平的影响第90-92页
    5.5 分析与讨论第92-93页
    5.6 本章小结第93-94页
第6章 结论与展望第94-97页
    6.1 结论第94-95页
        6.1.1 非酒精脂肪肝模型的建立第94页
        6.1.2 MCFA抑制NAFLD进一步肝损伤的机制第94-95页
        6.1.3 MCFA能对NAFLD进行免疫调控第95页
        6.1.4 MCFA改善NAFLD细胞脂质积累及脂代谢机制的研究第95页
    6.2 展望第95-97页
致谢第97-98页
参考文献第98-109页
附录A 实验仪器设备第109-111页
附录B 实验试剂药品第111-114页
附录C 实验试剂配制第114-115页
附录D 多肽序列信息第115-117页
附录E 一级质谱图第117-120页
作者简介第120-121页

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