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酶法合成结构脂位置选择性研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第14-16页
第一章 文献综述第16-28页
    1.1 脂肪酶概述第16-21页
        1.1.1 脂肪酶的特异性第16-18页
            1.1.1.1 脂肪酶的位置特异性第16-17页
            1.1.1.2 脂肪酶的立体特异性第17页
            1.1.1.3 脂肪酶的底物特异性第17-18页
        1.1.2 反应环境介质体系对酶促反应位置选择性的影响第18-20页
            1.1.2.1 无溶剂体系第18页
            1.1.2.2 有机相体系第18-19页
            1.1.2.3 超临界流体体系第19页
            1.1.2.4 反胶束体系第19页
            1.1.2.5 离子液体体系第19页
            1.1.2.6 低共熔溶剂体系第19-20页
        1.1.3 物理辅助处理对酶促反应位置选择性的影响第20-21页
            1.1.3.1 微波处理对酶促反应位置选择性的影响第20页
            1.1.3.2 超声处理对酶促反应位置选择性的影响第20-21页
    1.2 结构脂质的概述第21-22页
        1.2.1 结构脂质的介绍第21页
        1.2.2 结构脂质的制备方法第21-22页
            1.2.2.1 化学法第21页
            1.2.2.2 生物酶法第21-22页
    1.3 长碳链多不饱和脂肪酸的概述第22-24页
        1.3.1 多不饱和脂肪酸的生理功能及研究现状第22-23页
        1.3.2 多不饱和脂肪酸的纯化方法第23-24页
            1.3.2.1 分子蒸馏法第23页
            1.3.2.2 低温结晶法第23页
            1.3.2.3 超临界流体萃取法第23-24页
            1.3.2.4 脂肪酶富集法第24页
            1.3.2.5 色谱分离法第24页
            1.3.2.6 尿素包埋法第24页
    1.4 结构脂质的鉴定及剖析方法第24-27页
        1.4.1 胰脂肪酶与薄层色谱法第25页
        1.4.2 衍生化试剂法第25页
        1.4.3 胰脂肪酶与液相色谱法第25-26页
        1.4.4 核磁共振法第26页
        1.4.5 银离子色谱法第26页
        1.4.6 高效液相色谱-质谱联用法第26-27页
    1.5 课题研究的目的和意义第27页
    1.6 课题研究的内容第27-28页
第二章 固相萃取和气相色谱联用测定结构脂 α、β 位置脂肪酸及甘油酯组成第28-37页
    2.1 实验仪器与试剂第29-30页
        2.1.1 实验仪器第29页
        2.1.2 实验材料与试剂第29页
        2.1.3 脂肪酸缩写说明第29-30页
    2.2 实验方法第30-31页
        2.2.1 甘油酯标准品及实际样品的配制第30页
            2.2.1.1 酶法合成ARA-DAG的样品制备第30页
            2.2.1.2 甘油酯标准品的配制第30页
            2.2.1.3 猪油及高芥酸菜籽油胰脂肪酶水解产物的制备第30页
        2.2.2 固相萃取洗脱条件的优化第30页
        2.2.3 薄层色谱检测第30-31页
        2.2.4 气相色谱检测第31页
    2.3 结果与讨论第31-36页
        2.3.1 固相萃取-气相色谱联用分离结构脂质混合物第31-32页
        2.3.2 固相萃取-气相色谱联用分离甘油酯标准品混合物第32-33页
        2.3.3 固相萃取-气相色谱联用测定猪油及高芥酸菜籽油 β 位置脂肪酸组成第33-36页
    2.4 结论第36-37页
第三章 超声物理辅助酶法合成OPO型SLS的机理研究第37-49页
    3.1 仪器和试剂第38页
        3.1.1 实验仪器第38页
        3.1.2 实验材料与试剂第38页
    3.2 实验条件和方法第38-40页
        3.2.1 超声预处理酶法酸解反应合成OPO型SLs第38页
        3.2.2 脂肪酶的重复使用性研究第38-39页
        3.2.3 Ag+-HPLC-APCI-MS/MS定量分析结构脂质产物TAG第39-40页
        3.2.4 酶促反应动力学常数的测定第40页
    3.3 结果与讨论第40-48页
        3.3.1 Ag+-HPLC-APCI-MS/MS定量分析结构脂质产物TAG第40-41页
        3.3.2 不同脂肪酶在超声预处理条件下对产物中OPO含量的影响第41页
        3.3.3 超声功率对产物中OPO含量及酰基转移率的影响第41-42页
        3.3.4 超声时间对产物中OPO含量及酰基转移率的影响第42-43页
        3.3.5 超声脉冲模式对产物中OPO含量及酰基转移率的影响第43页
        3.3.6 酶促反应底物摩尔比对产物中OPO含量及酰基转移率的影响第43-44页
        3.3.7 酶促反应脂肪酶添加量对产物中OPO含量及酰基转移率的影响第44-45页
        3.3.8 酶促反应温度对产物中OPO含量及酰基转移率的影响第45页
        3.3.9 脂肪酶的重复使用结果第45-46页
        3.3.10 最优条件下超声预处理与常规磁力搅拌方法对比第46-47页
        3.3.11 酶促酸解反应动力学模型第47-48页
    3.4 结论第48-49页
第四章 LC-PUFAS纯化方法的建立及酶法合成APA型结构脂的研究第49-65页
    4.1 仪器与试剂第49-50页
        4.1.1 实验仪器第49-50页
        4.1.2 实验试剂第50页
    4.2 实验方法第50-53页
        4.2.1 微生物菌油乙酯化反应研究第50-51页
        4.2.2 尿素包埋法富集纯化ARA-乙酯的研究第51页
        4.2.3 酶促反应合成APA型结构脂的单因素实验研究第51页
        4.2.4 酶促反应合成APA型结构脂的响应面实验设计第51页
        4.2.5 结构脂产物中TAGs的分离及其脂肪酸组成分析第51-52页
        4.2.6 结构脂产物中sn-2 位脂肪酸组成分析第52页
        4.2.7 结构脂产物中总的TAG组成分析第52-53页
    4.3 结果与讨论第53-64页
        4.3.1 微生物菌油尿素包埋前后脂肪酸组成分析第53-54页
        4.3.2 酶促反应合成APA型结构脂的单因素实验分析与结果第54-56页
            4.3.2.1 酶促反应时间对ARA插入率的影响第54页
            4.3.2.2 酶促反应底物摩尔比对ARA插入率的影响第54-55页
            4.3.2.3 脂肪酶添加量对ARA插入率的影响第55-56页
            4.3.2.4 酶促反应温度对ARA插入率的影响第56页
        4.3.3 酶促反应合成APA型结构脂响应面实验优化第56-63页
            4.3.3.1 统计分析结果第56-58页
            4.3.3.2 响应面模型拟合第58-59页
            4.3.3.3 响应面方差分析第59-60页
            4.3.3.4 响应面条件优化及模型验证第60-63页
        4.3.4 最优条件下结构脂产物中总的TAG组成分析第63-64页
    4.4 结论第64-65页
第五章 全文结论第65-67页
    5.1 固相萃取和气相色谱联用测定结构脂 α、β 位置脂肪酸及甘油酯组成条件第65页
    5.2 超声辅助酶促反应合成OPO结构脂的条件优化及动力学研究第65-66页
    5.3 LC-PUFAS纯化方法的建立及酶法合成APA型结构脂反应条件的优化第66-67页
参考文献第67-78页
致谢第78-79页
作者简历第79页
硕士在读期间发表的科研论文第79页

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