| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 主要缩略词注释表 | 第8-9页 |
| 目录 | 第9-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 产肠毒性大肠杆菌的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.1.1 粘附素 | 第12页 |
| 1.1.2 不耐热肠毒素 LT (heat-labile enterotoxin) | 第12-13页 |
| 1.1.3 耐热肠毒素 ST (heat-stable enterotoxin ) | 第13页 |
| 1.2 乳酸菌作用机制研究进展 | 第13-16页 |
| 1.2.1 益生菌抑制致病菌研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.2 乳酸菌的免疫调节功能 | 第15-16页 |
| 1.3 秀丽隐杆线虫作为实验动物模型的研究进展 | 第16-24页 |
| 1.3.1 秀丽隐杆线虫的生物学特征 | 第16页 |
| 1.3.2 秀丽隐杆线虫的免疫系统 | 第16-22页 |
| 1.3.3 线虫作为实验动物模型在致病菌研究中的应用 | 第22-24页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第24页 |
| 1.5 研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 以秀丽隐杆线虫为模型筛选拮抗 ETEC JG280 的乳酸菌 | 第26-34页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 材料 | 第26-28页 |
| 2.2.1 虫株 | 第26-27页 |
| 2.2.2 菌种 | 第27页 |
| 2.2.3 培养基及主要试剂 | 第27页 |
| 2.2.4 主要仪器及耗材 | 第27页 |
| 2.2.5 线虫用培养基、缓冲液及主要溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.3 方法 | 第28-29页 |
| 2.3.1 细菌的培养 | 第28页 |
| 2.3.2 线虫动物模型的建立 | 第28-29页 |
| 2.3.3 乳酸菌的耐酸耐胆盐特性 | 第29页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第29-33页 |
| 2.4.1 线虫感染 ETEC JG280 致死浓度的确定 | 第29-30页 |
| 2.4.2 保护线虫的乳酸菌的筛选 | 第30-31页 |
| 2.4.3 乳酸菌的耐酸耐胆盐特性 | 第31-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 玉米乳杆菌 LB1 抑制 ETEC JG280 肠毒素基因的表达 | 第34-48页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 材料 | 第34页 |
| 3.2.1 虫株 | 第34页 |
| 3.2.2 菌种 | 第34页 |
| 3.3 方法 | 第34-39页 |
| 3.3.1 细菌培养 | 第34-35页 |
| 3.3.2 线虫体内细菌定植 | 第35页 |
| 3.3.3 线虫电镜切片 | 第35页 |
| 3.3.4 RNA 提取 | 第35-36页 |
| 3.3.5 反转录和实时荧光 PCR | 第36-37页 |
| 3.3.6 ETEC JG280 肠毒素基因克隆 | 第37-38页 |
| 3.3.7 乳酸菌对线虫拮抗毒素克隆的作用 | 第38-39页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第39-47页 |
| 3.4.1 玉米乳杆菌 LB1 和罗伊氏乳杆菌 CL11 对 ETEC JG280 定植的影响 | 第39-42页 |
| 3.4.2 玉米乳杆菌 LB1 对 ETEC JG280 肠毒素基因表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.4.3 ETEC JG280 肠毒素克隆对线虫的致死作用 | 第43-45页 |
| 3.4.4 玉米乳杆菌 LB1 保护线虫抵抗肠毒素克隆的致死作用 | 第45-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 玉米乳杆菌 LB1 对秀丽隐杆线虫免疫调节的影响 | 第48-61页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 虫株 | 第48页 |
| 4.2.2 菌种 | 第48-49页 |
| 4.3 方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 细菌培养 | 第49页 |
| 4.3.2 线虫固体培养基实验 | 第49页 |
| 4.3.3 RNA 提取 | 第49-50页 |
| 4.3.4 反转录和实时荧光 PCR | 第50-51页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第51-59页 |
| 4.4.1 玉米乳杆菌 LB1 对线虫防御基因表达的影响 | 第51-53页 |
| 4.4.2 MAPK 和 DAF-16 信号通路是线虫防御 ETEC JG280 的关键信号通路 | 第53-54页 |
| 4.4.3 MAPK 和 DAF-16 信号通路是玉米乳杆菌 LB1 保护线虫抵抗 ETEC JG280 的关键通路 | 第54-56页 |
| 4.4.4 MAPK 和 DAF-16 信号通路控制某些抗菌肽基因的表达 | 第56-58页 |
| 4.4.5 玉米乳杆菌 LB1 通过抗菌肽基因保护线虫抵抗 ETEC JG280 | 第58-59页 |
| 4.5 本章小结 | 第59-61页 |
| 第五章 线虫模型和体外细胞模型研究乳酸菌的比较 | 第61-71页 |
| 5.1 前言 | 第61页 |
| 5.2 材料 | 第61-62页 |
| 5.2.1 虫株 | 第61页 |
| 5.2.2 菌种 | 第61-62页 |
| 5.3 方法 | 第62-64页 |
| 5.3.1 IPEC-J2 细胞的常规培养 | 第62页 |
| 5.3.2 细胞死亡台盼蓝染色实验 | 第62页 |
| 5.3.3 细胞毒性实验 | 第62-63页 |
| 5.3.4 RNA 提取 | 第63页 |
| 5.3.5 逆转录 PCR 和定量 PCR | 第63页 |
| 5.3.6 IPEC-J2 细胞分泌的细胞因子的测定 (ELISA) | 第63-64页 |
| 5.3.7 统计分析 | 第64页 |
| 5.4 结果与讨论 | 第64-70页 |
| 5.4.1 14 株乳酸菌对线虫和 IPEC-J2 细胞的保护效果相似 | 第64-66页 |
| 5.4.2 罗伊氏乳杆菌 CL9 在线虫和 IPEC-J2 细胞模型中均能抑制 ETEC JG280 肠毒素基因的表达 | 第66-67页 |
| 5.4.3 罗伊氏乳杆菌 CL9 能保护线虫和 IPEC-J2 细胞抵抗肠毒素克隆的致死作用 | 第67-69页 |
| 5.4.4 罗伊氏乳杆菌 CL9 对线虫和 IPEC-J2 细胞均有免疫调节作用 | 第69-70页 |
| 5.5 本章小结 | 第70-71页 |
| 主要结论 | 第71-72页 |
| 论文创新点 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 附录: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第84页 |
