摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第1章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 引言 | 第12页 |
1.2 大豆过敏 | 第12-16页 |
1.2.1 大豆过敏概述 | 第12-13页 |
1.2.2 大豆过敏危害 | 第13页 |
1.2.3 大豆过敏的临床表现及诊断 | 第13页 |
1.2.4 大豆主要过敏原 | 第13-16页 |
1.3 去糖基化对糖蛋白致敏性的影响 | 第16-18页 |
1.3.1 糖基化的形成 | 第16-17页 |
1.3.2 糖基与致敏性的关系 | 第17页 |
1.3.3 去糖基化的方法 | 第17-18页 |
1.4 物理加工对大豆致敏性影响的研究进展 | 第18-23页 |
1.4.1 热加工 | 第19页 |
1.4.2 辐照 | 第19-20页 |
1.4.3 高压 | 第20-21页 |
1.4.4 高压脉冲电场 | 第21-22页 |
1.4.5 超声波 | 第22-23页 |
1.5 立题背景和研究内容 | 第23-26页 |
1.5.1 立题背景 | 第23-24页 |
1.5.2 研究内容 | 第24-26页 |
第2章 超声波处理大豆7S蛋白的结构表征 | 第26-44页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 材料与设备 | 第26-29页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第26-27页 |
2.2.2 仪器与设备 | 第27页 |
2.2.3 溶液的配制 | 第27-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-34页 |
2.3.1 大豆7S蛋白的提取 | 第29-31页 |
2.3.2 考马斯亮蓝G-250测定7S蛋白浓度 | 第31页 |
2.3.3 样品制备 | 第31页 |
2.3.4 SDS-PAGE电泳检测 | 第31-32页 |
2.3.5 RP-HPLC分析 | 第32-33页 |
2.3.6 紫外可见光谱分析 | 第33页 |
2.3.7 圆二色光谱分析 | 第33页 |
2.3.8 内源性荧光光谱分析 | 第33页 |
2.3.9 外源性荧光光谱分析 | 第33页 |
2.3.10 游离巯基和总巯基含量的分析 | 第33-34页 |
2.4 结果与分析 | 第34-41页 |
2.4.1 考马斯亮蓝G-250测定7S蛋白浓度 | 第34页 |
2.4.2 超声处理前后大豆7S蛋白的SDS-PAGE分析 | 第34-35页 |
2.4.3 超声处理前后大豆7S蛋白的RP-HPLC分析 | 第35-36页 |
2.4.4 超声处理前后大豆7S蛋白的紫外光谱的分析 | 第36-37页 |
2.4.5 超声处理前后大豆7S蛋白圆二色光谱的分析 | 第37-38页 |
2.4.6 超声处理前后大豆7S蛋白内源性荧光光谱的分析 | 第38-39页 |
2.4.7 超声处理前后大豆7S蛋白外源性荧光光谱的分析 | 第39-40页 |
2.4.8 超声处理前后大豆7S蛋白游离巯基和总巯基分析 | 第40-41页 |
2.5 讨论 | 第41-43页 |
2.5.1 超声波处理对大豆7S蛋白一级结构的影响 | 第41-42页 |
2.5.2 超声波处理对大豆7S蛋白二级结构的影响 | 第42页 |
2.5.3 超声波处理对大豆7S蛋白三级结构的影响 | 第42-43页 |
2.6 本章小结 | 第43-44页 |
第3章 超声处理大豆7S蛋白体外消化性、抗原性和致敏性评估 | 第44-59页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 材料与设备 | 第44-47页 |
3.2.1 试剂材料 | 第44-45页 |
3.2.2 主要仪器设备 | 第45页 |
3.2.3 溶液的配制 | 第45-47页 |
3.3 实验方法 | 第47-51页 |
3.3.1 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 | 第47页 |
3.3.2 样品制备 | 第47页 |
3.3.3 体外模拟消化 | 第47-48页 |
3.3.4 SDS-PAG电泳 | 第48页 |
3.3.5 Tricine-SDS-PAGE | 第48-49页 |
3.3.6 间接ELISA方法确定最佳的包被蛋白浓度和一抗稀释倍数 | 第49-50页 |
3.3.7 竞争抑制ELISA评价超声处理7S蛋白消化后产物的IgG结合能力 | 第50页 |
3.3.8 竞争抑制ELISA体外评价超声处理7S蛋白消化后产物的IgE结合能力 | 第50-51页 |
3.4 结果与分析 | 第51-57页 |
3.4.1 考马斯亮蓝G-250测定蛋白浓度 | 第51-52页 |
3.4.2 体外模拟消化 | 第52-54页 |
3.4.3 体外模拟7S消化产物与IgG结合能力 | 第54-56页 |
3.4.4 超声处理7S蛋白的消化产物与IgE结合 | 第56-57页 |
3.5 讨论 | 第57-58页 |
3.5.1 关于超声处理7S蛋白的体外模拟消化 | 第57页 |
3.5.2 关于超声处理7S蛋白消化产物与IgG的结合能力 | 第57页 |
3.5.3 关于超声处理7S蛋白消化产物与IgE的结合能力 | 第57-58页 |
3.6 本章小结 | 第58-59页 |
第4章 超声辅助酶解去糖基化处理对大豆7S蛋白性质的影响 | 第59-78页 |
4.1 引言 | 第59页 |
4.2 材料与设备 | 第59-60页 |
4.2.1 试剂材料 | 第59-60页 |
4.2.2 主要仪器设备 | 第60页 |
4.2.3 溶液的配制 | 第60页 |
4.3 实验方法 | 第60-63页 |
4.3.1 样品制备 | 第60页 |
4.3.2 去糖基化处理 | 第60-61页 |
4.3.3 评估超声辅助酶解去糖基化后大豆7S蛋白的结构变化 | 第61-62页 |
4.3.4 评估超声辅助酶解去糖基化后大豆7S蛋白抗原性与致敏性的变化 | 第62页 |
4.3.5 评估超声辅助酶解去糖基化后大豆7S蛋白理化性质的变化 | 第62-63页 |
4.4 结果与分析 | 第63-75页 |
4.4.1 超声辅助酶解去糖基化后大豆7S蛋白的结构变化趋势 | 第64-70页 |
4.4.2 超声辅助酶解去糖基化大豆7S蛋白抗原性与致敏性的变化 | 第70-72页 |
4.4.3 超声辅助酶解去糖基化后大豆7S理化性质的变化 | 第72-75页 |
4.5 讨论 | 第75-77页 |
4.5.1 关于超声辅助酶解去糖基化处理大豆7S蛋白结构的变化 | 第75-76页 |
4.5.2 关于超声辅助酶解去糖基化处理7S蛋白与IgG的结合能力 | 第76页 |
4.5.3 关于超声辅助酶解去糖基化处理7S蛋白与IgE的结合能力 | 第76-77页 |
4.6 本章小结 | 第77-78页 |
第5章 结论与展望 | 第78-81页 |
5.1 结论 | 第78-79页 |
5.2 创新点 | 第79页 |
5.3 展望 | 第79-81页 |
5.3.1 超声辅助酶解去糖基化处理的7S蛋白模拟体外消化 | 第79-80页 |
5.3.2 确定大豆7S蛋白寡糖部分存在的致敏表位 | 第80-81页 |
致谢 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-87页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第87页 |