| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-37页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 微流控芯片技术的发展概况及其在生化分析中的应用 | 第10-15页 |
| 1.2.1 微流控芯片技术的发展概况 | 第10-11页 |
| 1.2.2 微流控芯片技术在生化分析中的应用 | 第11-15页 |
| 1.2.2.1 微流控芯片技术在核酸分析中的应用 | 第11-13页 |
| 1.2.2.2 微流控芯片技术在蛋白质分析中的应用 | 第13-14页 |
| 1.2.2.3 微流控芯片在细胞分析中的应用 | 第14-15页 |
| 1.2.2.4 微流控芯片技术在小分子、离子分析中的应用 | 第15页 |
| 1.3 化学发光检测在生化分析中的应用 | 第15-21页 |
| 1.3.1 基于小分子催化的化学发光分析方法 | 第16-17页 |
| 1.3.2 基于辣根过氧化物酶(HRP)催化的化学发光分析方法 | 第17-18页 |
| 1.3.3 基于纳米材料的化学发光分析方法 | 第18-20页 |
| 1.3.4 基于G-四链体/血红素DNA酶催化的化学发光分析方法 | 第20-21页 |
| 1.4 信号放大技术在生化分析中的应用 | 第21-26页 |
| 1.4.1 基于纳米材料的信号放大技术在生化分析中的应用 | 第22页 |
| 1.4.2 核酸信号放大技术在生化分析中的应用 | 第22-26页 |
| 1.4.2.1 基于核酸酶作用的信号放大技术在生化分析中的应用 | 第23-25页 |
| 1.4.2.2 无酶核酸信号放大技术在生化分析中的应用 | 第25-26页 |
| 1.5 本论文的立意及主要研究工作 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-37页 |
| 第二章 基于核酸内切酶辅助信号放大G-四链体/血红素DNA酶增敏的微流控芯片电泳化学发光检测microRNA | 第37-55页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 实验部分 | 第37-40页 |
| 2.2.1 试剂与溶液 | 第37-38页 |
| 2.2.2 仪器 | 第38-39页 |
| 2.2.3 溶液配制 | 第39页 |
| 2.2.4 细胞裂解液的制备 | 第39页 |
| 2.2.5 miR-30b的核酸循环信号放大反应 | 第39-40页 |
| 2.2.6 微流控芯片电泳化学发光检测 | 第40页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第40-51页 |
| 2.3.1 方法设计与实验原理 | 第40-41页 |
| 2.3.2 可行性实验 | 第41-42页 |
| 2.3.3 凝胶电泳表征 | 第42页 |
| 2.3.4 基于G-四链体/血红素DNA酶的MCE-CL平台的建立 | 第42-46页 |
| 2.3.4.1 电泳缓冲中SDS浓度的考察 | 第42-43页 |
| 2.3.4.2 芯片电泳分离条件的考察 | 第43-45页 |
| 2.3.4.3 芯片电泳化学发光条件的考察 | 第45-46页 |
| 2.3.5 G-四链体/血红素DNA酶的MCE-CL平台用于miR-30b的检测 | 第46-48页 |
| 2.3.5.1 Bio-G4的浓度及SA用量的优化 | 第46-47页 |
| 2.3.5.2 Probe浓度的考察 | 第47-48页 |
| 2.3.5.3 酶切反应时间 | 第48页 |
| 2.3.6 校准曲线、线性范围及灵敏度 | 第48-49页 |
| 2.3.7 特异性考察 | 第49-50页 |
| 2.3.8 细胞样品分析 | 第50-51页 |
| 2.4 结论 | 第51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 第三章 基于核酸内切酶辅助二元信号放大G-四链体/血红素DNA酶增敏微芯片电泳化学发光同时检测双目标物 | 第55-69页 |
| 3.1 引言 | 第55页 |
| 3.2 实验部分 | 第55-57页 |
| 3.2.1 试剂与溶液 | 第55-56页 |
| 3.2.2 仪器 | 第56页 |
| 3.2.3 溶液配制 | 第56-57页 |
| 3.2.4 二元目标物的同时循环信号放大反应 | 第57页 |
| 3.2.5 血清样品的制备 | 第57页 |
| 3.2.6 微流控芯片电泳化学发光检测 | 第57页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第57-65页 |
| 3.3.1 方法设计与实验原理 | 第57-59页 |
| 3.3.2 可行性实验 | 第59-60页 |
| 3.3.3 凝胶电泳表征 | 第60-61页 |
| 3.3.4 相关实验条件的优化 | 第61-62页 |
| 3.3.4.1 Nicking核酸内切酶用量与反应时间的优化 | 第61-62页 |
| 3.3.4.2 链霉亲和素用量的优化 | 第62页 |
| 3.3.5 校准曲线、线性范围及灵敏度 | 第62-63页 |
| 3.3.6 特异性考察 | 第63-64页 |
| 3.3.7 血清样品分析 | 第64-65页 |
| 3.4 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-69页 |
| 第四章 基于G-四链体/血红素DNA酶增敏微芯片电泳化学发光检测生物素 | 第69-81页 |
| 4.1 引言 | 第69页 |
| 4.2 实验部分 | 第69-71页 |
| 4.2.1 试剂与溶液 | 第69-70页 |
| 4.2.2 仪器 | 第70页 |
| 4.2.3 溶液配制 | 第70页 |
| 4.2.4 生物素和G4标记生物素与链霉亲和素的竞争结合反应 | 第70-71页 |
| 4.2.5 食品及保健品的样品制备 | 第71页 |
| 4.2.6 微流控芯片电泳化学发光检测 | 第71页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第71-78页 |
| 4.3.1 方法设计与实验原理 | 第71-72页 |
| 4.3.2 可行性实验 | 第72-73页 |
| 4.3.3 相关实验条件的优化 | 第73-76页 |
| 4.3.3.1 链霉亲和素的用量 | 第73页 |
| 4.3.3.2 竞争结合反应的时间 | 第73-74页 |
| 4.3.3.3 鲁米诺浓度 | 第74页 |
| 4.3.3.4 双氧水浓度 | 第74-75页 |
| 4.3.3.5 硼砂浓度 | 第75-76页 |
| 4.3.3.6 分离电压 | 第76页 |
| 4.3.4 校准曲线、线性范围及灵敏度 | 第76-77页 |
| 4.3.5 特异性考察 | 第77页 |
| 4.3.6 实际样的考察 | 第77-78页 |
| 4.4 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表和待发表的论文 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
