摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第9-18页 |
1.1 引言 | 第9页 |
1.2 酪蛋白多肽 | 第9-13页 |
1.2.1 酪蛋白的组成 | 第9-10页 |
1.2.2 酪蛋白胶粒的结构模型 | 第10页 |
1.2.3 酪蛋白生物活性肽 | 第10-13页 |
1.2.4 酪蛋白肽的制备 | 第13页 |
1.3 肽的吸收 | 第13-15页 |
1.3.1 肽的肠道吸收方式 | 第13-14页 |
1.3.2 小肽转运的载体 | 第14页 |
1.3.3 小肽吸收的特点及影响其吸收的因素 | 第14-15页 |
1.3.4 促进肽吸收的方式 | 第15页 |
1.4 Caco-2细胞模型 | 第15-16页 |
1.4.1 Caco-2细胞特点 | 第15页 |
1.4.2 Caco-2细胞模型的建立指标 | 第15页 |
1.4.3 Caco-2细胞模型的局限性 | 第15页 |
1.4.4 Caco-细胞模型在营养物质肠道吸收研究中的应用 | 第15-16页 |
1.5 本课题的研究意义、目的与内容 | 第16-18页 |
1.5.1 本课题意义 | 第16页 |
1.5.2 本课题研究目的 | 第16页 |
1.5.3 本课题研究内容 | 第16-18页 |
第2章 酶解法制备酪蛋白肽工艺优化及其分离纯化 | 第18-40页 |
2.1 材料和仪器 | 第18-19页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第18页 |
2.1.2 实验仪器 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-21页 |
2.2.0 酶种的确定 | 第19页 |
2.2.1 酪蛋白水解工艺 | 第19页 |
2.2.2 蛋白水解度的测定 | 第19页 |
2.2.3 酪蛋白多肽含量的测定 | 第19-20页 |
2.2.4 E/S对水解度及多肽量的影响 | 第20页 |
2.2.5 底物浓度对水解度及多肽量的影响 | 第20-21页 |
2.2.6 pH对水解度及多肽含量的影响 | 第21页 |
2.2.7 温度对水解度及多肽含量的影响 | 第21页 |
2.2.8 时间对水解度及多肽含量的影响 | 第21页 |
2.3 响应曲面法对最佳水解工艺优化 | 第21-22页 |
2.4 酶解液超滤 | 第22页 |
2.5 凝胶层析法分离纯化酪蛋白 | 第22-23页 |
2.5.1 凝胶的预处理 | 第22页 |
2.5.2 凝胶的填充过程 | 第22-23页 |
2.5.3 填充质量评估 | 第23页 |
2.5.4 上样与洗脱 | 第23页 |
2.5.5 Sephadex G-10分离条件的优化 | 第23页 |
2.6 实验结果及分析 | 第23-38页 |
2.6.1 多肽质量浓度标准曲线 | 第23-24页 |
2.6.2 E/S对水解度及多肽量的影响 | 第24-25页 |
2.6.3 底物浓度对水解度及多肽的影响 | 第25页 |
2.6.4 pH对水解度及多肽含量的影响 | 第25-26页 |
2.6.5 温度对水解度及多肽含量的影响 | 第26-27页 |
2.6.6 时间对水解度及多肽含量的影响 | 第27-28页 |
2.6.7 响应曲面法对最佳水解工艺优化 | 第28-35页 |
2.6.8 Sephadex G-10分离条件的优化 | 第35-38页 |
2.7 酪蛋白肽分离纯化效果 | 第38-39页 |
2.8 小结 | 第39-40页 |
第3章 酪蛋白肽在Caco-2细胞模型中的转运 | 第40-71页 |
3.1 材料与仪器 | 第40-41页 |
3.1.1 实验材料与试剂 | 第40页 |
3.1.2 实验仪器 | 第40-41页 |
3.2 实验方法 | 第41-44页 |
3.2.1 Caco-2细胞模型的建立 | 第41-42页 |
3.2.2 酪蛋白肽肽库的建立 | 第42页 |
3.2.3 利用Caco-2细胞模型进行酪蛋白肽转运实验 | 第42-43页 |
3.2.4 UPLC-MS相关条件 | 第43-44页 |
3.3 实验结果与分析 | 第44-63页 |
3.3.1 Caco-2细胞模型的建立及评价 | 第44-46页 |
3.3.2 酪蛋白及蛋白酶酶切位点 | 第46-48页 |
3.3.3 杆菌肽对Caco-2细胞氨肽酶抑制效果 | 第48页 |
3.3.4 多肽转运后氨基酸序列的质谱鉴定 | 第48-63页 |
3.4 Caco-2细胞转运出酪蛋白肽的结构分析 | 第63-70页 |
3.4.1 Caco-2细胞转运出酪蛋白肽相关性质 | 第63-68页 |
3.4.2 肽的长度分析 | 第68-69页 |
3.4.3 肽的带电特点分析 | 第69页 |
3.4.4 肽的疏水性分析 | 第69-70页 |
3.4.5 肽的氨基酸组成分析 | 第70页 |
3.5 小结 | 第70-71页 |
全文总结 | 第71-72页 |
论文创新点 | 第72-73页 |
展望 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-82页 |
致谢 | 第82页 |