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蛋清中溶菌酶的高效提取及其定量测定方法研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-13页
缩略语表第13-14页
第一章 文献综述第14-24页
 1 溶菌酶的结构与性质第14-15页
   ·溶菌酶的结构与抑菌机理第14-15页
   ·溶菌酶的理化性质第15页
 2 溶菌酶的分离纯化研究进展第15-19页
   ·食盐直接结晶法第16页
   ·离子交换色谱法第16-17页
   ·亲和色谱法第17页
   ·膜色谱技术第17页
   ·超滤法第17-18页
   ·反胶团萃取法第18-19页
   ·膨胀床吸附法第19页
   ·分子印迹技术第19页
 3 溶菌酶的应用研究第19-22页
   ·溶菌酶在食品中的应用第19-21页
     ·在乳制品中的应用第19-20页
     ·在水产品及肉制品保鲜中的应用第20页
     ·在果蔬保鲜中的应用第20页
     ·在低度酒类及饮料中的应用第20-21页
     ·在其他食品中的应用第21页
   ·溶菌酶在医学中的应用第21页
     ·在多种疾病诊断方面的应用第21页
     ·在抗菌消炎、增强免疫力方面的应用第21页
   ·溶菌酶在生物工程中的应用第21-22页
 4 课题构想第22-24页
   ·本课题研究意义第22页
   ·本课题研究内容第22-24页
第二章 离子交换法提取鸡蛋清溶菌酶第24-40页
 1 材料与方法第24-31页
   ·实验材料第24-25页
     ·原料第24页
     ·试剂第24-25页
     ·主要仪器第25页
   ·实验方法第25-31页
     ·溶菌酶标准曲线的绘制第25-26页
     ·阳离子交换树脂提取鸡蛋清溶菌酶工艺第26-27页
     ·单因素实验第27-28页
       ·树脂种类对溶菌酶提取效果的影响第27页
       ·树脂用量对溶菌酶提取效果的影响第27页
       ·吸附时间对溶菌酶提取效果的影响第27页
       ·洗脱液浓度对溶菌酶提取效果的影响第27页
       ·洗脱时间对溶菌酶提取效果的影响第27-28页
     ·正交实验第28页
     ·溶菌酶粗品的超滤纯化工艺第28页
     ·洗脱液中溶菌酶浓度的测定第28-29页
     ·蛋清溶菌酶得率的计算第29页
     ·膜通量的计算第29页
     ·比浊法测定溶菌酶活力第29-30页
       ·培养基的制备第29页
       ·溶壁微球菌菌体活化第29-30页
       ·底物菌悬液的制备第30页
       ·酶液的制备第30页
       ·活力测定第30页
       ·溶菌酶活力的计算第30页
     ·数据分析第30-31页
 2 结果与分析第31-38页
   ·树脂种类对溶菌酶提取效果的影响第31页
   ·树脂用量对溶菌酶提取效果的影响第31-32页
   ·吸附时间对溶菌酶提取效果的影响第32页
   ·洗脱液浓度对溶菌酶提取效果的影响第32-33页
   ·洗脱时间对溶菌酶提取效果的影响第33页
   ·正交实验结果及模型分析第33-38页
     ·正交响应面组合设计实验结果第33页
     ·回归模型的建立与检验第33-35页
     ·回归模型的分析第35-37页
     ·验证试验第37-38页
   ·溶菌酶粗品的超滤除盐及浓缩第38页
   ·溶菌酶的得率和活性第38页
 3 小结与讨论第38-40页
第三章 超滤法分离鸡蛋清溶菌酶第40-53页
 1 材料与方法第41-44页
   ·实验材料第41页
     ·原料第41页
     ·试剂第41页
     ·主要仪器第41页
   ·实验方法第41-44页
     ·超滤设备及膜的准备第41-42页
     ·蛋清料液的前处理第42-43页
     ·蒸馏水超滤实验第43页
     ·超滤法直接分离蛋清溶菌酶的实验设计第43-44页
       ·跨膜压力对溶菌酶分离效果的影响第43页
       ·搅拌速度对溶菌酶分离效果的影响第43页
       ·料液稀释倍数对溶菌酶分离效果的影响第43页
       ·溶液pH值对溶菌酶分离效果的影响第43-44页
     ·膜通量的计算第44页
     ·总蛋白含量的测定第44页
     ·溶菌酶得率的计算第44页
     ·比浊法测定溶菌酶活力第44页
     ·溶菌酶产品纯度的鉴定第44页
 2 结果与讨论第44-51页
   ·蒸馏水超滤实验第44-46页
   ·跨膜压力对溶菌酶分离效果的影响第46页
   ·搅拌速度对溶菌酶分离效果的影响第46-47页
   ·料液稀释倍数对溶菌酶分离效果的影响第47页
   ·溶液pH值对溶菌酶分离效果的影响第47-50页
   ·溶菌酶的得率和活性第50页
   ·溶菌酶的纯度鉴定第50-51页
   ·溶菌酶制品的比较分析第51页
 3 小结与讨论第51-53页
第四章 金纳米粒子做探针共振瑞利散射光谱法测定溶菌酶第53-68页
 1 材料与方法第53-56页
   ·实验材料第53-54页
     ·原料第53-54页
     ·试剂第54页
     ·主要仪器第54页
   ·实验方法第54-56页
     ·主要试剂的配制第54-55页
     ·金纳米粒子的制备第55页
     ·共振Rayleigh散射光谱(RRS光谱)的测定第55页
     ·非线性散射光谱(SOS、FDS光谱)的测定第55-56页
     ·吸收光谱的测定第56页
     ·样品中溶菌酶的定量测定第56页
 2 结果与讨论第56-67页
   ·金纳米粒子及其与溶菌酶结合产物的透射电子显微镜图第56-57页
   ·共振瑞利散射光谱(RRS光谱)第57-58页
   ·吸收光谱第58-59页
   ·非线性散射光谱(SOS光谱和FDS光谱)第59-60页
   ·溶液pH值对Au-lyz体系RRS散射强度的影响第60页
   ·金纳米溶液用量对Au-lyz体系RRS散射强度的影响第60-61页
   ·试剂加入顺序对Au-lyz体系RRS散射强度的影响第61-62页
   ·金纳米粒子与溶菌酶结合产物RRS强度的稳定性第62页
   ·金纳米粒子与溶菌酶结合产物RRS散射强度增强的机理探讨第62-64页
   ·共存物质的影响第64-65页
   ·标准曲线的建立第65页
   ·分析应用第65-67页
     ·合成样品中溶菌酶的定量测定第65-66页
     ·新鲜鸡蛋清中溶菌酶含量的测定第66-67页
 3 小结与讨论第67-68页
第五章 溶菌酶的酶学特性及其体外抑菌活性研究第68-77页
 1 材料与方法第68-72页
   ·实验材料第68-69页
     ·原料第68页
     ·试剂第68-69页
     ·主要仪器第69页
   ·实验方法第69-72页
     ·比浊法测定溶菌酶活力第69页
     ·溶菌酶的酶学性质实验设计第69-70页
       ·pH值对溶菌酶活力的影响第69页
       ·温度对溶菌酶活力的影响第69-70页
       ·溶菌酶的pH稳定性第70页
       ·溶菌酶的温度稳定性第70页
       ·金属离子对溶菌酶活力的影响第70页
       ·表面活性剂对溶菌酶活力的影响第70页
     ·溶菌酶的体外抑菌活性研究第70-72页
       ·培养基的制备第70-71页
       ·菌株活化培养第71页
       ·溶菌酶样品液的制备第71页
       ·溶菌酶抑菌活性的测定第71页
       ·最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)的测定第71-72页
 2 结果与分析第72-76页
   ·pH值对溶菌酶活力的影响第72页
   ·温度对溶菌酶活力的影响第72-73页
   ·溶菌酶活力的pH稳定性第73页
   ·溶菌酶活力的温度稳定性第73-74页
   ·金属离子对溶菌酶活力的影响第74页
   ·表面活性剂对溶菌酶活力的影响第74-75页
   ·溶菌酶对三种供试菌株的抑制作用第75-76页
   ·溶菌酶的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)第76页
 3 小结与讨论第76-77页
第六章 结论与展望第77-79页
 1 结论第77页
 2 实验创新点第77-78页
 3 展望第78-79页
参考文献第79-88页
致谢第88-89页
发表论文情况第89页

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