摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
缩略语索引 | 第10-17页 |
第1章 绪论 | 第17-33页 |
1.1 概述 | 第17-18页 |
1.2 MCFA的种类及来源 | 第18-19页 |
1.3 MCT的物理特性 | 第19页 |
1.4 FA的生物学特性 | 第19-21页 |
1.4.1 MCFA与LCFA在进入肝脏途径和代谢方式的不同 | 第19-20页 |
1.4.2 MCFA的生理功能 | 第20-21页 |
1.5 MCT的安全性和潜在的局限性 | 第21页 |
1.6 NAFLD发病的原因及机制 | 第21-30页 |
1.6.1 饮食对脂肪肝的影响 | 第21-22页 |
1.6.2 肝脏自我调节能力 | 第22页 |
1.6.3 模型的研究 | 第22-23页 |
1.6.4 NAFLD发病的机制 | 第23-24页 |
1.6.5 MCFA对细胞凋亡的影响 | 第24页 |
1.6.6 MCFA对细胞氧化压力的影响 | 第24-25页 |
1.6.7 MCFA对NAFLD细胞免疫调控的影响 | 第25-26页 |
1.6.8 脂代谢信号通路的影响 | 第26-30页 |
1.7 选题意义、研究内容和创新点 | 第30-33页 |
1.7.1 选题的目的及意义 | 第30-31页 |
1.7.2 主要研究内容 | 第31页 |
1.7.3 总体研究的思路 | 第31-32页 |
1.7.4 创新点 | 第32-33页 |
第2章 NAFLD细胞模型的建立 | 第33-50页 |
2.1 前言 | 第33-34页 |
2.2 实验材料 | 第34页 |
2.2.1 实验细胞 | 第34页 |
2.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第34页 |
2.2.3 相关试剂配制 | 第34页 |
2.3 实验方法 | 第34-41页 |
2.3.1 细胞的复苏及培养 | 第34-35页 |
2.3.2 台盼蓝(Trypan Blue)染色 | 第35页 |
2.3.3 FA的配制 | 第35-36页 |
2.3.4 MTT实验确定FA的无毒性浓度范围 | 第36-37页 |
2.3.5 LDH实验确定FA无毒性的作用时间 | 第37-38页 |
2.3.6 细胞凋亡检测 | 第38页 |
2.3.7 细胞内脂滴的定性定量观察 | 第38-40页 |
2.3.8 扫描电镜检测细胞膜的损伤 | 第40-41页 |
2.3.9 数据处理及分析 | 第41页 |
2.4 实验结果 | 第41-48页 |
2.4.1 细胞的生长状态 | 第41-42页 |
2.4.2 FA作用LO2细胞最佳条件的确定 | 第42-43页 |
2.4.3 FA作用HepG2细胞最佳条件的确定 | 第43-44页 |
2.4.4 FA对LO2细胞脂质沉淀的作用 | 第44-47页 |
2.4.5 FA对LO2细胞膜完整性的作用 | 第47-48页 |
2.5 分析与讨论 | 第48-49页 |
2.6 本章小结 | 第49-50页 |
第3章 MCFA对人肝脂变细胞凋亡和氧化压力的影响 | 第50-73页 |
3.1 前言 | 第50-51页 |
3.2 实验材料 | 第51页 |
3.2.1 实验细胞 | 第51页 |
3.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第51页 |
3.2.3 相关试剂配制 | 第51页 |
3.3 实验方法 | 第51-62页 |
3.3.1 细胞的培养 | 第51-52页 |
3.3.2 FA的配制 | 第52页 |
3.3.3 实验分组 | 第52-53页 |
3.3.4 流式细胞仪法检测凋亡 | 第53页 |
3.3.5 倒置荧光法检测凋亡 | 第53-54页 |
3.3.6 细胞的抗氧化及氧化压力的检测 | 第54-57页 |
3.3.7 Caspase-3和Caspase-9酶活性的测定 | 第57-58页 |
3.3.8 蛋白双向电泳 | 第58-61页 |
3.3.9 二级质谱 | 第61-62页 |
3.3.10 数据处理及分析 | 第62页 |
3.4 实验结果 | 第62-71页 |
3.4.1 FA对脂变细胞凋亡的作用 | 第62-64页 |
3.4.2 FA对脂变细胞内氧化压力的测定 | 第64-65页 |
3.4.3 FA对脂变细胞Caspase 3和Caspase 9酶活性的检测 | 第65页 |
3.4.4 蛋白浓度的测定 | 第65-66页 |
3.4.5 辛酸对肝脂变细胞作用的蛋白组学分析 | 第66-71页 |
3.5 分析与讨论 | 第71-72页 |
3.6 本章小结 | 第72-73页 |
第4章 MCFA对NAFLD细胞免疫调控的影响 | 第73-84页 |
4.1 前言 | 第73页 |
4.2 实验材料 | 第73-74页 |
4.2.1 实验细胞 | 第73页 |
4.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第73-74页 |
4.2.3 相关试剂配制 | 第74页 |
4.3 实验方法 | 第74-80页 |
4.3.1 细胞的复苏及培养 | 第74页 |
4.3.2 FA的配制 | 第74页 |
4.3.3 NAFLD模型的建立及实验分组 | 第74页 |
4.3.4 NO和iNOS含量的测定 | 第74-75页 |
4.3.5 RT-PCR检测免疫因子在转录水平上的影响 | 第75-78页 |
4.3.6 WB检测免疫因子在翻译水平上的影响 | 第78-80页 |
4.3.7 数据处理及分析 | 第80页 |
4.4 实验结果 | 第80-82页 |
4.4.1 FA对脂变细胞NO和iNOS含量的检测 | 第80-81页 |
4.4.2 FA对肝脂变细胞在免疫因子转录水平的影响 | 第81-82页 |
4.4.3 FA对肝脂变细胞免疫因子在翻译水平的作用 | 第82页 |
4.5 分析与讨论 | 第82-83页 |
4.6 本章小结 | 第83-84页 |
第5章 MCFA对NAFLD细胞脂质代谢机制的探究 | 第84-94页 |
5.1 前言 | 第84-85页 |
5.2 实验材料 | 第85页 |
5.2.1 实验细胞 | 第85页 |
5.2.2 主要试剂和仪器设备 | 第85页 |
5.2.3 相关试剂配制 | 第85页 |
5.3 实验方法 | 第85-87页 |
5.3.1 细胞的复苏及培养 | 第85页 |
5.3.2 FA的配制 | 第85页 |
5.3.3 NAFLD模型的建立 | 第85页 |
5.3.4 实验分组 | 第85-86页 |
5.3.5 FA对脂变细胞活性的检测 | 第86页 |
5.3.6 FA对脂变细胞脂质沉淀的检测 | 第86页 |
5.3.7 RT-PCR法测定FA对脂变细胞脂肪因子的影响 | 第86页 |
5.3.8 ELISA法检测FA对脂变细胞脂肪因子的影响 | 第86-87页 |
5.3.9 WB法检测FA对脂变细胞脂肪因子的影响 | 第87页 |
5.3.10 数据处理及分析 | 第87页 |
5.4 实验结果 | 第87-92页 |
5.4.1 FA对肝脂变细胞活性的作用 | 第87-88页 |
5.4.2 FA对肝脂变细胞脂质含量的作用 | 第88-89页 |
5.4.3 FA对肝脂变细胞脂代谢基因在转录水平的作用 | 第89-90页 |
5.4.4 FA对肝脂变细胞脂代谢基因在翻译水平的影响 | 第90-92页 |
5.5 分析与讨论 | 第92-93页 |
5.6 本章小结 | 第93-94页 |
第6章 结论与展望 | 第94-97页 |
6.1 结论 | 第94-95页 |
6.1.1 非酒精脂肪肝模型的建立 | 第94页 |
6.1.2 MCFA抑制NAFLD进一步肝损伤的机制 | 第94-95页 |
6.1.3 MCFA能对NAFLD进行免疫调控 | 第95页 |
6.1.4 MCFA改善NAFLD细胞脂质积累及脂代谢机制的研究 | 第95页 |
6.2 展望 | 第95-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-109页 |
附录A 实验仪器设备 | 第109-111页 |
附录B 实验试剂药品 | 第111-114页 |
附录C 实验试剂配制 | 第114-115页 |
附录D 多肽序列信息 | 第115-117页 |
附录E 一级质谱图 | 第117-120页 |
作者简介 | 第120-121页 |